基于转录组学的金黄色葡萄球菌噬菌体安全性评估

基于转录组学的金黄色葡萄球菌噬菌体安全性评估

论文摘要

多重耐药菌的出现迫使我们将噬菌体治疗视为可能的替代治疗方法之一。旨在采用转录测序技术探讨金黄色葡萄球菌噬菌体在小鼠乳腺灌注治疗中的安全及长期使用的条件。选用24只泌乳10 d的昆明雌鼠,随机分成3组,包括健康对照组(T01),噬菌体VBSM-A1实验组(T02)和噬菌体cocktail实验组(T03)。用非损伤方法经乳头管分别注入不同组分的金黄色葡萄球菌噬菌体悬浊液于小鼠的第4对(腹部)乳腺内。观察小鼠、组织病理学变化以及乳腺组织中TNF-α含量变化;同时,采用转录组测序技术对小鼠乳腺组织进行分析。结果显示,噬菌体灌注会导致小鼠乳腺呈现轻微炎症反应,但不足以影响小鼠正常生命体征;同时,24 h后噬菌体的数量会明显下降(起始为5×107 PFU/gland;24 h后则分别为103.6和104.4PFU/gland),提示在噬菌体给药的方式以及剂量还需要进一步的探索,同时提出了噬菌体和抗生素联合应用以降低噬菌体免疫应答和抗生素耐药性的前景,旨为后续噬菌体的使用从转录组层面提供理论依据和奠定实验基础。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 实验动物
  •     1.1.2 主要试剂
  •     1.1.3 主要器材
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 噬菌体的分离与培养
  •     1.2.2 实验分组及噬菌体灌注
  •     1.2.3 样品采集与处理
  •     1.2.4 乳腺组织病理组织切片的制备
  •     1.2.5 ELISA方法检测乳腺组织促炎因子水平
  •     1.2.6 转录组测序
  •     1.2.7 数据统计分析
  • 2 结果
  •   2.1 小鼠外部形态观察及乳腺组织病理学观察
  •   2.2 小鼠乳腺组织中炎症因子TNF-α的测定
  •   2.3 小鼠乳腺组织中噬菌体数量的测定
  •   2.4 转录组结果
  •     2.4.1 转录组测序产量
  •     2.4.2 比对效率统计
  •     2.4.3 基因差异表达分析
  •     2.4.4 差异表达基因GO分类
  •     2.4.5 差异表达基因KEGG富集分析
  • 3 讨论
  • 4 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 耿慧君,邹伟,崔惠敬,李晓宇,王丽丽,徐永平

    关键词: 转录组测序,噬菌体疗法,噬菌体安全性,小鼠

    来源: 生物技术通报 2019年12期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,农业科技,医药卫生科技

    专业: 基础医学

    单位: 大连理工大学生物工程学院,辽宁师范大学生命科学学院,教育部动物性食品安全保障技术工程研究中心

    基金: 大连市重点科技研发计划项目(2019YF23SN048),国家重点研发计划(2018YFD050060)

    分类号: R378.11

    DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2019-0696

    页码: 64-75

    总页数: 12

    文件大小: 5320K

    下载量: 159

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