导读:本文包含了噬菌体七肽库论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:噬菌体展示随机肽库,PD-L1,病毒粒子,免疫荧光技术
噬菌体七肽库论文文献综述
何海汛,陈威,李丹,孙国鹏,李鹏[1]（2019）在《利用噬菌体展示随机肽库筛选与犬PD-1和PD-L1结合的多肽》一文中研究指出研究目的:癌症是致犬死亡的常见病之一。目前治疗犬肿瘤的方法有手术、化疗和放疗。除此之外现已开发出了一些针对免疫检查点的靶向抗体药物,并在体外和体内进行了测试,如程序性细胞死亡受体1(Programmed cell death protein 1,PD-1),它是一种重要免疫抑制分子。PD-L1(programmed death ligand 1,CD274)是PD-1的天然配体。PD-1/PD-L1结合激活通路后,在癌症、病毒感染、器官移植方面会抑制免疫系统发挥功能。阻断PD-1和PD-L1(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十五次学术交流会、中国病理生理学会动物病理学专业委员会第二十四次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第四次学术研讨会、中国兽医病理学家第四次研讨会论文集》期刊2019-07-27）
叶长烂,周霞,谢浩然,马金魁,张宏斌[2]（2019）在《噬菌体展示随机环八肽库的构建》一文中研究指出目的构建表达于噬菌体表面的随机环八肽库。方法通过自行设计,人工合成编码随机环八肽的寡核苷酸片段,通过延伸引物扩增获得编码随机环八肽的基因片段。将编码基因片段和M13KE噬菌体载体经过EagⅠ和KpnⅠ限制性内切酶双酶切后进行连接,重组产物电转入大肠杆菌ER2738感受态细胞获得噬菌体展示随机环八肽库,噬斑及测序检测库容和多样性。结果构建的环八肽库库容超过7.5×109,重组阳性率为92.5%,不同率为97.3%。结论成功构建了库容量与多样性都满足筛选要求的噬菌体展示随机环八肽库。(本文来源于《国际检验医学杂志》期刊2019年14期）
朱瑞,刘莉,金丽娟,高小芳,王方[3]（2019）在《利用噬菌体七肽库筛选获得阿尔茨海默病β-分泌酶特异性结合肽的研究》一文中研究指出目的利用Ph.D.-C7C噬菌体七肽库进行体外筛选(biopanning),从而获得阿尔茨海默病β-分泌酶表面特异性结合肽,并鉴定其与β-分泌酶(BACE1)的结合能力。方法以BACE1(Sigma company)为包被抗原,利用噬菌体展示技术,经过连续4轮生物淘洗,随机挑选噬菌体阳性单克隆进行DNA测序并合成七肽,利用ELISA法鉴定所选七肽与BACE1结合的特异性。结果筛选出的噬菌体LPLDSPL与BACE1有较高的亲和性及特异性。结论阳性噬菌体表面展示的多肽LPLDSPL可能对阿尔茨海默病β-分泌酶产生抑制作用,为阿尔茨海默病提供新的治疗药物。(本文来源于《宁夏医学杂志》期刊2019年01期）
逯晓青[4]（2018）在《利用噬菌体随机肽库筛选膀胱癌EJ细胞导向肽的实验研究》一文中研究指出目的:利用噬菌体随机七肽库体外筛选能与人膀胱癌EJ细胞特异性结合的小分子多肽,为膀胱癌的早期诊断和靶向治疗提供理论基础。方法:以膀胱癌细胞系EJ为靶细胞,人正常膀胱移行上皮细胞为吸附细胞,对噬菌体随机七肽库进行3轮体外减性筛选;随机挑取30个阳性噬菌体克隆,用ELISA法鉴定其与EJ细胞结合的特异性;对阳性噬菌体克隆进行测序分析;采用固相化学合成法制备EJ细胞导向肽及其对照肽;通过MTT试验和细胞损伤修复实验研究该膀胱肿瘤导向肽对EJ细胞生长的影响。结果:1、经过3轮“筛选-扩增-再筛选”,与EJ细胞特异结合的噬菌体得到高度富集,回收率也增加了近200倍。2、ELISA法鉴定结果显示,特异性结合系数≥2的阳性噬菌体克隆共有17个。3、测序结果显示,其中R2、R5、R9、R12、R16、R17、R21、R24八个噬菌体克隆的序列均为AVEAAKT,该肽段重复率最高且无同源性。4、制备了EJ细胞导向肽AVEAAKT及其对照肽,纯度达95%。5、MTT试验结果显示,该膀胱肿瘤导向肽及其对照肽的相对抑制率均低于30%,细胞损伤修复实验结果显示,单位时间内,各组细胞表现出相同的生长趋势,从而证实了该膀胱肿瘤导向肽对EJ细胞的生长几乎无影响。结论:本实验利用噬菌体展示技术体外筛选获得了能与人膀胱癌EJ细胞特异性结合的小分子多肽AVEAAKT,并证实了该多肽对EJ细胞的生长几乎无影响。经查该肽段与已知蛋白尚无同源性,因此它很有可能为膀胱癌的早期诊断和靶向治疗提供新的思路。(本文来源于《山西医科大学》期刊2018-06-15）
曹晓婉[5]（2017）在《基于噬菌体随机肽库研制新型酿酒酵母表面吸附剂》一文中研究指出重金属镉的污染问题是困扰科研工作者的严重问题。与传统重金属污染治理的方式相比,生物修复方式更为有效、方便、节约。然而,单纯地利用微生物修复的方式往往满足不了整治环境中重金属的要求。于是,我们利用生物展示肽库与细胞表面的展示技术结合建立新型的细胞表面吸附剂。噬菌体展示肽库用于金属离子特异性肽的筛选,它是无限金属结合肽的来源。对文库进行淘选,我们可以得到亲和力比较强的配体分子。酿酒酵母作为研究菌株,本身就是一种良好的重金属离子生物吸附材料,再利用酿酒酵母细胞凝集素表面展示工程技术将镉离子亲和的金属结合肽展示在其细胞表面,使它的吸附效率得到提高。研究中将镉离子螯合树脂作为靶分子,它与噬菌体十二肽库进行筛选实验,最终得到与该重金属离子具有亲和能力的短肽。在筛选进行到第叁轮时P/N值达到56,说明了筛得的噬菌体克隆已经有较强的特异性。对这些噬菌体克隆进行序列测定与分析,最终得到了四条可用的金属结合肽。然后将镉离子结合肽以pYD1质粒作为载体,运用醋酸锂热激转化法转入酿酒酵母菌中。吸附效率测定结果表明,加入相同质量镉时,工程菌的吸附量优于对照菌EBY100,其中插入序列3的酿酒酵母对镉金属吸附效率最高,比对照菌的吸附率提高35%。运用海藻酸钠对重组菌进行固定化。固定化条件研究实验结果表明,当氯化钙浓度2%,海藻酸钠浓度为3%,温度为25℃时,固定化菌的吸附性能最为优异。在固定化菌的吸附性性能测定实验中发现重组菌较对照菌株的吸附效率有很大提升可达55.7%。(本文来源于《河南大学》期刊2017-05-01）
左园园,宋艳华,姜平,王芳,胡波[6]（2016）在《家兔出血症病毒VP60基因特异性噬菌体展示肽库的构建及鉴定》一文中研究指出本研究旨在构建家兔出血症病毒VP60基因特异性噬菌体展示肽库,并选用已知表位序列的单克隆抗体对VP60基因特异性肽库进行鉴定,以确定所构建肽库的特异性和丰富性。利用DNA酶Ⅰ随机消化法构建VP60基因噬菌体随机肽库。采用生物淘选和噬菌体原位杂交技术,选用1B8、1D4、5H3和A3C 4株纯化的单克隆抗体对该肽库进行抗原表位的鉴定。结果显示,所构建多肽库的滴度约为2.6×1012 PFU/m L,能够满足鉴定VP60蛋白的抗原表位的要求,同时鉴定到4条与VP60蛋白高度同源的序列,分别为N(326)PISQV(331)、D(338)MSFV(342)、K(562)STLVFNL(569)和G(25)TTTDGMDPGVVAA(38),与已知单抗所对应的表位序列高度同源。本研究成功构建了家兔出血症病毒VP60基因特异性随机肽库,选用已知表位序列的单克隆抗体对构建的肽库进行鉴定,鉴定到的表位与目前已经报道的单抗针对的表位序列高度同源,表明所构建肽库的特异性和丰富性良好,为进一步筛选和丰富VP60抗原表位奠定基础,还可用于VP60与受体结合域的鉴定,对阐述RHDV的感染、致病和免疫保护机制具有重要意义。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2016年12期）
邬兰,杜同信,俞杨,焦杰,王自正[7]（2016）在《定量PCR技术快速分析噬菌体展示肽库的应用》一文中研究指出目的建立无需转染菌株的快速定量方法,用以分析噬菌体展示肽库筛选。方法选取Ph.D.-C7C噬菌体展示肽库,进行梯度稀释并提取基因组,在其载体序列上设计一对通用引物,运用SYBR Green的方法进行荧光定量PCR扩增,通过计算该方法的特异性、精密度和线性范围来确定该检测方法的可行性。结果通过溶解曲线得知该对引物可特异性筛选噬菌体展示七肽库。通过计算每个浓度的Ct值及其偏差可发现,该体系在2×10~4pfu/m L~2×10~(10)pfu/m L的浓度范围内线性关系良好,且在2×10~5pfu/m L~2×10~(10)pfu/m L的浓度范围内批间不精密度小于15%。结论建立的荧光定量PCR体系可以避免转染菌株所带来的繁琐人工劳动,并可以特异、准确、快速的对噬菌体展示肽库进行定量分析。(本文来源于《标记免疫分析与临床》期刊2016年10期）
吴凡,庄乃保,张印则,徐华,周华友[8]（2016）在《随机噬菌体肽库筛选血型D抗原模拟多肽方案的建立及初步验证》一文中研究指出目的探讨随机噬菌体十二肽库筛选血型D抗原模拟多肽的影响因素,以建立最佳筛选方案。方法对比洗脱时间分别为4、8、12、16和30 min的洗脱液滴度;3轮清洗缓冲液中Tween 20浓度分别为0.1%、0.2%、0.5%和分别为0.1%、0.5%、0.5%时每轮淘洗的投入/产出比,以及3轮封闭缓冲液均为0.5%BSA和分别为0.5%BSA、1%明胶、5%脱脂奶时每轮淘洗的投入/产出比,以分析筛选效果,得出最佳筛选方案。对采用最佳筛选方案筛选得到的阳性克隆测定其DNA序列和做抗体竞争抑制试验检测D抗原模拟表位。结果洗脱8 min时洗脱液滴度为(2.31±0.25)×10~6pfu/m L,洗脱4、12、16和30 min时的洗脱液滴度与之相比明显下降(P<0.01)。当洗脱时间为8 min且3轮封闭缓冲液均为0.5%BSA时,3轮淘洗清洗缓冲液Tween 20浓度分别为0.1%、0.5%、0.5%时投入/产出比分别为1.69×10~7、4.95×10~5、9.58×10~2,与清洗缓冲液Tween 20浓度分别为0.1%、0.2%、0.5%时投入/产出比分别为2.70×10~7、4.57×10~5、1.14×10~3相比,对筛选效果影响不大。当洗脱时间为8 min且3轮淘洗清洗缓冲液Tween 20浓度分别为0.1%、0.5%、0.5%时,3轮封闭缓冲液分别为0.5%BSA、1%明胶、5%脱脂奶时投入/产出比分别为1.93×10~7、6.44×10~3、6.23×10~1,明显优于3轮淘洗封闭缓冲液均为0.5%BSA时的投入/产出比(分别为1.94×10~7、1.66×10~5、8.23×10~2)。通过优化方案筛选得到1个抑制率约为50%的十二肽序列"VHWDFRQWWQPS"。结论洗脱时间、清洗缓冲液成分以及封闭缓冲液类型对筛选效率有一定影响。洗脱时间为8 min,3轮淘洗的清洗缓冲液Tween 20浓度分别为0.1%、0.5%、0.5%和3轮淘洗的封闭缓冲液分别为0.5%BSA、1%明胶、5%脱脂奶粉时,筛选效果较优,可获得较理想的血型D抗原模拟多肽。(本文来源于《中国输血杂志》期刊2016年08期）
史云龙,刘永明[9]（2016）在《噬菌体展示随机肽库技术的医学研究应用》一文中研究指出噬菌体展示随机肽库是将编码外源性多肽的DNA序列插入噬菌体外壳蛋白基因,产生由数十亿种随机肽段与噬菌体外壳蛋白以融合形式呈现在噬菌体表面的重组噬菌体库。近年来,噬菌体展示随机肽库已成为筛选蛋白和多肽的重要生物技术,并被广泛应用于医学研究。笔者就其在肿瘤和自身免疫性疾病研究以及疫苗研制中的应用现状进行综述。(本文来源于《华夏医学》期刊2016年03期）
李晓菊,高源,张旺倩,张存[10]（2015）在《噬菌体肽库筛选抗人B7-H4中和抗体的模拟抗原表位及其免疫原性鉴定》一文中研究指出目的:用噬菌体呈现随机12肽库筛选能与抗人B7-H4(h B7-H4)中和抗体特异性结合的模拟抗原表位肽,并用其免疫小鼠检测其免疫原性。方法:以抗h B7-H4中和抗体为靶分子,用体外生物淘洗法从噬菌体呈现随机12肽库中筛选与之结合的噬菌体克隆,用竞争性细胞ELISA鉴定阳性噬菌体克隆;化学合成候选多肽,并与钥孔血蓝蛋白或破伤风毒素偶联鉴定多肽的特异性;进一步用融合蛋白免疫小鼠检测其免疫原性和抗血清的补体依赖的细胞杀伤活性(CDC)。结果:经过3轮体外筛选后随机挑取50个阳性噬菌体克隆,其中20个克隆与抗h B7-H4抗体有较强的结合能力,DNA测序得到6组结构相似的肽序列;竞争性ELISA结果显示1号肽噬菌体能与细胞表面的h B7-H4竞争性地结合抗h B7-H4单抗;点杂交结果显示1号肽能特异性结合抗h B7-H4单抗;小鼠免疫实验结果显示1号肽融合蛋白能诱导高滴度的抗h B7-H4抗血清,并且抗血清具有补体依赖的细胞杀伤活性。结论:筛选得到能与抗h B7-H4中和抗体特异性结合的12肽模拟抗原表位序列并且具有免疫原性,为进一步开发h B7-H4相关的多肽疫苗提供了实验依据。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2015年04期）
噬菌体七肽库论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的构建表达于噬菌体表面的随机环八肽库。方法通过自行设计,人工合成编码随机环八肽的寡核苷酸片段,通过延伸引物扩增获得编码随机环八肽的基因片段。将编码基因片段和M13KE噬菌体载体经过EagⅠ和KpnⅠ限制性内切酶双酶切后进行连接,重组产物电转入大肠杆菌ER2738感受态细胞获得噬菌体展示随机环八肽库,噬斑及测序检测库容和多样性。结果构建的环八肽库库容超过7.5×109,重组阳性率为92.5%,不同率为97.3%。结论成功构建了库容量与多样性都满足筛选要求的噬菌体展示随机环八肽库。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
噬菌体七肽库论文参考文献
[1].何海汛,陈威,李丹,孙国鹏,李鹏.利用噬菌体展示随机肽库筛选与犬PD-1和PD-L1结合的多肽[C].中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十五次学术交流会、中国病理生理学会动物病理学专业委员会第二十四次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第四次学术研讨会、中国兽医病理学家第四次研讨会论文集.2019
[2].叶长烂,周霞,谢浩然,马金魁,张宏斌.噬菌体展示随机环八肽库的构建[J].国际检验医学杂志.2019
[3].朱瑞,刘莉,金丽娟,高小芳,王方.利用噬菌体七肽库筛选获得阿尔茨海默病β-分泌酶特异性结合肽的研究[J].宁夏医学杂志.2019
[4].逯晓青.利用噬菌体随机肽库筛选膀胱癌EJ细胞导向肽的实验研究[D].山西医科大学.2018
[5].曹晓婉.基于噬菌体随机肽库研制新型酿酒酵母表面吸附剂[D].河南大学.2017
[6].左园园,宋艳华,姜平,王芳,胡波.家兔出血症病毒VP60基因特异性噬菌体展示肽库的构建及鉴定[J].中国兽医科学.2016
[7].邬兰,杜同信,俞杨,焦杰,王自正.定量PCR技术快速分析噬菌体展示肽库的应用[J].标记免疫分析与临床.2016
[8].吴凡,庄乃保,张印则,徐华,周华友.随机噬菌体肽库筛选血型D抗原模拟多肽方案的建立及初步验证[J].中国输血杂志.2016
[9].史云龙,刘永明.噬菌体展示随机肽库技术的医学研究应用[J].华夏医学.2016
[10].李晓菊,高源,张旺倩,张存.噬菌体肽库筛选抗人B7-H4中和抗体的模拟抗原表位及其免疫原性鉴定[J].生物技术通讯.2015