利用响应面法优化发酵乳杆菌AR497电转化条件

利用响应面法优化发酵乳杆菌AR497电转化条件

论文摘要

以1株能有效改善小鼠肠炎的发酵乳杆菌AR497为研究对象,在Plackett-Burman试验的基础上选取甘氨酸质量浓度、OD600、电场强度和山梨醇浓度为自变量,电转化效率为响应值,利用Box-Behnken响应面法优化其电转化条件。最优条件为:电场强度15 kV/cm,山梨醇浓度0.6 mol/L,OD6000.2,甘氨酸质量浓度26 g/L。在此条件下,电转化效率高达2.78×105 CFU/μg DNA,比优化前提高了22倍,实现了发酵乳杆菌AR497的高效遗传转化,为后续对其进行遗传改造和解析抗炎机制奠定基础。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与培养基
  •     1.1.1 菌株与质粒
  •     1.1.2 培养基
  •   1.2 发酵乳杆菌AR497感受态制备方法
  •   1.3 发酵乳杆菌AR497感受态效率检测及鉴定方法
  •   1.4 单因素试验对电转化效率的影响
  •   1.5 Plackett-Burman 试验设计
  •   1.6 最陡爬坡试验设计
  •   1.7 Box-Behnken响应面优化试验设计
  • 2 结果与分析
  •   2.1 发酵乳杆菌AR497电转化方法的筛选
  •   2.2 不同洗涤缓冲液对电转化效率的影响
  •   2.3 不同质粒浓度对电转化效率的影响
  •   2.4 不同复苏培养基对电转化效率的影响
  •   2.5 Plackett-Burman 试验筛选关键因素
  •   2.6 最陡爬坡试验结果与分析
  •   2.7 Box-Behnken响应面试验结果与分析
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 韦云莹,赵燕,庄金伟,李江,帕米拉·乃则木丁,陆祎晟,艾连中,熊智强

    关键词: 发酵乳杆菌,感受态细胞,电转化,响应面法

    来源: 食品与发酵工业 2019年07期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

    专业: 生物学,轻工业手工业

    单位: 上海理工大学医疗器械与食品学院上海食品微生物工程研究中心

    基金: 国家自然科学基金(31871776,31771956),十三五国家重点研发计划(2018YFD0502306),上海市自然科学基金(18ZR1426800),上海市曙光计划项目(15SG42)

    分类号: TS201.3

    DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.018922

    页码: 52-58

    总页数: 7

    文件大小: 1791K

    下载量: 266

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