猪环鸟苷酸-腺苷酸合成酶cGAS基因的原核表达及其表达产物的生物活性分析

论文摘要

为获得具有生物学活性的环鸟苷酸-腺苷酸合成酶（cyclic GMP-AMP synthase,cGAS）蛋白与第二信使分子2′3′-cGAMP,构建了猪源cGAMP合成酶pcGAS基因的原核表达载体pET-28a-SUMO-pcGAS,将其转化至大肠杆菌Rosetta（DE3）,并通过优化诱导条件实现了可溶性表达;利用镍柱亲和层析对表达的重组蛋白产物进行初步纯化,随后切除SUMO标签蛋白,再用亲和层析进一步纯化,获得了纯度较高的重组蛋白pcGAS;将获得的重组蛋白pcGAS通过体外酶促反应生物合成了2′3′-cGAMP,且合成产物能够诱导启动细胞Ⅰ型IFNs的产生。结果表明,pcGAS重组蛋白和2′3′-cGAMP均具有生物活性,这为后续抗病毒、抗肿瘤药物以及免疫增强剂的开发奠定了基础。

论文目录

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 龙朝琳,何小兵,陈国华,贾怀杰,王国蒨,房永祥,景志忠

关键词: 原核表达,纯化,活性分析

来源: 中国兽医科学 2019年10期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学

单位: 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室

基金: 国家自然科学基金项目(31302072),甘肃省自然科学基金项目(17JR5RA325),中央引导地方科技发展项目

分类号: Q78

DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0161

页码: 1324-1330

总页数: 7

文件大小: 2134K

下载量: 104

相关论文文献

• [1].离子交换层析法纯化原核表达的肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体蛋白[J]. 中国药业 2013(10)
• [2].南方菜豆花叶病毒外壳蛋白基因的克隆与原核表达[J]. 安徽农业科学 2013(13)
• [3].狂犬病病毒G蛋白的原核表达及反应原性分析[J]. 河南农业科学 2017(04)
• [4].耐热赖氨酸氨肽酶的原核表达及特性表征[J]. 食品与生物技术学报 2019(12)
• [5].代谢型谷氨酸受体4胞内段的原核表达及纯化[J]. 中国生物制品学杂志 2019(02)
• [6].小麦锰超氧化物歧化酶基因的克隆与原核表达[J]. 江苏农业科学 2018(23)
• [7].番鸭白细胞介素2基因的克隆及其原核表达[J]. 中国预防兽医学报 2012(02)
• [8].日本囊对虾原肌球蛋白的原核表达、抗体制备以及组织表达分析[J]. 水产学报 2012(06)
• [9].福寿螺纤维素酶基因的原核表达[J]. 安徽农业科学 2009(19)
• [10].水貂生长激素的原核表达及特异性抗血清制备[J]. 中国畜牧兽医 2018(04)
• [11].猫冠状病毒S蛋白原核表达及鉴定[J]. 上海畜牧兽医通讯 2020(02)
• [12].小鼠cofilin2蛋白的原核表达及纯化[J]. 生物技术 2019(01)
• [13].苏丹型埃博拉病毒糖蛋白原核表达及抗体间接ELISA检测方法的建立[J]. 中国病原生物学杂志 2018(01)
• [14].病毒性出血性败血症病毒单链抗体的原核表达及其功能鉴定[J]. 水产学报 2016(01)
• [15].UQCRB基因的原核表达和纯化[J]. 中国实验诊断学 2016(01)
• [16].人腺苷甲硫氨酸脱羧酶的原核表达及纯化[J]. 中国生物制品学杂志 2012(02)
• [17].Flt3的原核表达、纯化及多克隆抗体制备[J]. 医学研究生学报 2008(11)
• [18].水痘-带状疱疹病毒糖蛋白E基因的原核表达及鉴定[J]. 中国病毒病杂志 2018(05)
• [19].七鳃鳗组织蛋白酶D的原核表达及功能初探[J]. 辽宁大学学报(自然科学版) 2017(02)
• [20].寨卡病毒结构蛋白基因的原核表达及其多克隆抗体的制备[J]. 中国动物传染病学报 2020(05)
• [21].克隆、原核表达和鉴定牛重组SHH蛋白[J]. 畜牧与兽医 2019(05)
• [22].鼠CCL5蛋白的原核表达与纯化（英文）[J]. 昆明理工大学学报(自然科学版) 2019(04)
• [23].苹果N-乙酰基-5-羟色胺-O-甲基转移酶基因的克隆及原核表达[J]. 植物生理学报 2018(01)
• [24].鱼类病毒性出血性败血症病毒基质蛋白的原核表达及其亚细胞定位[J]. 中国水产科学 2019(01)
• [25].鸡IRF7原核表达及多克隆抗体制备[J]. 中国动物传染病学报 2018(04)
• [26].人乙酰肝素酶的原核表达及重组表达产物的免疫原性鉴定[J]. 中国卫生检验杂志 2015(24)
• [27].菜豆荚斑驳病毒外壳蛋白基因的克隆与原核表达[J]. 安徽农业科学 2013(05)
• [28].东亚飞蝗羧酸酯酶基因的克隆和原核表达[J]. 应用昆虫学报 2012(03)
• [29].小麦细胞周期蛋白基因CDC25的原核表达及蛋白纯化[J]. 天津农业科学 2018(03)
• [30].大豆Glyma08g11030基因结构及原核表达分析[J]. 华北农学报 2019(03)

标签：原核表达论文;  纯化论文;  活性分析论文;