麻痹性贝类毒素体外生物毒性检测方法的建立

麻痹性贝类毒素体外生物毒性检测方法的建立

论文摘要

目的:建立麻痹性贝类毒素体外生物毒性检测方法。方法:小鼠神经干细胞(NSC)培养于96孔培养板中,至对数生长期,每孔加入170μL培养液和10μL石房蛤毒素(STX)标准品(分别为0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4 ng),再加入10 mmol/L的乌本苷10μL及1 mmol/L的藜芦碱10μL。同时设置乌本苷及藜芦碱对照孔,以及空白对照孔。CCK-8溶液孵育后用酶标仪测定各孔D(450)值,根据石房蛤毒素标准液含量与D(450)值之间的剂量反应关系,建立标准曲线。结果:培养的正常NSC第1天为单细胞悬液,第2~3天聚集成为小神经球,第4天为大神经球;加入乌本苷及藜芦碱后较多细胞出现肿胀破裂,加入STX后可见肿胀或破裂死亡的细胞,但细胞形态多为正常。并于0.2~1.0 ng范围内建立了麻痹性贝类毒素体外生物毒性检测方法并建立了标准曲线,其回归方程为y=1.252+0.495x(r=0.998 0,P<0.01)。结论:成功建立了麻痹性贝类毒素体外生物毒性检测方法,该研究为神经性贝类毒素的体外检测相关研究奠定了基础。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 实验材料
  •     1.1.1 毒素和细胞
  •     1.1.2 主要试剂和仪器
  •   1.2 实验方法
  •     1.2.1 NSC细胞培养
  •     1.2.2 细胞毒性检测
  •   1.3 统计学方法
  • 2 结果
  •   2.1 显微镜观察NSC生长情况
  •   2.2 加入STX后各组NSC生长情况
  •   2.3 STX各剂量组D (450) 值测定
  •   2.4 标准曲线的建立
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 于志强,孙运,陈小青,刘汉伟,马中春

    关键词: 麻痹性贝类毒素,小鼠神经干细胞,体外检测方法,乌本苷,藜芦碱

    来源: 癌变·畸变·突变 2019年04期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,工程科技Ⅰ辑

    专业: 轻工业手工业,预防医学与卫生学

    单位: 宁波中盛产品检测有限公司/宁波海关技术中心

    基金: 浙江省实验动物科技计划项目(2018C37100),宁波中盛产品检测有限公司技术开发项目(2019ZS05)

    分类号: R155.5

    页码: 323-326

    总页数: 4

    文件大小: 1247K

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