植物蛋白质S-亚硝基化修饰的检测与分析

植物蛋白质S-亚硝基化修饰的检测与分析

论文摘要

S-亚硝基化是一种重要的蛋白质翻译后修饰方式,是指一氧化氮(NO)基团共价连接至靶蛋白特定半胱氨酸残基的自由巯基,从而形成S-亚硝基硫醇(SNO)的过程。S-亚硝基化修饰广泛存在于各有机体中,通过改变蛋白质生化活性、稳定性、亚细胞定位以及蛋白质-蛋白质相互作用等机制而调控不同的生物学过程或信号通路。在蛋白质S-亚硝基化检测分析方法中,最为广泛使用的是生物素转化法(biotinswitchassay),其基本原理是首先封闭未被修饰的自由巯基,进而将被修饰的SNO基团特异地还原为自由巯基并使用生物素将其特异标记。被生物素标记的半胱氨酸残基(即被修饰位点)可进一步通过蛋白质免疫印迹和/或质谱等方法进行检测分析。该文详细描述了植物蛋白质样品的体内和体外生物素转化法的实验流程,并对实验过程中的注意事项进行了讨论。

论文目录

  • 1 实验材料
  • 2 试剂
  • 3 试剂配方
  • 4 设备与软件
  • 5 实验程序
  •   5.1 蛋白质体外生物素转化法 (in vitro biotinswitch assay)
  •   5.2 蛋白质体内生物素转化法 (in vivo biotinswitch assay)
  • 6 注意事项
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 陈立超,詹妮,李彦莎,冯健,左建儒

    关键词: 一氧化氮,亚硝基化,生物素转化法,植物

    来源: 植物学报 2019年04期

    年度: 2019

    分类: 基础科学

    专业: 生物学

    单位: 中国科学院遗传与发育生物学研究所

    基金: 国家自然科学基金(No.31830017,No.31521001),中国科学院战略先导B项目(No.XDB27030207)

    分类号: Q943

    页码: 497-502

    总页数: 6

    文件大小: 229K

    下载量: 214

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