导读:本文包含了培养上清液论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:细胞,干细胞,食管,痤疮,羊膜,上清液,肿瘤。
培养上清液论文文献综述
王慧[1]（2019）在《提高细胞上清液中甲状旁腺激素水平对甲状旁腺细胞培养及分泌功能有优化作用》一文中研究指出背景:端粒酶反转录酶是一种重要的调控细胞分化增殖的酶,其具有多种生物活性。研究表明,经过h TERT基因修饰后可能有利于提高甲状旁腺细胞增殖能力的存活能力和功能,能够起到对甲状旁腺细胞体外培养的优化作用。目的:用负载h TERT目的基因的反转录病毒PLXSN转染大鼠甲状旁腺细胞,观察细胞生物学特性及细胞分泌功能变化,以探讨甲状旁腺细胞培养更为优化的方法。方法:28只雄性Wistar大鼠,由北京维通利华动物实验技术有限公司提供,经天津医科大学动物实验伦理委员会批准(批准号为2017-0652)。大鼠麻醉后切取甲状旁腺并通过病理学确认,用胶原酶Ⅱ消化获得甲状旁腺细胞,并经过Westernblot检测钙敏感性受体、甲状旁腺激素和神经胶质细胞缺失转录因子(GCM-2)进行鉴定。将鉴定后细胞分为正常的甲状旁腺细胞组、空病毒组和h TERT转染组。h TERT转染后3d,通过RT-PCR和Western blot检测各组细胞中h TERT基因和蛋白相对表达;应用细胞生长曲线和CCK-8法观察细胞生长情况;采用流式细胞术测定细胞周期分布;使用酶联免疫吸附测定法检测细胞的上清液中甲状旁腺激素的浓度变化。结果与结论:①Westernblot检测结果显示甲状旁腺细胞的特异性标志物钙敏感性受体、甲状旁腺激素及神经胶质细胞缺失转录因子(GCM-2)均呈现阳性结果,表明培养细胞为甲状旁腺细胞;②h TERT转染组中h TERT基因和蛋白的相对表达显着高于甲状旁腺细胞组和空病毒组(P <0.05);③h TERT转染组中细胞的生长速度明显地增快,细胞周期G0/G1期减少,而S期细胞数增多(P <0.05),培养细胞上清液中甲状旁腺激素水平显着升高(P<0.05);④结果说明,携带h TERT基因的反转录病毒PLXSN转染大鼠甲状旁腺细胞可促进大鼠甲状旁腺细胞增殖;明显地提高细胞上清液中甲状旁腺激素水平,对甲状旁腺细胞培养及分泌功能有优化作用。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2019年25期）
沈花,常怡,陆薇,许化溪,王胜军[2]（2019）在《Lewis肺癌细胞培养上清液通过调控糖酵解途径增强小鼠髓源性抑制细胞的免疫抑制功能》一文中研究指出目的探讨Lewis肺癌细胞培养上清(TCCM)对髓源性抑制细胞(MDSC)代谢和功能的影响。方法免疫磁珠法分离Lewis肺癌移植瘤小鼠脾脏MDSC,用小鼠TCCM处理MDSC 48 h后,实时荧光定量PCR检测MDSC中乳酸脱氢酶A(LDHA)及葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)mRNA的水平,己糖激酶(HK)法检测葡萄糖浓度,乳酸检测试剂盒检测糖酵解途径终产物乳酸含量,羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)染色结合流式细胞术检测MDSC对CD4~+ T细胞增殖的抑制作用,精氨酸酶1(ARG1)检测试剂盒检测MDSC的ARG1活性,一氧化氮试剂盒检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的分泌水平。结果与未处理组相比, TCCM处理过的MDSC糖酵解途径关键酶LDHA的mRNA水平及糖酵解途径相关蛋白GLUT1、 HIF-1α的mRNA水平明显上调, MDSC分泌的免疫抑制性效应分子ARG1的活性和iNOS的分泌量显着增加, MDSC对CD4~+ T细胞增殖的抑制作用明显增强。结论 TCCM能够激活MDSC的糖酵解途径,上调其对CD4~+T细胞增殖的抑制作用及免疫抑制效应分子的释放。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2019年06期）
郑中龙[3]（2019）在《食管鳞癌细胞培养上清液对正常CD3~+CD56~+NKT细胞亚型、表面受体及效应分子表达的影响》一文中研究指出目的:观察食管鳞癌细胞培养上清液对健康人外周血CD3~+CD56~+NKT细胞亚型、表面受体及效应分子表达的影响。方法:第一部分:收集30例健康志愿者的外周血,用淋巴细胞分离液常规方法分离外周血单核细胞。收集食管鳞癌细胞株Eca9706、Kyse150的培养上清液,将上清液与含10%胎牛血清的RPMI1640培养基按1:1混合以配制条件培养基。将外周血单核细胞分为对照组、Eca9706组、Kyse150组。对照组细胞仅用含IL-2、10%胎牛血清的RPMI1640培养液培养;Eca9706组、Kyse150组细胞加入IL-2刺激24h后,分别更换条件培养基及加入IL-2(Eca9706细胞培养上清液、Kyse150细胞培养上清液)培养48h。收集各组细胞,选择流式细胞仪的CD3~+CD56~+的细胞群设计分析,分析各组CD3~+CD56~+NKT细胞亚型,检测CD3~+CD56~+NKT细胞中的表面受体(NKG2D、NKG2A、NKP30、NKP44、CD158b、CD271)及效应分子(穿孔素、颗粒酶、Ki-67)的表达情况。第二部分:取食管鳞癌组织做食管鳞癌细胞原代培养,原代培养成功后收集上清液离心,将上清液与含10%胎牛血清的RPMI1640培养基按1:1混合以配制条件培养基。取健康志愿者的外周血,用淋巴细胞分离液常规方法分离外周血单核细胞。将外周血单核细胞分为对照组、原代培养组。对照组细仅用含IL-2、10%胎牛血清的RPMI1640培养液培养;原代培养组细胞加入IL-2刺激24h后,更换条件培养基及加入IL-2(原代培养组培养上清液)培养72h。收集各组细胞,选择流式细胞仪的CD3~+CD56~+的细胞群设计分析,分析各组CD3~+CD56~+NKT细胞亚型,检测CD3~+CD56~+NKT细胞中的表面受体(NKG2D、NKG2A、NKP30、NKP44、CD158b、CD271)及效应分子(穿孔素、颗粒酶、Ki-67)的表达情况。研究结果:1.各组CD3~+CD56~+NKT细胞的不同亚型所占比例比较:(1)食管鳞癌细胞株培养上清液可以诱导CD3~+CD56~+NKT细胞亚型改变:共培养实验结果显示,与单独培养组(NC)相比,共培养组(Eca9706及Kyse150组)CD3~+CD56~+NKT细胞亚型CD4~+CD8~-NKT细胞占比(4.19%±0.68%、3.46%±0.27%vs 2.56%±0.34%)升高(p=0.011),CD4~-CD8~-NKT细胞占比(7.72%±2.47%、9.37%±3.06%vs 15.68%±2.4%)降低(p=0.025),CD4~-CD8~+NKT细胞(75.68%±9.92%、74.97%±8.31%vs 73.07%±8.09%)比例变化不明显(p=0.931);Eca9706组及Kyse150组比较无明显变化。(2)食管鳞癌细胞原代培养上清液可以诱导CD3~+CD56~+NKT细胞亚型改变:共培养实验结果显示,与单独培养组(NC)相比,共培养组(原代培养上清液组)CD3~+CD56~+NKT细胞亚型CD4~+CD8~-NKT细胞(4.47%±0.38%vs 2.48%±0.27%)比例升高(p=0.013),CD4~-CD8~-NKT细胞(8.38%±0.87%vs 14.68%±1.52%)比例降低(p=0.023),CD4~-CD8~+NKT细胞(73.05%±4.28%vs 78.41%±4.37%)比例变化不明显(p=0.431)。2.各组CD3~+CD56~+NKT细胞表面受体表达率比较:(1)食管鳞癌细胞株培养上清可以诱导CD3~+CD56~+NKT细胞的表面受体表达改变。共培养实验结果显示,与单独培养组(NC)相比,条件培养基组(Eca9706及Kyse150组)NKG2A(35.33%±9.29%、32.82%±8.12%vs17.47%±9.51%)表达率增加(p=0.042)、CD158b(64.05%±5.28%、62.34%±4.89%vs 52.32%±3.73%)表达率增加(p=0.013);条件培养基组(Eca9706及Kyse150组)NKP44(8.61%±1.65%、9.78%±1.42%vs11.63%±1.40%)表达率降低(p=0.017)、NKP30(25.68%±8.49%、25.96%±6.60%vs 40.63%±8.23%)表达率降低(p=0.038)、CD271(24.82%±4.89%、26.69%±4.50%vs 34.23%±3.25%)表达率降低(p=0.028);条件培养基组(Eca9706及Kyse150组)NKD2D单独培养组(NC)相比无统计学差异(p>0.05)。(2)食管鳞癌细胞原代培养上清液可以诱导CD3+CD56+NKT细胞的表面受体表达改变:共培养实验结果显示,与单独培养组(NC)相比,共培养组(原代培养上清液组)NKG2A(29.14%±6.10%vs 14.02%±2.13%)表达率增加(p=0.047)、CD158b(65.36%±5.41%vs 41.91%±6.42%)表达率增加(p=0.024);共培养组(原代培养上清液组)NKP44(10.93%±1.54%vs 25.57%±1.40%)表达率降低(p=0.0003)、NKP30(23.98%±3.41%vs 40.4%±4.74%)表达率降低(p=0.048)、CD271(18.11%±1.54%vs 41.67%±7.22%)表达率降低(p=0.033);共培养组(原代培养上清液组)NKD2D与单独培养组(NC)相比(75.53%±8.14%vs 82.56%±6.93%)无统计学差异(p=0.53)。3.各组CD3+CD56+NKT细胞中效应分子表达比较:(1)食管鳞癌细胞株培养上清液可以诱导CD3+CD56+NKT细胞的生物学功能改变。共培养实验结果显示,与单独培养组(NC)相比,条件培养基组(Eca9706组)穿孔素(Perforin)(93.98%±1.74%vs 98.70%±0.96%)表达降低(p=0.001),颗粒酶(GranzymeB)表达无明显变化(p>0.05),条件培养基组(Eca9706组)Ki-67(75.69%±3.74%vs 61.83%±6.12%)表达增加(p=0.033)。(2)食管鳞癌细胞原代培养上清液可以诱导CD3+CD56+NKT细胞的生物学功能改变。共培养实验结果显示,与单独培养组(NC)相比,共培养组(原代培养上清液组)穿孔素(Perforin)(57.43%±4.74%vs 78.70%±15.69%)表达降低(p=0.037),颗粒酶(GranzymeB)表达无明显变化(p>0.05),共培养组(原代培养上清液组)Ki-67(30.23%±3.63%vs 54.89%±8.76%)表达降低(p=0.04)。结论1.食管鳞癌细胞培养上清液通过上调CD4+CD8-NKT细胞比例,下调CD4-CD8-NKT细胞比例,改变浸润的CD3+CD56+NKT细胞的亚型分布。2.食管鳞癌细胞培养上清液能抑制CD3+CD56+NKT细胞表面活化性受体表达,促进表面抑制性受体的表达,使二者表达比例失衡。3.食管鳞癌细胞培养上清液可通过下调CD3+CD56+NKT细胞效应分子穿孔素的表达,抑制CD3+CD56+NKT细胞的杀伤活性。4.食管鳞癌细胞培养上清液能改变CD3+CD56+NKT细胞效应分子Ki-67的表达。(本文来源于《西南医科大学》期刊2019-05-01）
卢炜莹[4]（2019）在《小鼠成骨细胞受X线辐照后培养上清液的蛋白芯片分析》一文中研究指出研究背景与目的放射治疗是口腔颂面-头颈肿瘤的重要治疗手段,其在杀灭肿瘤的同时也损伤正常组织,可导致骨代谢紊乱、骨质疏松症、骨愈合不良等,而放射性领骨坏死是严重并发症之一,其发病机制尚未明确。电离辐射等物理刺激可引起骨的改建,成骨细胞的骨形成与破骨细胞的骨吸收共同维持着骨的动态平衡。细胞受到电离辐射后会发生形态、表型、基因和蛋白表达的变化,那么辐照是如何影响成骨细胞增殖、分化及成骨相关基因表达,以及成骨细胞受到不同剂量辐照后所分泌的蛋白是否存在差异,是否存在辐射损伤特异性蛋白,这些差异蛋白涉及哪些生物学过程及信号转导通路,目前尚缺乏实验进一步研究证实。因此,为了填补这一关键的知识空白,本研究中通过观察不同剂量辐照对成骨细胞增殖分化及其分泌蛋白的影响,筛选辐射损伤可能的特异性蛋白并初步探讨可能涉及的生物学过程及信号转导通路,为更好地理解辐射对骨组织的生物学作用提供参考。方法1.取体外培养的小鼠成骨细胞MC3T3-E1,按辐照剂量分成0 Gy组、2 Gy组、4 Gy组、8 Gy组、16 Gy组5组,使用6 MV直线加速器分别予以X线辐照,观察辐照后细胞形态的改变,CCK8法检测细胞增殖情况,辐照后7 d检测0 Gy组、2 Gy组、4 Gy组、8 Gy组细胞内ALP活性及采用qPCR检测细胞OPG、OCN、Runx2、ALP的mRNA表达水平。2.小鼠成骨细胞辐照后7 d分别收集0 Gy组、2 Gy组、4 Gy组、8 Gy组细胞上清液,采用高通量蛋白芯片技术检测分泌蛋白的表达情况,GO和KEGG pathway分析差异蛋白的生物学信息,并筛选出辐射剂量依赖性上调的差异蛋白,通过ELISA验证。结果1.辐照后成骨细胞胞体肿大,细胞核变大,胞浆内空泡增多,特别是核区附近出现黑色颗粒,贴壁能力减退,出现较多漂浮的细胞,随着辐射剂量增加,上述改变愈加明显。采用CCK8法检测细胞增殖情况,辐照后3 d、5 d和7 d,4个辐照组均导致成骨细胞增殖呈辐射剂量依赖性降低(P<0.05)。辐照后7 d,各辐照组细胞内ALP活性均较对照组低,差异有统计学意义(P<0.05)。2 Gy辐照未显着引起成骨相关基因mRNA表达水平的变化;4 Gy以上辐照组较对照组OPG、Runx2和ALP基因的表达下调,差异有统计学意义(P<0.05);而OCN基因的表达水平在4 Gy辐照时下调,8 Gy辐照时显着上调(P<0.05)。2.成骨细胞辐照后上清液中共发现36个表达差异蛋白,GO及KEGG Pathway分析表明X线辐照成骨细胞后,多种炎症细胞及免疫细胞被激活,细胞增殖、分化、迁移、趋化能力增强,细胞因子-细胞因子受体相互作用、细胞黏附信号、血管生成信号、TNF信号通路、JAK/STAT信号通路、ERK1和ERK2信号通路、IL-17信号通路等明显富集。其中IL-22和TremL1的表达水平在3个辐射剂量下都存在差异,并且均表现为上调。RANTES呈辐射剂量依赖性表达上调,ELISA验证成骨细胞辐照后RANTES表达水平显着上调(P<0.05)。结论1.X线辐照抑制成骨细胞的增殖、分化和基质矿化能力,从而干扰骨形成。2.成骨细胞受到X线辐照后表达的蛋白质涉及急性炎症、免疫反应、氧化应激、防御反应,伴有组织修复等相关生物过程及信号通路。3.RANTES可能是成骨细胞受辐射损伤后引发炎症、趋化、修复等一系列生物过程的关键因子,但其具体作用机制仍待进一步研究。(本文来源于《南方医科大学》期刊2019-05-01）
牛晓光,徐曼[5]（2019）在《角膜缘干细胞培养上清液对血管内皮细胞增殖的影响（英文）》一文中研究指出目的:观察角膜缘干细胞培养液对血管内皮细胞增殖的影响。方法:分别培养角膜缘干细胞及球结膜上皮细胞,并通过免疫组化检测AE-5蛋白鉴别角膜缘干细胞。搜集两组培养细胞的上清液加入培养的人脐静脉血管内皮细胞中,并设立对照组。培养24h后通过MTT法检测细胞增殖情况并进行统计学分析。结果:角膜缘干细胞AE-5染色呈阴性,而球结膜上皮细胞为阳性。加入角膜缘干细球结膜上皮细胞和对照组培养液的血管内皮细胞MTT值分别为2.097±0.079,1.981±0.034和1.990±0.044。叁组间有显着性差异(F=9.169,P=0.000)。加入角膜缘干细胞培养上清液的血管内皮细胞增殖活性明显高于其他两组(P=0.005和P=0.007)。结论:角膜缘干细胞培养液能够促进血管内皮细胞的增殖,这可能是角膜缘干细胞的特征。本研究从功能学角度为角膜缘干细胞理论提供更多的依据。(本文来源于《国际眼科杂志》期刊2019年03期）
赵传祥,李宏慧,汤思熠,吴仪,李慈[6]（2019）在《间充质干细胞培养上清液抑制成纤维细胞的衰老》一文中研究指出目的:探讨人脐带间充质干细胞培养上清液对人皮肤成纤维细胞的抗衰老作用。方法:将原代人皮肤成纤维细胞分为正常对照组、H_2O_2组、培养上清液组和H_2O_2+培养上清液组。其中,H_2O_2组和H_2O_2+培养上清液组中细胞皆采用200μmol/L H_2O_2预先处理,以诱导细胞衰老模型。采用β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测细胞β-半乳糖苷酶活性; DAPI染色检测细胞核体积变化;采用实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)检测细胞中P53和P21的mRNA转录水平;蛋白质印迹检测P53蛋白表达。结果:与正常对照组相比,H_2O_2处理后与细胞衰老相关的β-半乳糖苷酶活性明显增强、β-半乳糖苷酶阳性细胞百分比明显增多(P <0. 05);细胞核体积明显变大,衰老细胞明显增多(P <0. 05); P53和P21 mRNA转录水平明显升高(P <0. 05),并且P53蛋白表达增强。经间充质干细胞培养上清液处理后,上述衰老相关指标均明显改善(P <0. 05)。结论:人脐带间充质干细胞培养上清液可抑制H_2O_2诱导的成纤维细胞衰老进程。(本文来源于《江苏大学学报(医学版)》期刊2019年01期）
李德彧,曹碧兰,曾霓,张红,曾文心[7]（2018）在《hAMSCs培养上清液对痤疮炎症大鼠模型的大体表现和组织病理学的影响》一文中研究指出目的从大体和组织病理观察人羊膜间充质干细胞(h AMSCs)培养上清液对痤疮炎症大鼠模型的影响,探讨hAMSCs培养上清液是否具有抗炎作用。方法予以痤疮丙酸杆菌菌液50μL于大鼠耳廓中央皮肤进行皮下注射构建痤疮炎症模型;并用hAMSCs培养上清液局部注射治疗,观察注射前后局部皮肤的改变,取局部皮损进行组织病理学观察,并于高倍镜下计数其炎症细胞数。结果 (1)痤疮炎症模型组于注射后持续红肿,9天后红肿改善不明显,触摸局部有结节感,质硬,表面小丘疹形成; hAMSCs培养上清液局部注射治疗组在注射hAMSCs培养上清液2天后耳廓肿胀逐渐消退,但与空白对照组比较局部有轻度增厚;(2)光学显微镜下观察:痤疮炎症模型组见皮下组织结构消失,炎症细胞弥漫性浸润,部分形成脓肿,部分毛囊面积扩大,毛囊口扩张,皮脂腺消失; hAMSCs培养上清液局部注射治疗组见毛囊皮脂腺缩小,未见明显炎性细胞浸润;(3)炎症细胞计数结果:hAMSCs培养上清液注射治疗组炎症细胞计数明显低于痤疮炎症模型组,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论经hAMSCs培养上清液局部注射于大鼠痤疮炎症模型后,大体表现和组织病理学观察其炎症反应均明显减轻,且炎症细胞计数与痤疮动物模型组比较明显减少,提示hAMSCs培养上清液具有抗炎作用。(本文来源于《中国皮肤性病学杂志》期刊2018年11期）
疏佳萍,柏文华,蒋犁[8]（2018）在《骨髓间充质干细胞培养上清液在未成熟鼠脑损伤中的免疫调节作用》一文中研究指出目的:观察骨髓间充质干细胞上清液对未成熟鼠脑损伤模型炎症因子白细胞介素-6(IL-6)及转化生长因子-β(TGF-β)的影响,探讨骨髓间充质干细胞旁分泌作用干预未成熟鼠脑损伤的机制。方法:采用健康SD大鼠的24只新生3 d乳鼠建立早产儿脑损伤模型,分为对照组、磷酸缓冲溶液(PBS)干预组和细胞培养上清液干预组。模型制作成功后,各组侧脑室立体定向移植PBS及上清液,制备侧脑室HE染色病理切片,采用酶联免疫吸附测定法检测各组1、3、5 d IL-6及TGF-β的分泌趋势及分泌浓度。结果:早产儿脑损伤模型分泌IL-6随天数递增而增多,上清液干预组分泌IL-6的量明显少于对照组及PBS干预组,分泌TGF-β的量明显高于对照组及PBS干预组。结论:骨髓间充质干细胞上清液可以改善未成熟鼠脑损伤的预后,降低促炎因子,增加保护性因子的分泌量。(本文来源于《东南大学学报(医学版)》期刊2018年05期）
犹忠萍,曾霓,张红,曾文心,代敏[9]（2018）在《人羊膜间充质干细胞培养上清液对痤疮丙酸杆菌体外抑菌实验初探》一文中研究指出目的初步探究人羊膜间充质干细胞培养上清液在体外是否具有抑制痤疮丙酸杆菌生长的作用。方法采用机械分离联合二酶消化法分离获取人羊膜间充质干细胞并进行传代培养,同时收集原代至5代细胞培养上清液体外作用于痤疮丙酸杆菌。通过抹药法观察细菌生长情况、打孔法测量抑菌圈大小,根据美国临床和实验室标准协会抗菌药物体外药敏实验进行判断。结果原代至2代培养上清液直接抹药组有细菌生长,且无抑菌圈产生,但3~5代上清液抹药组无细菌生长,且抑菌圈大小均值分别为29. 50mm、30. 65mm、30. 00mm,组间比较差异无统计学意义(P> 0. 05);克痤隐酮组抑菌圈均值为54. 58mm,3~5代上清液与克痤隐酮打孔组相比差异有显着统计学意义(P <0. 001)。结论人羊膜间充质干细胞培养上清液从第3代开始具有抑制痤疮丙酸杆菌生长的作用,抑菌效果稳定,但抑菌能力弱于克痤隐酮。(本文来源于《中国皮肤性病学杂志》期刊2018年10期）
郑中龙,吴剑,戴天阳[10]（2018）在《食管鳞癌细胞培养上清液对正常CD3~+CD56~+NKT细胞亚型、表面受体及效应分子表达的影响》一文中研究指出目的观察食管鳞癌细胞株培养上清液对健康人外周血CD3~+CD56~+NKT细胞亚型、表面受体及效应分子表达的影响。方法取30例健康志愿者的外周血,用淋巴细胞分离液常规方法分离外周血单核细胞。收集食管鳞癌细胞株Eca9706、Kyse150的培养上清液,将上清液与含10%胎牛血清的RPMI1640培养基按1∶1混合以配制条件培养基。将外周血单核细胞分为对照组、Eca9706组、Kyse150组。对照组细胞仅用含IL-2、10%胎牛血清的RPMI1640培养液培养;Eca9706组、Kyse150组细胞加入IL-2刺激24 h后,分别更换条件培养基(Eca9706细胞培养上清液、Kyse150细胞培养上清液)培养48 h。收集各组细胞,选择流式细胞仪的CD3~+CD56~+的细胞群设计分析,分析各组CD3~+CD56~+NKT细胞亚型,检测CD3~+CD56~+NKT细胞中的表面受体(NKG2D、NKG2A、NKP30、NKP44、CD158b、CD271)及效应分子(穿孔素、颗粒酶、Ki-67)。结果 Eca9706组及Kyse150组的CD3~+CD56~+NKT细胞中CD4~+CD8-NKT细胞比例高于对照组,CD4-CD8-NKT细胞比例低于对照组(P均<0.05)。Eca9706组、Kyse150组的CD3~+CD56~+NKT细胞中NKG2A、CD158b表达率高于对照组,NKP44、NKP30、CD271表达率低于对照组(P均<0.05)。Eca9706组的CD3~+CD56~+NKT细胞中穿孔素表达率低于对照组(P<0.05);Eca9706组的CD3~+CD56~+NKT细胞中Ki-67表达率高于对照组(P<0.05)。结论食管鳞癌细胞株培养上清液能改变正常CD3~+CD56~+NKT细胞的亚型,使细胞表面活化型受体和抑制型受体表达比例失衡,并下调效应分子穿孔素的表达,使CD3~+CD56~+NKT细胞的免疫监视功能受损。上述变化可能是食管鳞癌细胞逃避机体免疫监视的机制之一。(本文来源于《山东医药》期刊2018年23期）
培养上清液论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的探讨Lewis肺癌细胞培养上清(TCCM)对髓源性抑制细胞(MDSC)代谢和功能的影响。方法免疫磁珠法分离Lewis肺癌移植瘤小鼠脾脏MDSC,用小鼠TCCM处理MDSC 48 h后,实时荧光定量PCR检测MDSC中乳酸脱氢酶A(LDHA)及葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)mRNA的水平,己糖激酶(HK)法检测葡萄糖浓度,乳酸检测试剂盒检测糖酵解途径终产物乳酸含量,羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)染色结合流式细胞术检测MDSC对CD4~+ T细胞增殖的抑制作用,精氨酸酶1(ARG1)检测试剂盒检测MDSC的ARG1活性,一氧化氮试剂盒检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的分泌水平。结果与未处理组相比, TCCM处理过的MDSC糖酵解途径关键酶LDHA的mRNA水平及糖酵解途径相关蛋白GLUT1、 HIF-1α的mRNA水平明显上调, MDSC分泌的免疫抑制性效应分子ARG1的活性和iNOS的分泌量显着增加, MDSC对CD4~+ T细胞增殖的抑制作用明显增强。结论 TCCM能够激活MDSC的糖酵解途径,上调其对CD4~+T细胞增殖的抑制作用及免疫抑制效应分子的释放。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
培养上清液论文参考文献
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