热激蛋白启动子论文_郭虹霞,王创云,赵丽,王陆军,张丽光

导读:本文包含了热激蛋白启动子论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:蛋白,玉米,挪威,水稻,诱导,序列,细菌。

热激蛋白启动子论文文献综述

郭虹霞,王创云,赵丽,王陆军,张丽光[1](2019)在《水稻中2个小分子热激蛋白基因启动子的序列分析及功能鉴定》一文中研究指出小分子热激蛋白(small heat shock proteins, sHSP),作为一种分子伴侣,在植物逆境胁迫响应中发挥着重要的作用。本研究克隆了水稻中2个编码小分子热激蛋白的基因 Os16.9A和 Os16.9B, Os16.9A和 Os16.9B编码的150个氨基酸,相似性高达99%。 Os16.9A和 Os16.9B的转录方向相反,2个基因的起始密码之间的距离为2.6 kb,它们的启动子均含有CAAT-box、TATA-box、GATA-box以及与热激等胁迫应答有关的顺式作用元件HSE和ACGT aterd1; Os16.9A的启动子还包含响应冷、干旱应答的顺式作用元件LTRE,这些顺式作用元件呈不对称分布,推测这2个基因间的序列具有双向启动子的功能,且这2个基因可能受胁迫诱导表达。该研究将为进一步研究水稻 Os16.9A和 Os16.9B基因的表达调控及其功能提供参考。(本文来源于《西北农业学报》期刊2019年07期)

关兵兵[2](2014)在《玉米黑粉菌热激蛋白启动子介导的白僵菌转化效率评价》一文中研究指出球孢白僵菌(Beauveria bassiana)是一种致病性与适应性很强,且寄主范围广的昆虫病原真菌,已被作为昆虫真菌制剂广泛用于玉米螟(Ostrinia furnacalis)的生物防治。在球孢白僵菌功能基因研究及基因工程育种过程中,启动子是外源或内源基因导入效率的重要因素之一。本试验研究为加强导入球孢白僵菌的外源基因的转录和翻译水平,拟将球孢白僵菌启动子更换为具有高效启动功能的玉米黑粉菌(Ustilago Maydis)热激蛋白启动子(hot shocking protein)hsp70,为球孢白僵菌的功能性基因研究及基因工程育种奠定基础。利用含有玉米黑粉菌热激蛋白启动子hsp70的PHD3-hsp70载体,和含有来源于构巢曲霉(Aspergillus nidulans)的PgpdA启动子的PF载体(pgpda:Bar:GFP),利用共同双酶切及连接,构建hsp70-F载体(hsp70:Bar:GFP);通过原生质体的条件优化与获得,并且利用PEG介导进行球孢白僵菌原生质体遗传转化,通过含PPT除草剂的查式培养基中进行筛选,得到阳性转化子;对阳性转化子进行PCR验证及倒置荧光显微镜观察验证;利用平板计数与PCR验证比较了启动子hsp70和PgpdA的转化效率,并对转化子进行叁代继代培养,用以观察转化子生物学特性及遗传稳定性;最后选用亚洲玉米螟叁龄幼虫为毒力测试对象,对得到的工程菌株进行杀虫毒力测试。本研究首次应用来源于玉米黑粉菌热激蛋白启动子hsp70介导球孢白僵菌遗传转化。结果显示,经过分子生物学分析、荧光显微镜分析,以hsp70为启动子的载体能够成功导入受体菌种,其转化效率较常用的PgpdA启动子高出近60%。通过对转化子和受体菌株D1-5生物学特性比较分析,表明该转化过程并没有影响转化子的生物学特性;同时,玉米螟幼虫的毒力测试结果表明,该转化过程也并没有影响其杀虫毒力。通过本研究,成功建立了hsp70启动子介导的球孢白僵菌遗传转化体系,为球孢白僵菌基因工程育种及功能基因研究提供了较好的试验材料。(本文来源于《哈尔滨师范大学》期刊2014-06-01)

李岩琦,李静,李海霞,王雪芳,朱燕[3](2014)在《热激蛋白70B'启动子调控的热诱导型载体pHSP-shTERT的构建及其对乳腺癌MCF-7细胞的抑制效应》一文中研究指出目的:构建靶向端粒酶逆转录酶(telomerose reverse transcriptas,TERT)的热激蛋白(heat shock protein,HSP)70B'启动子调控的热诱导型RNAi表达载体,观察热诱导条件下其在人乳腺癌MCF-7细胞内的RNAi效应及其对MCF-7细胞增殖和凋亡的影响。方法:PCR扩增HSP70B'启动子序列,用其构建热诱导型靶向TERT的重组载体并转染MCF-7细胞,倒置荧光显微镜和流式细胞术检测GFP的表达,优化转染和热诱导条件;以未经热诱导的转染细胞为对照组,RT-PCR和Western blotting检测重组载体转染与热诱导对MCF-7细胞内GFP与TERT的mRNA和蛋白表达的影响;MTT实验和流式细胞术分别检测对MCF-7细胞增殖与凋亡的影响。结果:成功构建热诱导型重组载体pHSP-GFP、pHSP-shGFP和pHSP-shTERT;在最适热诱导条件(42℃、40 min)下,共转染质粒pHSP-shGFP和pCMV-GFP的MCF-7细胞中GFP表达量显着低于对照组(t=-48.35,P=0.000 43)。pHSP-shTERT转染组MCF-7细胞内TERT mRNA[(12.24±1.96)%vs(80.18±2.28)%;t=-286.5,P=0.000 012]和蛋白[(1.64±0.42)%vs(63.45±3.12)%;t=-31.37,P=0.001]的表达均显着下调,细胞存活率显着下降[(58.93±2.95)%vs(91.22±4.16)%;t=15.747,P=0.004],细胞凋亡率显着提高[(40.97±4.80)%vs(8.33±1.14)%;t=-11.672,P=0.007]。结论:靶向TERT的pHSP-shTERT载体可以在热诱导条件下实现MCF-7细胞内靶基因的沉默,从而抑制MCF-7细胞的生长、诱导该细胞的凋亡。(本文来源于《中国肿瘤生物治疗杂志》期刊2014年02期)

赵玉飞[4](2012)在《蜡梅热激蛋白CpHSP1基因启动子的克隆与功能初探》一文中研究指出热激蛋白(heat shock proteins, HSPs)是生物有机体(或离体细胞)在受到胁迫因子,如:高温、低温、干旱、ABA、重金属等应激原的刺激后诱导合成或含量增加的一类应激蛋白质。根据分子量的大小可分为:HSP1OOs、HSP90s、HSP70s、 HSP60s、smHSPs (small HSPs)五大类。每类热激蛋白都在植物体内普遍存在,其中smHSPs是最为常见的一类,它能被高温、低温、高盐、干旱、激素以及机械损伤等多种胁迫因子诱导,同时也能受到种子的萌发过程、花药发育过程及果实的成熟过程等调控。smHSPs主要是充当着分子伴侣的功能,它不依赖ATP就能阻止变性蛋白的积累、保护蛋白的折迭,在植物抵抗并适应胁迫环境与生长发育的方面起着重要作用。蜡梅素有耐寒、耐旱和耐剪的“叁耐”与冻不坏、旱不死和不缺枝“叁不”的美誉。HSPs作为重要的逆境响应蛋白,在蜡梅高效逆境防御机制中扮演怎样的角色、发挥什么作用是一个值得探讨的问题。我们的研究团队克隆了蜡梅热激蛋白基因CpHSP1,发现其表达具有较强的胁迫响应特征和组织特异性。为了进一步探索CpHSP1基因参与蜡梅逆境响应和发育过程的机理,本论文运用hiTAIL-PCR技术从蜡梅基因组DNA中获得CpHSP1基因的启动子,并对该启动子的功能进行初步分析。主要取得了以下实验结果:1.蜡梅CpHSP1基因启动子克隆在已获得蜡梅热激蛋白CpHSPl基因序列的基础上,利用hiTAIL-PCR技术对蜡梅CpHSPl基因上游未知启动子序列进行了扩增,最终获得954bp的启动子片段。2.蜡梅CpHSP1基因启动子元件分析运用PlantCar在线分析软件对该启动子序列进行分析,该启动子具有TATA-box和CAAT-box等基本转录元件,以及与脱落酸(ABA)应答有关的ABRE元件、与光和厌氧生活及ABA的应答相关的G-BOX元件、热应答元件HSE、与干旱相关MBS元件、激活特定分生组织的顺式作用元件OCT、与花特异表达有关的元件G-BOX以及胚乳表达必须的顺式调控元件Skn-1_motif.此外,该启动子还具有光效应元件CATT-motif、昼夜节律顺式调控有关的顺式调控元件circadian等元件。3.植物表达载体构建利用酶切、连接等技术手段将CpHSPl基因启动子替换表达载体pCAMBIA-1300-221中的CaMV35S组成型启动子序列,与GUS报告基因连接,通过PCR和双酶切验证说明植物表达载体pCAMBIA-1300-221-CpHSP1pro已成功构建。4、CpHSP1基因启动子的活性分析利用根癌农杆菌介导的叶盘法将植物表达载体pCAMBIA-1300-221-CpHSP1pro转入野生型烟草,通过对转基因烟草的根、茎、叶、花等不同组织进行GUS化学染色,结果说明该启动子具有启动活性,可驱动下游报告基因表达,对蜡梅热激蛋白基因的表达调控具有较强的组织特异性。(本文来源于《西南大学》期刊2012-05-01)

沈进娟,王贵学,蔡平钟,李俊卿,王闵霞[5](2009)在《玉米Ubi-1启动子驱动挪威鼠热激蛋白4基因(Hspa4)植物表达载体的构建》一文中研究指出挪威鼠热激70kD蛋白4(Rattus norvegicus heat shock protein4,Hspa4)是哺乳动物细胞内重要的一种分子伴侣,通过参与热激响应、未折迭蛋白应答等来保护机体免受损伤,在适应外界应答时是一种关键性的蛋白质(Kang et al.,2002;Zhao et al.,2007),有阻止蛋白质变性的功能。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2009年04期)

李妹芳,冯海霞,郭尚敬[6](2008)在《植物热激蛋白启动子的特点及应用》一文中研究指出综述了植物热激蛋白启动子的特点,在植物生长中的作用及在基因工程中的应用。(本文来源于《安徽农业科学》期刊2008年29期)

陆秋鹤,向华[7](2006)在《极端嗜盐古菌Halobacterium NRC-1热激蛋白Hsp5启动子分析》一文中研究指出古菌的转录调控方式既不同于细菌也不同于真核生物,而是两者的嵌合体。热激蛋白的调控一直是研究细菌和真核生物转录调控的很好的模型。从目前的研究情况看,古菌没有类似细菌或真核生物的一些通用热激调控模式,例如细菌利用不同的σ因子来调控热激基因的转录;而真核则通过热激因子(heat shock(本文来源于《第二届中国青年学者微生物遗传学学术研讨会论文集》期刊2006-10-01)

热激蛋白启动子论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

球孢白僵菌(Beauveria bassiana)是一种致病性与适应性很强,且寄主范围广的昆虫病原真菌,已被作为昆虫真菌制剂广泛用于玉米螟(Ostrinia furnacalis)的生物防治。在球孢白僵菌功能基因研究及基因工程育种过程中,启动子是外源或内源基因导入效率的重要因素之一。本试验研究为加强导入球孢白僵菌的外源基因的转录和翻译水平,拟将球孢白僵菌启动子更换为具有高效启动功能的玉米黑粉菌(Ustilago Maydis)热激蛋白启动子(hot shocking protein)hsp70,为球孢白僵菌的功能性基因研究及基因工程育种奠定基础。利用含有玉米黑粉菌热激蛋白启动子hsp70的PHD3-hsp70载体,和含有来源于构巢曲霉(Aspergillus nidulans)的PgpdA启动子的PF载体(pgpda:Bar:GFP),利用共同双酶切及连接,构建hsp70-F载体(hsp70:Bar:GFP);通过原生质体的条件优化与获得,并且利用PEG介导进行球孢白僵菌原生质体遗传转化,通过含PPT除草剂的查式培养基中进行筛选,得到阳性转化子;对阳性转化子进行PCR验证及倒置荧光显微镜观察验证;利用平板计数与PCR验证比较了启动子hsp70和PgpdA的转化效率,并对转化子进行叁代继代培养,用以观察转化子生物学特性及遗传稳定性;最后选用亚洲玉米螟叁龄幼虫为毒力测试对象,对得到的工程菌株进行杀虫毒力测试。本研究首次应用来源于玉米黑粉菌热激蛋白启动子hsp70介导球孢白僵菌遗传转化。结果显示,经过分子生物学分析、荧光显微镜分析,以hsp70为启动子的载体能够成功导入受体菌种,其转化效率较常用的PgpdA启动子高出近60%。通过对转化子和受体菌株D1-5生物学特性比较分析,表明该转化过程并没有影响转化子的生物学特性;同时,玉米螟幼虫的毒力测试结果表明,该转化过程也并没有影响其杀虫毒力。通过本研究,成功建立了hsp70启动子介导的球孢白僵菌遗传转化体系,为球孢白僵菌基因工程育种及功能基因研究提供了较好的试验材料。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

热激蛋白启动子论文参考文献

[1].郭虹霞,王创云,赵丽,王陆军,张丽光.水稻中2个小分子热激蛋白基因启动子的序列分析及功能鉴定[J].西北农业学报.2019

[2].关兵兵.玉米黑粉菌热激蛋白启动子介导的白僵菌转化效率评价[D].哈尔滨师范大学.2014

[3].李岩琦,李静,李海霞,王雪芳,朱燕.热激蛋白70B'启动子调控的热诱导型载体pHSP-shTERT的构建及其对乳腺癌MCF-7细胞的抑制效应[J].中国肿瘤生物治疗杂志.2014

[4].赵玉飞.蜡梅热激蛋白CpHSP1基因启动子的克隆与功能初探[D].西南大学.2012

[5].沈进娟,王贵学,蔡平钟,李俊卿,王闵霞.玉米Ubi-1启动子驱动挪威鼠热激蛋白4基因(Hspa4)植物表达载体的构建[J].农业生物技术学报.2009

[6].李妹芳,冯海霞,郭尚敬.植物热激蛋白启动子的特点及应用[J].安徽农业科学.2008

[7].陆秋鹤,向华.极端嗜盐古菌HalobacteriumNRC-1热激蛋白Hsp5启动子分析[C].第二届中国青年学者微生物遗传学学术研讨会论文集.2006

论文知识图

一扩增序列与Hsp18.2启动子序列(登记号...诱导hsp22基因启动子和转录区组蛋...热激反应网络示意正常条件下拟南芥热激转录因子AtHsfA...启动子PCR扩增结果热激方式对酶活的影响

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