一、SARS冠状病毒的分离培养与鉴定（论文文献综述）
王建醒,刘倜,姚明晓,陶泽新,房明,李岩,张玉薇,吴巨龙,何玉洁,姜蕾,李忠,姜晓林,康佃民,寇增强[1]（2021）在《山东省新型冠状病毒分离与全基因组进化分析》文中研究表明目的建立新型冠状病毒（2019 novel coronavirus, 2019-nCoV）的细胞培养和全基因组测序方法, 了解2019-nCoV基因变异情况。方法选取部分2019-nCoV感染的肺炎确诊病例的鼻、咽拭子标本接种Vero-E6细胞培养管进行分离培养, 逐日观察病变, 对病变的细胞开展荧光定量RT-PCR检测确认病毒分离结果;选取部分分离到的新型冠状病毒进行10倍稀释后接种细胞测定病毒滴度。采用2019-nCoV全基因组捕获技术及二代测序方法对部分分离到的毒株进行全基因组测序, 对获得的序列进行序列比对和进化分析, 分析其变异位点。结果在生物安全三级实验室建立2019-nCoV在Vero-E6细胞系中的病毒分离方法, 共对150份2019-nCoV阳性病例鼻、咽拭子标本开展病毒分离, 共分离到22株2019-nCoV毒株。对其中的18株2019-nCoV开展全基因组测序, 获得的基因组序列全长约为29 600 bp, 基因同源性在99.9%以上, 共有43个核苷酸和24个氨基酸位点发生了变异。基因进化分析显示, 分离到的病毒分为L型和S型分支, 在L型分支中, 又包含了欧洲家系I型和II.1型分支。结论通过Vero-E6细胞成功分离培养了2019-nCoV, 并分析了其基因变异规律, 为病例的溯源、药物筛选、生物学特性研究等工作提供了基础。同时, 持续开展2019-nCoV分离和全基因组测序分析对后续的新冠肺炎防控及变异毒株的监测也至关重要。
国家呼吸医学中心[2]（2021）在《儿童常见呼吸道病原免疫预防专家共识》文中认为随着社会的发展及经济条件的改善, 我国儿童常见呼吸道病原免疫预防水平取得了长足的进步, 儿童呼吸道感染发病率及死亡率在过去十几年中大幅下降, 但与国际领先水平国家相比, 尚存在一定差距, 这与公众对疫苗接种认知不足、接种人员预防接种服务水平参差不齐等诸多因素有关。本共识在综合分析国内外儿童常见呼吸道病原免疫预防临床证据的基础上, 结合我国临床现状及专家临床经验, 就儿童常见呼吸道病原传播特点、临床表现、免疫预防等提出了建议, 为进一步指导儿童常见呼吸道病原免疫预防工作提供参考。
雷荣,费鑫宇,李明福,吴品珊,王新一[3]（2021）在《基于CRISPR/Cas的检测技术发展及其在植物病原物检测中的应用》文中进行了进一步梳理CRISPR/Cas系统是一种高效、实用的基因编辑工具。该系统与多种核酸扩增技术结合,已被开发出形式多样、灵敏度高、特异性好的病原物核酸检测方法。本文简要介绍了CRISPR/Cas的分类和作用原理,重点综述了CRISPR/Cas系统在各种病原微生物检测中的应用,讨论了CRISPR/Cas在植物病原物的现场快速检测方面的最近进展,并对CRISPR/Cas应用于植物病原物的检测前景进行了展望。
魏剑浩,朱召芹[4]（2021）在《新型冠状病毒肺炎实验室检测技术进展》文中研究表明新型冠状病毒肺炎是当今世界最受关注的公共卫生问题,实验室检测是其疫情防控的关键环节之一。本文主要介绍现常用的新型冠状病毒实验室检测方法,尤其是核酸、抗原/抗体等检测方法,同时就已见报告的部分新型冠状病毒实验室检测新技术作一简要介绍。
朱镭,朱庆义[5]（2021）在《新型冠状病毒及其分子生物学诊断新技术》文中提出冠状病毒（Corona virus）为正向单链RNA病毒,目前已知引起人类疾病的冠状病毒有7种。新型冠状病毒（SARS-CoV-2）为β属冠状病毒,主要引起新型冠状病毒肺炎（COVID-19）。目前,COVID-19在世界范围内快速传播和蔓延,已成为一种常态化防控的新发传染病。本文对SARS-CoV-2的基因分型和实验室诊断新技术,包括实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）、环介导等温扩增（LAMP）,POCT免疫层析快速诊断试验,核酸质谱分析（MALDI-TOF）和基因测序等作了简要概述。
张传美,张路宾,刘佳卉,赵辉,马清霞,杨海燕,单虎[6]（2021）在《水貂冠状病毒研究进展》文中指出水貂冠状病毒（Mink coronavirus,MCoV）属于冠状病毒科α冠状病毒属的成员,通常会引起以卡他性腹泻为主要症状的水貂流行性卡他性胃肠炎（Mink epizootic catarrhal gastroenteritis,ECG）。该病已在各国许多貂场暴发,给养貂业造成巨大经济损失。本文总结了自1975年报道ECG以来,水貂冠状病毒的研究进展,包括MCoV的基因组结构、遗传进化分析、受体特点及ECG的诊断及防治,以期引起人们对水貂冠状病毒的重视,为水貂冠状病毒病的防控提供参考。
邓涛,年悬悬,张家友,黄仕和,杨晓明[7]（2021）在《新型冠状病毒灭活疫苗研发及应用》文中认为新型冠状病毒肺炎（Coronavirus Disease 2019,COVID-19）是由重症急性呼吸综合征冠状病毒2（severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2）感染引起的呼吸道传染病。COVID-19在全球范围的大流行造成了严重的公共卫生危机,已成为导致死亡的主要原因之一。为减轻COVID-19对公共健康和社会经济的影响,全球疫苗研发机构均在积极开发疫苗,目前上市的COVID-19疫苗包括灭活疫苗、病毒载体疫苗、mRNA疫苗和重组蛋白疫苗等多种类型。传统经典的灭活疫苗由于其生产工艺成熟、安全性良好、免疫原性稳定、可及性强,受到众多疫苗企业的青睐。目前已有多款COVID-19灭活疫苗获得紧急使用或批准附条件上市。本文就COVID-19灭活疫苗研发的毒种与细胞基质选择、生产工艺、临床前研究、对突变株的保护作用作一综述,并着重探讨COVID-19灭活疫苗的临床研究进展及其面临的挑战。
林立鹏[8]（2021）在《抗体检测对COVID-19的诊断价值和疫苗的免疫性分析》文中研究指明目的新型冠状病毒肺炎疫情的发生与迅速扩散,给世界带来灾难性的后果,所以快速的诊断和治疗,以及有效的预防手段都是控制疫情的希望。本文通过前期的特异性抗体对严重急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）的诊断价值研究以及后期对SARS-CoV-2疫苗的免疫有效性的研究,希望为临床防疫工作提供思路与建议。1.评价SARS-CoV-2特异性抗体IgG和IgM检测在2019冠状病毒病（COVID-19）诊断中的应用价值。2.国内已陆续开展SARS-CoV-2疫苗接种工作,疫苗主要来自国内北京生物制品研究所有限责任公司和武汉生物制品研究所有限责任公司生产的新型冠状病毒灭活疫苗,通过检测接种该疫苗成年人的抗S蛋白的IgG和IgM,了解和分析疫苗的体液免疫效果。方法1.采用回顾性研究方法,收集了2020年1月20日～4月16日确诊为COVID-19患者的94例血清标本为研究对象,对照组为161例确诊为非COVID-19的其他疾病患者的血清标本。通过胶体金免疫层析法检测血清中的SARS-CoV-2特异性IgG和IgM抗体,分析抗体检测对COVID-19的诊断价值。2.从100名接种过SARS-CoV-2疫苗的成年志愿者中采集166份血标本,并收集40份未接种SARS-CoV-2疫苗的血标本作为对照组,通过磁微粒化学发光法检测206份标本的抗S蛋白IgG、IgM的抗体水平,初步了解并分析SARS-CoV-2疫苗的体液免疫效果。结果1.（1）SARS-CoV-2特异性的IgG和IgM抗体检测结果:COVID-19患者中IgG阳性89例（94.68%）,IgM阳性78例（82.98%）,IgG/IgM（IgG和IgM抗体任一阳性即确定为阳性）阳性91例（96.81%）;对照组标本中IgG和IgM均阳性的1例（0.62%）,单IgG阳性1例（1.24%）,单IgM阳性1例（1.24%）。（2）SARS-CoV-2特异性IgG和IgM抗体检测对COVID-19的诊断敏感度和特异性:以核酸检测阳性为金标准,IgG/IgM诊断COVID-19的敏感性96.81%,特异性98.14%,准确度97.65%,阳性似然比51.95,阴性似然比0.03,约登指数0.95。IgG阳性、IgM阳性、IgG/IgM阳性诊断敏感性间的差异有统计学意义（P<0.01）,IgG/IgM的诊断敏感性最高。（3）SARS-CoV-2特异性IgG和IgM抗体检测与患者病程:COVID患者中有4例为主动筛查发现的无症状感染者,即患者检出IgG/IgM阳性的时间早于核酸确诊时间（发病天数<0）,对不同病程患者的IgG和IgM检测情况进行分析,结果显示发病时间在0～7d时,IgG阳性和IgM阳性结果间的差异有统计学意义（P<0.05）。2.（1）第一次注射疫苗后采集的66份标本中IgG全部为阴性,阳性率为0（0/66）,IgM阳性率为4.54%（3/66）。（2）第二次注射后采集的100份标本中IgG阳性率为71%（71/100）,IgM阳性率为20%（20/100）,总阳性率为71%（71/100）,其中注射后第14天的7例标本中有1例IgG阳性,即阳性率为14.29%,而第28天至35天的标本阳性率达75.27%（70/93）。（3）我们通过统计分析第二次标本的IgG抗体检测结果（样本发光值/临界值）和阳性转换率,对比发现男性的中位数结果为4.87（2.14,9.13）,女性的中位数结果为3.76（2.06,10.23）,p=0.485,差异无统计学意义。男性的IgG阳性率为64.29%（27/42）,女性的IgG阳性率为75.86%（44/58）,p=0.208,差异无统计学意义。我们又把年龄组分为三段（分别为<30岁,30-49岁,50岁及以上）进行统计比对,检测结果中位数分别为6.15（2.24,11.32）,4.21（2.19,9.10）,2.28（1.41,7.29）,p=0.271,差异无统计学意义。阳性率分别为83.33%（15/18）,71.64%（48/67）,53.33%（8/15）,p=0.164,差异无统计学意义。（4）在实验中我们发现,研究对象第二次抽血标本的阴性结果检测发光值要比对照组的检测发光值高,所以我们将两组数据也进行统计比较。发现实验组IgG中位数结果为0.32（0.22,0.54）,对照组中位数结果为0.12（0.11,0.14）,P<0.001;实验组IgM中位数结果为0.27（0.14,0.50）,对照组中位数结果为0.10（0.08,0.11）,P<0.001。显示无论是IgG还是IgM,两组结果差距均具有显着的统计学意义。结论1.通过对94例COVID-19确诊患者和161例确诊为非COVID-19的其他疾病患者的研究发现,SAS-CoV-2特异性IgG或IgM抗体检测在COVID-19的临床诊断中有重要应用价值,是COVID-19的重要诊断和筛查指标。2.通过磁微粒化学发光法检测206份标本的抗S蛋白IgG、IgM的抗体水平,了解并分析COVID-19疫苗的免疫效果,明确了疫苗在人群中有较高的免疫性反应,具有良好的免疫效果。
曾小平[9]（2021）在《酶联免疫间接法检测新型冠状病毒S蛋白抗体方法的建立及评价》文中研究说明
陈馨宁,黄斐,张春燕,潘柏申[10]（2021）在《分子诊断技术在新型冠状病毒核酸检测中的应用及发展》文中进行了进一步梳理新冠肺炎疫情是百年来全球发生的最严重的公共卫生事件,其持续爆发凸显了快速准确的诊断分析是大流行得到控制的密钥。该文结合新型冠状病毒核酸检测现状和当前最新标准指南,对不同分子诊断技术进行评述,并对这些技术在未来传染病暴发中的应用和发展提出建议。
二、SARS冠状病毒的分离培养与鉴定（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、SARS冠状病毒的分离培养与鉴定（论文提纲范文）
（3）基于CRISPR/Cas的检测技术发展及其在植物病原物检测中的应用（论文提纲范文）
| 1 CRISPR/Cas系统的分类 |
| 1.1 II型效应蛋白 |
| 1.2 V型效应蛋白 |
| 1.3 VI型效应蛋白 |
| 2 基于CRISPR/Cas系统的病原体检测技术 |
| 3 CRISPR/Cas系统在植物病原物检测中的应用 |
| 4 前景及展望 |
（4）新型冠状病毒肺炎实验室检测技术进展（论文提纲范文）
| 1 SARS-Co V-2病原学 |
| 2 SARS-Co V-2的实验室检测 |
| 2.1 肺部影像学检查 |
| 2.2 病毒培养及检测 |
| 2.3 SARS-Co V-2核酸检测 |
| 2.3.1 RT-PCR法 |
| 2.3.2 恒温扩增法 |
| 2.3.3 CRISPR/Cas检测法 |
| 2.3.4 NGS |
| 2.4 SARS-Co V-2特异性抗原/抗体检测 |
| 2.5 其他实验室检测技术 |
| 3 结语 |
（5）新型冠状病毒及其分子生物学诊断新技术（论文提纲范文）
| 1 SARS-Co V-2生物学特性与致病性 |
| 1.1 生物学特性 |
| 1.2 致病性 |
| 1.3 临床特征 |
| 2 SARS-Co V-2分子结构 |
| 2.1 基因组构成 |
| 2.2 基因组结构蛋白 |
| 3 分子诊断技术 |
| 3.1 聚合酶链反应(PCR) |
| 3.2 实时荧光定量(FQ-PCR)试验法 |
| 3.2.1 引物和探针设计 |
| 3.2.2 核酸提取和实时荧光RT-PCR反应体系 |
| 3.2.3 结果判断 |
| 3.3 环介导等温扩增(LAMP) |
| 3.3.1 引物设计 |
| 3.3.2 RNA提取 |
| 3.3.3 扩增体系 |
| 3.4 核酸质谱技术 |
| 3.4.1 仪器和试剂 |
| 3.4.2 试验方法 |
| 3.4.3 实验结果分析 |
| 3.5 核酸现场快速检验(point-of-care testing,POCT)技术 |
| 3.6 基因测序技术 |
| 3.6.1 宏基因组测序(m NGS)临床应用 |
| 3.6.2 第二代宏基因组高通量测序 |
| 3.6.3 第三代纳米孔高通量测序 |
| 4 小结 |
（6）水貂冠状病毒研究进展（论文提纲范文）
| 1 MCoV病原学 |
| 1.1 基因组结构 |
| 1.2 遗传进化 |
| 1.3 受体特点 |
| 2 ECG的诊断 |
| 2.1 电镜检查 |
| 2.2 病毒分离鉴定 |
| 2.3 酶联免疫吸附试验（ELISA) |
| 2.4 PCR检测 |
| 3 ECG的防治 |
| 4 小结与展望 |
| 4.1 水貂可作为研究CoV的动物模型 |
| 4.2 MCoV的公共卫生意义 |
（7）新型冠状病毒灭活疫苗研发及应用（论文提纲范文）
| 1 SARS-Co V-2的特征 |
| 2 疫苗毒种与细胞基质选择 |
| 3 灭活疫苗的生产工艺 |
| 4 临床前研究 |
| 5 临床研究 |
| 5.1 北京生物COVID-19灭活疫苗 |
| 5.2 科兴生物COVID-19灭活疫苗 |
| 5.3 武汉生物COVID-19灭活疫苗 |
| 5.4 医科院生物所COVID-19灭活疫苗 |
| 5.5 康泰生物COVID-19灭活疫苗 |
| 5.6 印度Bharat Biotech公司COVID-19灭活疫苗 |
| 5.7其他COVID-19灭活疫苗 |
| 6 对突变株的保护作用 |
| 7 COVID-19灭活疫苗的应用及面临挑战 |
（8）抗体检测对COVID-19的诊断价值和疫苗的免疫性分析（论文提纲范文）
| 中英文缩写对照表 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第1章 IgG和 IgM检测对COVID-19 的诊断价值 |
| 1.1 前言 |
| 1.1.1 冠状病毒(coronavirus)概述 |
| 1.1.2 SARS-CoV-2 生物学研究的进展 |
| 1.1.3 病原学诊断概述 |
| 1.1.4 特异性抗体IgM/IgG检测与COVID-19研究进展 |
| 1.1.5 T淋巴细胞与COVID-19 研究进展 |
| 1.1.6 促炎因子与COVID-19 研究进展 |
| 1.1.7 血常规与COVID-19研究进展 |
| 1.2 研究目的 |
| 1.3 材料与方法 |
| 1.3.1 研究对象 |
| 1.3.2 检测试剂和方法 |
| 1.3.3 统计学分析 |
| 1.4 结果 |
| 1.4.1 SARS-CoV-2 特异性的IgG和 IgM抗体检测结果 |
| 1.4.2 IgG和IgM检测对COVID-19诊断的敏感性和特异性 |
| 1.4.3 SARS-CoV-2 特异性IgG和 IgM抗体检测与患者病程 |
| 1.5 讨论 |
| 1.6 小结 |
| 第2章 SARS-CoV-2 疫苗的体液免疫效果探究 |
| 2.1 前言 |
| 2.1.1 SARS-CoV-2疫苗研发的免疫学基础 |
| 2.1.2 SARS-CoV-2 疫苗的研发概述 |
| 2.1.3 SARS-CoV-2 疫苗的免疫原性研究 |
| 2.1.4 SARS-CoV-2 疫苗研究中存在的问题 |
| 2.2 研究目的 |
| 2.3 材料与方法 |
| 2.3.1 研究对象 |
| 2.3.2 检测方法、仪器和试剂 |
| 2.3.3 统计学分析 |
| 2.4 结果 |
| 2.4.1 抗S蛋白特异性抗体的IgG和 IgM检测结果 |
| 2.4.2 IgG和 IgM抗体的检测结果和阳性率统计比较 |
| 2.4.3 阴性结果与对照组结果的统计结果对比 |
| 2.5 讨论 |
| 2.6 小结 |
| 2.7 展望 |
| 参考文献 |
| 附录1 国内外文献综述 SARS-CoV-2的实验室检测技术 |
| 参考文献 |
| 附录2 攻读硕士学位期间发表的与学位论文相关的学术论文 |
| 致谢 |
（10）分子诊断技术在新型冠状病毒核酸检测中的应用及发展（论文提纲范文）
| 1 核酸检测样本 |
| 1.1 样本类型 |
| 1.2 采样模式 |
| 2 核酸检测技术 |
| 2.1 常态化防控 |
| 2.1.1 常规检测 |
| 2.1.2 快速检测 |
| 2.2 病毒溯源及变异监测 |
| 2.3 参考品制作 |
| 3 小结及展望 |
四、SARS冠状病毒的分离培养与鉴定（论文参考文献）
- [1]山东省新型冠状病毒分离与全基因组进化分析[J]. 王建醒,刘倜,姚明晓,陶泽新,房明,李岩,张玉薇,吴巨龙,何玉洁,姜蕾,李忠,姜晓林,康佃民,寇增强. 中华实验和临床病毒学杂志, 2021(06)
- [2]儿童常见呼吸道病原免疫预防专家共识[J]. 国家呼吸医学中心. 中华实用儿科临床杂志, 2021(22)
- [3]基于CRISPR/Cas的检测技术发展及其在植物病原物检测中的应用[J]. 雷荣,费鑫宇,李明福,吴品珊,王新一. 植物检疫, 2021
- [4]新型冠状病毒肺炎实验室检测技术进展[J]. 魏剑浩,朱召芹. 上海医药, 2021(17)
- [5]新型冠状病毒及其分子生物学诊断新技术[J]. 朱镭,朱庆义. 中华临床实验室管理电子杂志, 2021(03)
- [6]水貂冠状病毒研究进展[J]. 张传美,张路宾,刘佳卉,赵辉,马清霞,杨海燕,单虎. 病毒学报, 2021(04)
- [7]新型冠状病毒灭活疫苗研发及应用[J]. 邓涛,年悬悬,张家友,黄仕和,杨晓明. 中国生物制品学杂志, 2021(07)
- [8]抗体检测对COVID-19的诊断价值和疫苗的免疫性分析[D]. 林立鹏. 汕头大学, 2021
- [9]酶联免疫间接法检测新型冠状病毒S蛋白抗体方法的建立及评价[D]. 曾小平. 海南医学院, 2021
- [10]分子诊断技术在新型冠状病毒核酸检测中的应用及发展[J]. 陈馨宁,黄斐,张春燕,潘柏申. 临床检验杂志, 2021