导读:本文包含了增殖膜视网膜色素上皮细胞论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:视网膜,色素,上皮细胞,生长因子,血小板,儿茶素,细胞。
增殖膜视网膜色素上皮细胞论文文献综述
李艳梅,方珍珍,杨霞,高国全,周倜[1]（2019）在《N-cadherin对视网膜色素上皮细胞增殖及迁移侵袭的影响》一文中研究指出【目的】为了明确神经钙黏蛋白(N-cadherin)在糖尿病视网膜病变上皮-间质转化中的作用,探讨N-cadherin对视网膜色素上皮细胞增殖、迁移及侵袭力的影响及作用机制。【方法】分别采用Ad-N-cadherin(Ad-N-cad)、Ad-si N-cadherin(si N-cad)及Ad-GFP、Ad-si Control(si Con)对照腺病毒处理细胞以过表达或沉默N-cadherin,采取葡萄糖(25 mmol/L)处理视网膜色素上皮细胞以模拟高糖状态,使用CCK8试剂检测细胞增殖情况,Transwell小室检测细胞的垂直迁移能力及侵袭能力。【结果】Transwell迁移和侵袭实验结果表明,过表达N-cadherin使迁移至Transwell小室下室的细胞数增加,差异有统计学意义(P <0.05);高糖处理使迁移和侵袭至小室下室的细胞数增加,而干扰N-cadherin的表达可抑制高糖诱导的迁移或侵袭(P <0.05)。CCK8结果显示,干扰N-cadherin可以抑制高糖引起的细胞增殖(P <0.05)。【结论】N-cadherin可促进细胞迁移,干扰N-cadherin可以抑制高糖诱导的细胞增殖、迁移和侵袭。(本文来源于《中山大学学报(医学版)》期刊2019年05期）
刘静,雷春灵,白淑玮,张磊,陈莉[2]（2019）在《miR-29b激活自噬抑制人视网膜色素上皮细胞增殖的实验研究》一文中研究指出目的研究miR-29b激活自噬抑制人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞增殖的作用。方法通过病毒颗粒包装转染RPE细胞24～72 h,在倒置荧光显微镜下观察荧光强度检测感染效率,利用实时定量PCR检测miR-29b mRNA表达。采用凝血酶刺激RPE细胞增殖模拟增生性玻璃体视网膜病变模型。使用0.5×10~3 U·L~(-1)凝血酶预刺激1 h,然后分别加入miR-29b和Lenti-vector空载体刺激24 h。分为空白对照组(Sham组)、凝血酶刺激组(RPE组)、凝血酶刺激组+miR-29b过表达组(RPE+Lenti-29b组)、凝血酶刺激组+空载体组(RPE+Lenti-vector组)。利用MTT微量酶比色法检测各组RPE细胞增殖情况,Western blot观察微管相关蛋白1轻链3(light chain 3,LC3)Ⅱ表达变化。结果在倒置荧光显微镜下观察发现,RPE+Lenti-29b组和RPE+Lenti-vector组90%以上的RPE细胞成功转染,且RPE+Lenti-29b组miR-29 mRNA水平高表达,与其余3组相比差异均有统计学意义(均为P<0.01)。与Sham组比较,其余3组RPE细胞增殖明显,差异均有统计学意义(均为P<0.05),LC3Ⅱ蛋白表达也明显升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05);与RPE+Lenti-29b组比较,RPE组和RPE+Lenti-vector组细胞增殖明显(均为P<0.05),但LC3Ⅱ蛋白表达明显低于RPE+Lenti-29b组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论上调miR-29b表达可激活RPE细胞中LC3Ⅱ蛋白表达,提高细胞自噬水平,抑制RPE细胞增殖,可能在增生性玻璃体视网膜病变发生及发展中扮演重要作用。(本文来源于《眼科新进展》期刊2019年09期）
徐艳春,冯婕妤,胡毅倩,朱茂林,朱煌[3]（2019）在《900 MHz手机辐射对人视网膜色素上皮细胞增殖活性及转化生长因子β2表达的影响》一文中研究指出目的:研究900 MHz手机辐射对人视网膜色素上皮细胞(RPE)增殖活性及转化生长因子β2(TGF-β2)表达的影响。方法:采用体外培养的RPE细胞,给予900 MHz手机电磁辐射者处理作为辐射组,未给予辐射者作为对照组。通过CCK8法检测RPE细胞的增殖活性,Real-Time PCR法检测RPE细胞TGF-β2 m RNA的表达,ELISA法检测RPE细胞培养上清液中TGF-β2的蛋白含量。结果:与对照组相比,辐射组RPE细胞的增殖活性降低,TGF-β2 m RNA表达增加,RPE细胞培养上清中TGF-β2含量上调,且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:900 MHz的手机辐射可能能通过调节TGF-β2的表达和释放导致RPE细胞增殖活性降低相关的眼部疾病。(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2019年09期）
孟岩,刘宏伟,孙鹏[4]（2019）在《survivin对血小板源生长因子刺激的人视网膜色素上皮细胞增殖的影响及机制》一文中研究指出目的研究survivin对血小板源生长因子(PDGF)刺激的人视网膜色素上皮细胞增殖的影响。方法用PDGF处理人视网膜色素上皮细胞hRPE,以qRT-PCR和Western印迹方法检测细胞内survivin的表达水平。在hRPE细胞中转染survivin siRNA和siRNA control,给予PDGF处理,qRT-PCR和Western印迹方法检测细胞内survivin的表达水平。以噻唑蓝(MTT)方法测定hRPE细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western印迹检测细胞中剪切型含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水平解酶(Cleaved Caspase-3)蛋白水平,JC-1法检测线粒体膜电位,Western印迹方法检测胞质中细胞色素(Cyt)C蛋白水平。结果 PDGF组survivin mRNA和蛋白水平均明显高于对照组(P<0.05)。survivin siRNA+PDGF组survivin mRNA和蛋白水平明显低于PDGF组(P<0.05)。PDGF组细胞增殖能力显着升高,凋亡显着减少,细胞中Cleaved Caspase-3蛋白水平显着下降,线粒体膜电位显着升高,胞质中CytC蛋白水平显着降低,与对照组差异有统计学意义(P<0.05)。survivin siRNA+PDGF组细胞增殖能力显着降低,细胞凋亡率显着增多,细胞中Cleaved Caspase-3蛋白表达水平显着升高,线粒体膜电位显着下降,胞质中CytC蛋白水平显着升高,与siRNA control+PDGF组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PDGF诱导人视网膜色素上皮细胞中survivin的表达,敲低其表达可以抑制PDGF诱导的人视网膜色素上皮细胞增殖,通过线粒体途径诱导细胞凋亡。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2019年08期）
陈莉,刘静,张磊,雷春灵[5]（2019）在《转化生长因子-β诱导视网膜色素上皮细胞增殖中NLRP3炎症小体的表达及意义》一文中研究指出目的探讨转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)刺激下Nod样受体蛋白3(nod-like receptor protein 3,NLRP3)炎症小体在视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium,RPE)增殖中的表达变化及意义。方法利用TGF-β刺激RPE细胞增殖模拟增生性玻璃体视网膜病变模型,随机分为空白对照组(Sham组)和TGF-β诱导RPE细胞增殖组(TGF-β组),TGF-β组再根据浓度(0.5μg·L~(-1)、2.5μg·L~(-1)、10.0μg·L~(-1)、12.5μg·L~(-1))分组。利用MTT微量酶比色法检测RPE细胞增殖情况;Western blot观察NLRP3蛋白的表达变化;利用标准ELISA试剂盒检测白细胞介素(interleukin,IL)-1β和IL-18表达情况。结果与Sham组比较,0.5μg·L~(-1) TGF-β组RPE细胞增殖不明显,差异无统计学意义(P>0.05),但NLRP3、IL-1β和IL-18表达明显提高(均为P<0.01);2.5μg·L~(-1)、10.0μg·L~(-1)和12.5μg·L~(-1)TGF-β组RPE细胞增殖明显,NLRP3、IL-1β和IL-18表达均提高(均为P<0.05);与0.5μg·L~(-1) TGF-β组相比,2.5μg·L~(-1)、10.0μg·L~(-1)和12.5μg·L~(-1)TGF-β组RPE细胞增殖显着增加,NLRP3、IL-1β和IL-18表达均下降,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论不同浓度TGF-β诱导RPE细胞增殖中NLRP3炎症小体表达变化不同,两者可能相互调控影响RPE细胞增殖,在增生性玻璃体视网膜疾病发生发展中具有重要的作用。(本文来源于《眼科新进展》期刊2019年03期）
赵芳芳[6]（2019）在《乳香挥发油及地塞米松对IL-1β介导的兔视网膜色素上皮细胞迁移、增殖及NF-κB信号通路的影响》一文中研究指出目的观察不同浓度IL-1β对兔视网膜色素上皮细胞增殖的影响,并研究不同浓度乳香挥发油及地塞米松对IL-1β介导的兔视网膜色素上皮细胞增殖、迁移的抑制作用及其对NF-κB信号通路的影响,从而探讨乳香挥发油及地塞米松的抗炎作用及其分子机制。方法1.采用MTT法检测不同剂量IL-1β作用于兔RPE细胞24h、48h、72h后对兔RPE细胞增殖的影响,并筛选最佳干预浓度、时间;同时采用MTT法检测不同浓度乳香挥发油(0.15mg/mL、0.3mg/mL、0.45mg/mL、0.6mg/mL、0.75mg/mL)及阳性对照药物地塞米松(50 mg/L、100 mg/L、200 mg/mL、400 mg/L、600 mg/L)对IL-1β介导的兔RPE细胞增殖的影响。采用流式细胞仪检测不同浓度乳香挥发油及地塞米松对IL-1β介导的细胞凋亡的影响。根据MTT检测结果及凋亡率检测结果筛选乳香挥发油低、中、高浓度组(0.15mg/mL、0.3mg/mL、0.6mg/mL)及阳性对照药物地塞米松低、中、高浓度组(50mg/L、100mg/L、400mg/L)。采用流式细胞仪检测低、中、高浓度乳香挥发油及地塞米松对IL-1β作用下细胞增殖周期的影响。划痕实验观察低、中、高浓度乳香挥发油及地塞米松对IL-1β介导的细胞迁移的影响。采用蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测低、中、高浓度乳香挥发油及地塞米松对IL-1β作用下兔RPE细胞中NF-κBp65、p-IκBα、COX-2蛋白表达量的影响。免疫细胞化学染色法观察乳香挥发油对IL-1β作用下兔RPE细胞NF-κBp65、p-IκBα、COX-2蛋白表达的影响。结果1.MTT法检测不同浓度IL-1β干预24h、48h、72h对兔RPE细胞增殖的影响同时相内不同处理组之间比较:与无血清DMEM组比较,各时相内各IL-1β组细胞存活率均显著增大,尤以浓度为10g/L时最为明显(P<0.01),当浓度小于10g/L时,IL-1β对兔RPE细胞的促增殖作用具有浓度依赖性,24h时相内,除外20g/L IL-1β、30g/L IL-1β组,其他各组与无血清DMEM组比较差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);48h时相,各浓度组IL-1β与无血清DMEM组差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);72h时相,各浓度组IL-1β与无血清DMEM组差异均具有统计学意义(P<0.01)。同一处理组内不同时相之间比较:各处理组细胞存活率均随时间延长有所增加,即IL-1β对兔RPE细胞的促增殖作用具有时间依赖性,综合以上,选取浓度为10g/L的IL-1β干预兔RPE细胞进行后续实验。2.MTT法检测不同浓度乳香挥发油及地塞米松干预24h对IL-1β作用下的兔RPE细胞存活率的影响10g/L IL-1β对照组与无血清DMEM组比较显着促进兔RPE细胞增殖,差异具有统计学意义(P<0.01),除外0.2%DMSO溶媒对照组(P>0.05),其他各处理组与IL-1β组比较均显著抑制兔RPE细胞增殖,差异均具有统计学意义(P<0.01),且随着浓度增大,乳香挥发油及地塞米松对细胞增殖抑制能力越显着,具有浓度依赖性。0.3mg/mL乳香挥发油组与100mg/L地塞米松组比较无明显差异(P<0.05)。3.Annexin-VFITC/PI复染FCM检测不同浓度乳香挥发油及地塞米松干预24h对IL-1β作用下的兔RPE细胞凋亡率的影响早期凋亡率比较:10g/L IL-1β对照组与无血清DMEM组比较其早期凋亡率明显下降,差异具有统计学意义(P<0.01),除外0.2%DMSO溶媒对照组及50mg/L地塞米松(P>0.05),其他各处理组与IL-1β组比较早期凋亡率均明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01),且随着浓度增大,乳香挥发油及地塞米松处理细胞后其早期凋亡率逐渐增大,具有浓度依赖性,0.3mg/mL乳香挥发油组与100mg/L地塞米松组比较早期凋亡率较高,差异具有统计学意义(P<0.01)。晚期凋亡率比较:10g/L IL-1β对照组与无血清DMEM组比较其晚期凋亡率明显下降,差异具有统计学意义(P<0.01),除外0.2%DMSO溶媒对照组(P>0.05),其他各处理组与IL-1β组比较晚期凋亡率明显增加,差异均具有统计学意义(P<0.01),且随着浓度增大,乳香挥发油及地塞米松处理细胞后其晚期凋亡率逐渐增大,具有浓度依赖性,0.3mg/mL乳香挥发油组与100mg/L地塞米松组比较晚期凋亡率较低,差异具有统计学意义(P<0.01)。4.PI染色检测不同浓度乳香挥发油及地塞米松干预24h对IL-1β作用下的兔RPE细胞增殖周期的影响10g/L IL-1β对照组与无血清DMEM组比较其G_1/G_0期细胞数比例明显减少,S期及G_2/M期细胞比例明显增多,差异具有统计学意义(P<0.01),说明IL-1β通过诱导G_1/G_0期细胞向S期及G_2/M期转化从而促进兔RPE细胞增殖,除外0.2%DMSO溶媒对照组(P>0.05),其他各处理组与IL-1β组比较G_1/G_0期细胞数比例均明显增加,差异均具有统计学意义(P<0.01),且随着浓度增大,乳香挥发油及地塞米松各浓度组处理细胞后其G_1/G_0期细胞数逐渐增多,具有浓度依赖性,而各处理组与IL-1β组比较S期及G_2/M期细胞数随浓度增加其比例逐渐减少,除外高浓度乳香挥发油组S期与IL-1β组比较无明显差异(P>0.05),其他各组S期及G_2/M期与IL-1β组比较差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01),中浓度乳香挥发油组与中浓度地塞米松组比较其G1/G0期细胞较少、S及G2/M期细胞较多,差异具有统计学意义(P<0.01),说明乳香挥发油及地塞米松将IL-1β作用后的兔RPE细胞阻滞于G_1/G_0期减缓细胞进入增殖周期,抑制细胞分裂增殖,从而促进细胞凋亡,且乳香挥发油作用优于地塞米松。5.划痕实验检测不同浓度乳香挥发油及地塞米松干预24h、48h对IL-1β作用下的兔RPE细胞迁移的影响10g/L IL-1β对照组与无血清DMEM组24h及48h比较其迁移愈合率明显增大,差异具有统计学意义(P<0.01),说明10g/L IL-1β能明显促进兔RPE细胞的损伤愈合,促进其迁移。除外0.2%DMSO溶媒对照组(P>0.05),其他各处理组与IL-1β组比较其迁移愈合率均明显减少,差异均具有统计学意义(P<0.01),且随着浓度增大,乳香挥发油各浓度组及地塞米松各浓度组处理细胞后迁移愈合率逐渐降低,具有浓度依赖性。24h中浓度乳香挥发油组与中浓度地塞米松组比较其迁移率较高,差异具有统计学意义(P<0.05),48h中浓度乳香挥发油组与地塞米松组比较其迁移率较低,差异具有统计学意义(P<0.01)。6.Western blot法检测各组细胞中NF-κBp65在胞浆蛋白及核蛋白中的表达量,并计算核转位率空白对照组NF-κBp65蛋白在胞浆及核中均有少量表达,溶媒对照组与其比较无明显差异(P>0.05)。10g/L IL-1β对照组与空白对照组比较,胞浆内蛋白表达量减少,细胞核内蛋白表达量明显增多,核转位率显着提高,差异具有统计学意义(P<0.01),表明10g/L IL-1β能明显促进NF-κBp65蛋白从胞浆向核内转移。而乳香挥发油及地塞米松高、中、低处理组与IL-1β组比较核转位率明显降低,差异均具有统计学意义(P<0.01),且随着浓度增大,乳香挥发油各浓度组及地塞米松各浓度组处理细胞后其核转位率逐渐减小,具有浓度依赖性。中浓度乳香挥发油组与中浓度地塞米松组比较其核转位率较高,差异具有统计学意义(P<0.01)。7.Western blot法检测各组细胞中p-IκBα在胞浆蛋白中的表达量及COX-2在总蛋白中的表达量无血清DMEM组p-IκBα蛋白在胞浆中以及COX-2在总蛋白中均有少量表达,溶媒对照组与其比较无明显差异(P>0.05)。10g/L IL-1β对照组与无血清DMEM组比较,p-IκBα、COX-2蛋白表达明显增加,差异均具有统计学意义(P<0.01),表明10g/L IL-1β能明显提高p-IκBα、COX-2蛋白表达量。除外乳香挥发油低浓度组中COX-2蛋白表达与IL-1β组比较无明显差异(P>0.05),其他各处理组及地塞米松高、中、低浓度组与IL-1β组比较则明显抑制p-IκBα、COX-2蛋白表达,差异均具有统计学意义(P<0.01),且随着浓度增大,乳香挥发油各浓度组及地塞米松各浓度组处理细胞后蛋白表达量逐渐下降,具有浓度依赖性。中浓度乳香挥发油组与中浓度地塞米松组比较p-IκBα、COX-2蛋白在胞浆及总蛋白中的表达量均较高,差异具有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。8.免疫细胞化学染色法检测兔RPE细胞NF-κBp65、p-IκBα、COX-2蛋白表达的影响NF-κBp65:空白对照组NF-κBp65在胞浆及核中均有少量表达,呈弱阳性,且胞浆中的表达量较多,10g/L IL-1β对照组与无血清DMEM组比较,NF-κBp65表达量明显增多,胞浆及核内均有表达,且有些细胞核内NF-κBp65表达量较胞浆内多,差异均具有统计学意义(P<0.01),溶媒对照组与IL-1β对照组比较无明显差异(P>0.05)。而乳香挥发油及地塞米松高、中、低处理组与IL-1β组比较NF-κBp65表达量明显减少,差异均具有统计学意义(P<0.01),且随着浓度增大,乳香挥发油各浓度组及地塞米松各浓度组处理细胞后其NF-κBp65表达量逐渐减小,具有浓度依赖性。中浓度乳香挥发油组与中浓度地塞米松组比较表达量较高具有统计学意义(P<0.01)。p-IκBα:空白对照组p-IκBα在胞浆及核中均有少量表达,且胞浆中的表达量较多,10g/L IL-1β对照组与空白对照组比较,胞浆内p-IκBα表达量明显增多,呈强阳性,差异均具有统计学意义(P<0.01),溶媒对照组与IL-1β对照组比较无明显差异(P>0.05)。而乳香挥发油及地塞米松高、中、低处理组与IL-1β组比较p-IκBα表达量明显减少,差异均具有统计学意义(P<0.01),且随着浓度增大,乳香挥发油各浓度组及地塞米松各浓度组处理细胞后其p-IκBα表达量逐渐减小,具有浓度依赖性。中浓度乳香挥发油组与中浓度地塞米松组比较表达量较高,差异具有统计学意义(P<0.01)。COX-2:空白对照组COX-2在细胞中有少量表达,呈弱阳性,10g/L IL-1β对照组与空白对照组比较,胞浆内表达量明显增多,呈强阳性,差异均具有统计学意义(P<0.01),溶媒对照组与IL-1β对照组比较无明显差异(P>0.05)。而乳香挥发油及地塞米松高、中、低处理组与IL-1β组比较COX-2表达明显减少,差异均具有统计学意义(P<0.01),且随着浓度增大,乳香挥发油各浓度组及地塞米松各浓度组处理细胞后其COX-2表达量逐渐减小,具有浓度依赖性。中浓度乳香挥发油组与中浓度地塞米松组比较表达量无统计学意义(P>0.05)。结论1.IL-1β可明显促进兔RPE细胞增殖,其中浓度为10g/L时促增殖作用最为明显,当其浓度小于10g/L时,对兔RPE细胞的促增殖作用具有剂量、时间依赖性。2.乳香挥发油及地塞米松干预24h可显着抑制IL-1β介导的兔RPE细胞增殖,且随着浓度增大,抑制作用越显着。3.乳香挥发油及地塞米松干预24h可显着提高IL-1β介导的兔RPE细胞的早期及晚期凋亡率,且随着浓度增大,凋亡率呈增高趋势。4.IL-1β通过诱导G_1/G_0期细胞向S期及G_2/M期转化从而促进兔RPE细胞增殖,乳香挥发油及地塞米松将IL-1β作用后的兔RPE细胞阻滞于G1/G0期减缓细胞进入增殖周期,抑制细胞分裂增殖,从而促进细胞凋亡,呈浓度依赖性,且乳香挥发油作用优于地塞米松。5.乳香挥发油及地塞米松均能明显抑制IL-1β介导的兔RPE细胞迁移,且随着浓度增大,其迁移愈合率呈降低趋势。6.乳香挥发油及地塞米松均可有效抑制IL-1β干预后所致的NF-κBp65核转移,及p-IκBα、COX-2蛋白表达量增加,且随着浓度增大,抑制作用越明显。(本文来源于《宁夏医科大学》期刊2019-03-01）
刘晓清,彭俊,张又玮,谭涵宇,李建超[7]（2019）在《活血散结方药物血浆对PDGF干预下兔视网膜色素上皮细胞增殖相关因子及ERK1/2信号转导通路的影响》一文中研究指出目的观察活血散结方对血小板源性生长因子(PDGF)干预下兔视网膜色素上皮(RPE)细胞增殖的影响,探讨其分子机制。方法以RPE细胞为研究对象,体外进行RPE细胞原代培养及传代,建立PDGF干预下兔RPE细胞增殖模型,并选取PDGF最佳干预浓度。制备活血散结方药物血浆,对兔RPE细胞增殖与毒性的影响进行测定,选取最佳的实验浓度。实验分为空白对照组(DMEM)、正常血浆组、PDGF(10μg/L)组、PDGF(10μg/L)+AG1296(10μmol/L)组、PDGF(10μg/L)+10%药物血浆组、PDGF(10μg/L)+20%药物血浆组。分别加入相应处理因素干预48 h,Transwell流式细胞仪检测细胞周期变化;Western blot检测兔RPE细胞cyclinD1蛋白、pERK1/2及ERK1/2蛋白表达。结果 10%、20%活血散结方药物血浆对RPE细胞周期、cyclin D1蛋白及p ERK1/2、ERK1/2蛋白有抑制作用,与AG1296抑制剂作用相当(P>0.05),与其他组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论活血散结方药物血浆可能通过影响ERK信号通路及对周期蛋白的调控,抑制PDGF干预下兔RPE细胞增殖。(本文来源于《中国中医药信息杂志》期刊2019年02期）
杨格强,祝艳妮[8]（2018）在《沉默AQP-1对PDGF诱导的视网膜色素上皮细胞增殖迁移的影响研究》一文中研究指出目的研究沉默水通道蛋白1(AQP-1)对血小板源生长因子(PDGF)诱导的视网膜色素上皮细胞增殖迁移的影响。方法用PDGF处理视网膜色素上皮细胞hRPE,Realtime PCR和Western blot方法检测AQP-1表达变化。在hRPE细胞中转染AQP-1 siRNA慢病毒载体,经PDGF处理以后,Realtime PCR和Western blot检测细胞中AQP-1表达水平。MTT法检测细胞增殖,细胞爬片实验检测细胞迁移,Western blot检测细胞中MMP-2、MMP-9蛋白水平。结果PDGF处理后的hRPE细胞中AQP-1 mRNA和蛋白水平均升高,转染AQP-1 siRNA慢病毒载体后的hRPE细胞中AQP-1 mRNA和蛋白水平均降低。PDGF处理后的hRPE细胞增殖能力升高,细胞迁移能力也升高,细胞中MMP-2、MMP-9蛋白水平升高。沉默AQP-1后的hRPE细胞经PDGF处理后,细胞增殖能力降低,细胞迁移能力也降低,细胞中MMP-2、MMP-9蛋白水平降低。结论沉默AQP-1能够抑制PDGF诱导的视网膜色素上皮细胞增殖和迁移。(本文来源于《临床和实验医学杂志》期刊2018年20期）
才娜[9]（2018）在《PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制剂在视网膜色素上皮细胞增殖机制中的作用研究》一文中研究指出目的:探讨PI3K/Akt/mTOR通路是否在人眼增殖性玻璃体视网膜病变(PVR)中表达及其意义,并通过体外实验对人D407RPE细胞系检测PI3K、Akt、mTOR、p70S6k、4EBP-1的表达,并应用mTOR特异的抑制剂雷帕霉素(Rapamycin,RAPA,Rapa)、PI3K抑制剂LY294002对其进行实验性治疗,对其剂量、时间及其作用机制进行探讨。方法:1.MTT方法检测细胞抑制率取对数生长期的RPE细胞以每孔5×10~4细胞接种于96孔细胞培养板中,37~0C,5%C0_2条件下培养。实验分6个实验组、一个对照组,雷帕霉素的浓度为:30ng/ml、90ng/ml、180ng/ml,LY294002的浓度为:15μmol/L、30μmol/L、45μmol/L分别加入6实验组中,分别培养6h,12h,24h后,用波长490nm测出每孔OD值(吸光度值)。调零孔设置(DMSO、培养基、MTT),对照孔(DMSO、细胞、培养液、MTT),每组设定6个复孔。计算抑制率=[(对照-空白)-(给药-空白)]/(对照-空白)×100%2.流式细胞仪检测细胞增生指数、细胞周期及凋亡空白对照组:含10%灭活新生牛血清的RPMI-1640。对照组:未加雷帕霉素细胞培养组,加雷帕霉素细胞培养组:雷帕霉素的浓度为:90ng/ml。加LY294002细胞培养组:LY294002的浓度为:30μmol/L,分别培养6h,12h,24h,用流式细胞仪FAC Star检测细胞增生指数及凋亡率,每组3例。计算出S+G2/M期细胞所占细胞总数(Go/G1+S+G2/M)的百分比,即细胞增生程度。统计分析,实验数据用均数±标准差(x±s)表达数据,实验均重复3次。利用SPSS 13.0,统计分析软件进行统计分析,应用配对t检验比较各组之间的差别。3.雷帕霉素、LY294002处理前后细胞形态学变化在倒置显微镜下观察RPE细胞未处理组及90ng/ml雷帕霉素、30μmol/L LY294002处理组24h的细胞生长状态及形态学改变。4.RT-PCR、Western Blotting方法检测PI3K、Akt、mTOR、P70S6K、4EBP1的mRNA及蛋白在组织与细胞中的表达组织部分分组:对照组(正常视网膜组):15例眼外伤立即摘除眼球眼,增生膜组:确诊的糖尿病视网膜病变合并PVR 30例(PVR1),眼外伤合并PVR 30例(PVR2),按PVR分级标准均为C级以上。细胞部分分组:对照组:未加治疗药物培养的RPE细胞,实验组1:加RAPA90ng/ml培养24h的RPE细胞,实验组2:加LY294002 30μmol/L培养24h的RPE细胞。结果:1.细胞增殖(MTT)试验结果不同浓度雷帕霉素、LY29400处理细胞的OD值与未处理细胞的OD值相比,均有显着性差异((P<0.05),结果显示细胞的OD值及细胞增殖的速度随着雷帕霉素浓度的增高而降低。表明雷帕霉素、LY294002对细胞的抑制率随着雷帕霉素、LY294002浓度的增加而升高。用雷帕霉素、LY294002同一浓度处理的细胞,24h时的抑制率均大于12h、6h的细胞抑制率。2.流式细胞仪检测雷帕霉素、LY294002对细胞周期及凋亡的影响与未处理组相比,雷帕霉素、LY294002随着作用时间的延长可明显抑制细胞停滞在G1期,细胞数目也随着作用时间的延长而增加。表明雷帕霉素、LY294002能阻断细胞周期发展,进一步抑制细胞生长。雷帕霉素、LY294002可明显抑制细胞的生长,表现为S期(合成期)的细胞数目明显减少(P<0.05),说明雷帕霉素、LY294002对细胞生长的抑制作用。与未处理组相比,雷帕霉素、LY294002诱导RPE细胞的凋亡结果显示:雷帕霉素、LY294002处理组凋亡细胞的比例比未处理组分别高出14.47%,13.29%,差异具有统计学意义(P<0.05)。3.雷帕霉素、LY294002处理前、后细胞形态学变化雷帕霉素、LY294002处理24h后,与对照组相比,细胞形态均发生明显变化,细胞变细长,体积变小,细胞生长变慢,有漂浮细胞出现。4.RT-PCR、Western Blot方法检测PI3K、Akt、mTOR、P70S6K、4EBP1的mRNA及蛋白的表达RT-PCR、Western Blot结果表明:与正常视网膜组织相比,在增生膜组织中PI3K、Akt、mTOR、P70S6K表达增加,4EBP1表达减少,差异具有统计学意义。培养的RPE细胞,雷帕霉素使mTOR、p70S6K表达降低,使4EBP1表达增加,(P<0.05),差异具有统计学意义,但对PI3K、Akt的表达无明显影响。LY294002使PI3K、Akt、mTOR、p70S6K的表达降低,4EBP1表达增加(P<0.05),差异具有统计学意义。结论:1.PI3K/Akt/mTOR信号通路在正常视网膜组织中表达,在增殖膜中表达增强。2.PI3K/Akt/mTOR信号通路在视网膜色素上皮细胞中表达。3.雷帕霉素特异性阻断mTOR信号通路,mTOR表达下降、p70S6K和4EBP1的磷酸化失去活性,细胞停滞在G1期。4.PI3K特异性的抑制剂LY294002能特异性的阻止P13K的磷酸化进程。(本文来源于《中国医科大学》期刊2018-10-01）
邱梅园,丁芝祥,廖妙云,黄岚珍[10]（2018）在《表没食子儿茶素没食子酸酯对视网膜色素上皮细胞增殖及相关因子表达的影响》一文中研究指出目的研究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞增殖及相关因子表达的影响。方法体外培养人RPE细胞,设阴性对照组,40 mg·L~(-1)、80 mg·L~(-1)、160mg·L~(-1) EGCG 3个浓度药物处理组。利用MTT检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期,实时荧光定量PCR检测细胞周期素依赖性激酶抑制因子P21和P27 mRNA的表达,Western blot检测色素上皮衍生因子受体(pigment epithelium derived factor receptor,PDGFR-α)、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)和IκB蛋白的表达情况。结果 MTT实验结果显示,40 mg·L~(-1)、80 mg·L~(-1)、160 mg·L~(-1) EGCG药物处理组随着作用时间的延长,对人RPE细胞的增殖抑制作用也逐渐增强;随着药物浓度的增加,EGCG的增殖抑制作用也增强(均为P<0.05)。160 mg·L~(-1)的EGCG在72 h的细胞增殖抑制率达到81.11%。随着EGCG浓度的增加,培养的人RPE细胞中G1期和G2期细胞比例减少,S期细胞比例增加,80 mg·L~(-1)、160 mg·L~(-1)EGCG药物处理组S期细胞比例与阴性对照组相比增加极显着(均为P<0.05)。EGCG对细胞周期的影响作用具有明显的剂量依赖性。与阴性对照组相比,80 mg·L~(-1)、160 mg·L~(-1)EGCG药物处理组细胞内的P21和P27 mRNA表达均有不同程度的升高(均为P<0.05);40 mg·L~(-1) EGCG药物处理组与阴性对照组相比,P27 mRNA表达也增高(P=0.015),而P21 mRNA表达增高不明显(P=0.824)。P21和P27 mRNA表达量与EGCG浓度呈明显量效依赖关系(均为P<0.05)。Western blot结果显示,40 mg·L~(-1)、80mg·L~(-1)、160 mg·L~(-1) EGCG作用人RPE细胞后,NF-κB蛋白表达随着浓度的增加而减少,各药物处理组与阴性对照组相比差异均有统计学意义(均为P<0.05)。80 mg·L~(-1)、160 mg·L~(-1) EGCG亦能够抑制人RPE细胞IκB蛋白和PDGFR-α蛋白表达,与相应阴性对照组相比差异均有统计学意义(均为P<0.05)。EGCG对人RPE细胞内PDGFR-α、NF-κB和IκB的蛋白表达抑制作用呈明显的浓度依赖性(均为P<0.05)。结论 EGCG可以有效地抑制人RPE细胞的增殖,其机制可能与EGCG将人RPE细胞阻滞于S期,上调P21及P27 mRNA表达,下调PDGFR-α、NF-κB和IκB蛋白表达有关。(本文来源于《眼科新进展》期刊2018年07期）
增殖膜视网膜色素上皮细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的研究miR-29b激活自噬抑制人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞增殖的作用。方法通过病毒颗粒包装转染RPE细胞24～72 h,在倒置荧光显微镜下观察荧光强度检测感染效率,利用实时定量PCR检测miR-29b mRNA表达。采用凝血酶刺激RPE细胞增殖模拟增生性玻璃体视网膜病变模型。使用0.5×10~3 U·L~(-1)凝血酶预刺激1 h,然后分别加入miR-29b和Lenti-vector空载体刺激24 h。分为空白对照组(Sham组)、凝血酶刺激组(RPE组)、凝血酶刺激组+miR-29b过表达组(RPE+Lenti-29b组)、凝血酶刺激组+空载体组(RPE+Lenti-vector组)。利用MTT微量酶比色法检测各组RPE细胞增殖情况,Western blot观察微管相关蛋白1轻链3(light chain 3,LC3)Ⅱ表达变化。结果在倒置荧光显微镜下观察发现,RPE+Lenti-29b组和RPE+Lenti-vector组90%以上的RPE细胞成功转染,且RPE+Lenti-29b组miR-29 mRNA水平高表达,与其余3组相比差异均有统计学意义(均为P<0.01)。与Sham组比较,其余3组RPE细胞增殖明显,差异均有统计学意义(均为P<0.05),LC3Ⅱ蛋白表达也明显升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05);与RPE+Lenti-29b组比较,RPE组和RPE+Lenti-vector组细胞增殖明显(均为P<0.05),但LC3Ⅱ蛋白表达明显低于RPE+Lenti-29b组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论上调miR-29b表达可激活RPE细胞中LC3Ⅱ蛋白表达,提高细胞自噬水平,抑制RPE细胞增殖,可能在增生性玻璃体视网膜病变发生及发展中扮演重要作用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
增殖膜视网膜色素上皮细胞论文参考文献
[1].李艳梅,方珍珍,杨霞,高国全,周倜.N-cadherin对视网膜色素上皮细胞增殖及迁移侵袭的影响[J].中山大学学报(医学版).2019
[2].刘静,雷春灵,白淑玮,张磊,陈莉.miR-29b激活自噬抑制人视网膜色素上皮细胞增殖的实验研究[J].眼科新进展.2019
[3].徐艳春,冯婕妤,胡毅倩,朱茂林,朱煌.900MHz手机辐射对人视网膜色素上皮细胞增殖活性及转化生长因子β2表达的影响[J].现代生物医学进展.2019
[4].孟岩,刘宏伟,孙鹏.survivin对血小板源生长因子刺激的人视网膜色素上皮细胞增殖的影响及机制[J].中国老年学杂志.2019
[5].陈莉,刘静,张磊,雷春灵.转化生长因子-β诱导视网膜色素上皮细胞增殖中NLRP3炎症小体的表达及意义[J].眼科新进展.2019
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[7].刘晓清,彭俊,张又玮,谭涵宇,李建超.活血散结方药物血浆对PDGF干预下兔视网膜色素上皮细胞增殖相关因子及ERK1/2信号转导通路的影响[J].中国中医药信息杂志.2019
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