赤羽病病毒N蛋白单克隆抗体的制备

赤羽病病毒N蛋白单克隆抗体的制备

论文摘要

为制备赤羽病病毒(AKAV)N蛋白的单克隆抗体(MAb),本实验利用原核表达系统表达、纯化的重组N蛋白免疫BALB/c小鼠,三免后取小鼠脾淋巴细胞与SP2/0细胞融合,并以纯化的重组N蛋白为包被抗原,通过间接ELISA筛选出1株稳定分泌抗AKAV N蛋白的MAb杂交瘤细胞株IIG5,检测结果显示IIG5为IgG1/κ链。间接免疫荧光结果显示,IIG5与AKAV感染细胞呈阳性反应,与茨城病病毒、中山病病毒以及蓝舌病病毒1型均呈阴性反应,特异性较好。Western blot结果显示,IIG5能够识别重组的以及AKAV感染细胞中的N蛋白。本研究结果为AKAV检测方法的建立及相关研究奠定基础。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 主要实验材料
  •   1.2 AKAV N蛋白的原核表达与纯化
  •   1.3 动物免疫
  •   1.4 AKAV N蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立
  •   1.5 分泌MAb的杂交瘤细胞株的制备、效价及亚类的测定
  •   1.6 MAb的鉴定
  •     1.6.1 MAb特异性的鉴定
  •     1.6.2 MAb的western blot鉴定
  •     1.6.3 杂交瘤细胞的稳定性检测
  • 2 结果与讨论
  •   2.1 AKAV重组N蛋白的表达及纯化
  •   2.2 检测AKAV N蛋白抗体的间接ELISA方法的建立
  •   2.3 MAb的制备及效价与亚类的鉴定
  •   2.4 MAb的鉴定
  •     2.4.1 MAb特异性的鉴定
  •     2.4.2 MAb的western blot鉴定
  •     2.4.3 杂交瘤细胞的稳定性检测
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 王冰

    关键词: 赤羽病病毒,蛋白,原核表达,单克隆抗体

    来源: 中国预防兽医学报 2019年03期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 黑龙江农垦职业学院

    分类号: S852.65

    页码: 309-312

    总页数: 4

    文件大小: 294K

    下载量: 54

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