沉默NUPR1降低人多发性骨髓瘤U266细胞自噬并促进其迁移和侵袭

论文摘要

目的探讨沉默核蛋白1（nuclear protein 1, NUPR1）对人多发性骨髓瘤细胞自噬、迁移和侵袭的影响及其机制。方法用含有NUPR1-shRNA慢病毒载体的病毒感染骨髓瘤U266细胞,通过流式细胞术检测转染效率,实验分为阴性对照组（转染无关序列shRNA慢病毒）和敲低组（转染NUPR1-shRNA慢病毒）。qRT-PCR检测NUPR1mRNA表达,Western blot检测NUPR1、自噬相关蛋白（LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、ATG5和P62）、迁移和侵袭相关蛋白（MMP9、CXCR4）以及通路蛋白（p-AKT/T-AKT和p-mTOR/T-mTOR）的表达;透射电子显微镜（TEM）观察自噬小体;Transwell检测细胞迁移和侵袭能力。结果与阴性对照组比较,敲低组NUPR1 mRNA和蛋白表达显著下调（P<0.05）,自噬相关蛋白ATG5、Beclin1和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的表达明显降低（P<0.05）,而MMP9、CXCR4、P62、p-AKT/T-AKT和p-mTOR/T-mTOR蛋白表达明显增高（P<0.05）;敲低组自噬小体明显减少,细胞迁移和侵袭能力增强,雷帕霉素可阻断该促进作用。结论沉默NUPR1可能通过降低自噬水平促进U266细胞迁移和侵袭,并可能与AKT/mTOR通路激活有关。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 李星欣,黎安茂,曾沉思,陈建斌

关键词: 核蛋白,多发性骨髓瘤,自噬,迁移,侵袭

来源: 第三军医大学学报 2019年23期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 肿瘤学

单位: 重庆医科大学附属第一医院血液内科

分类号: R733.3

DOI: 10.16016/j.1000-5404.201907123

页码: 2322-2327

总页数: 6

文件大小: 6988K

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