导读:本文包含了人端粒酶催化亚单位论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:端粒,单位,细胞,探针,胃癌,细胞株,转染。
人端粒酶催化亚单位论文文献综述
范羽,侯梅,李璐,许峰,尤嘉琮[1]（2013）在《人端粒酶催化亚单位启动子调控nm23-H1基因靶向性表达抑制肺癌转移的实验研究》一文中研究指出背景和目的:肺癌既是全世界发病率和死亡率增长最快,也是对人类健康和生命威胁最大的恶性肿瘤,亦是临床治疗疗效最差的恶性肿瘤。肺癌的侵袭和转移是导致肺癌病人治疗失败和死亡的首要原因。现有的研究表明,肺癌侵袭和转移是一个受多基因调控,极其复杂的过程,在这个过程中,某些基因起正向调控作用,而另一些则起负向调控作用,两者之间维持平衡。许多研究已经证明,肿瘤转移抑制因子nm23-H1在肺癌中的低表达水平与肺癌的高转移潜能和不良的临床预后有关(如生存率、淋巴结转移和远处转移等),稳定转染(本文来源于《第13届全国肺癌学术大会论文汇编》期刊2013-08-08）
彭琼乐,王黎阳,赵浏阳,孙艳,柳满然[2]（2012）在《人端粒酶蛋白催化亚单位基因逆转录病毒真核表达质粒的构建及其对人乳腺癌相关成纤维细胞增殖的影响》一文中研究指出目的构建人端粒酶蛋白催化亚单位(Human telomerase reverse transcriptase,hTERT)逆转录病毒真核表达质粒,并检测其在人乳腺癌相关的成纤维细胞(Cancer-associated fibroblast,CAF)中的表达及其对CAF增殖的影响。方法扩增pIRES-EGFP-hTERT质粒,酶切回收hTERT片段,正向克隆至逆转录病毒载体pBABE-puro上,构建重组质粒pBABE-puro-hTERT,转染PT67细胞,进行逆转录病毒的包装。将PT67细胞上清感染原代培养的人乳腺癌CAF,荧光定量PCR和Westernblot分别检测hTERT基因在人乳腺癌CAF中的转录和表达,流式细胞术检测细胞的增殖情况。结果重组质粒pBABE-puro-hTERT经酶切和测序证实构建正确;与未处理的人乳腺癌CAF和感染pBABE-puro的细胞相比,感染重组质粒的人乳腺癌CAF中hTERT基因mRNA的转录水平及蛋白的表达水平均明显增强,其增殖指数也明显增加(P<0.05)。结论成功构建了hTERT基因逆转录病毒真核表达质粒,其能增强人乳腺癌CAF的增殖能力,为乳腺癌微环境CAF的研究提供了良好的细胞模型。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2012年12期）
陈镇洲[3]（2012）在《构建人端粒酶催化亚单位基因慢病毒表达载体转染人骨髓基质细胞》一文中研究指出背景:骨髓基质细胞不表达端粒酶,因而在体外传代扩增过程中端粒长度逐渐缩短,导致细胞衰老,这是限制其用于细胞治疗应用的一个重要因素。目的:构建人端粒酶催化亚单位基因慢病毒表达载体,探讨以慢病毒介导的人端粒酶催化亚单位基因修饰人骨髓基质细胞的可行性。方法:以pReceiver-M02-hTERT质粒为模板PCR扩增获得目的基因。用BP重组系统将目的片段重组到载体pDONR221上。然后使用LR重组系统将目的序列重组到载体pLenti6.3/V5-DEST上。将重组载体与包装质粒充分混合,利用脂质体共转染293FT细胞获得慢病毒颗粒。结果与结论:成功构建人端粒酶催化亚单位慢病毒表达载体,病毒的平均物理滴度为1.07×1012LP/L。以之转染人骨髓基质细胞,目的基因表达水平有显着提升,细胞正确表达人端粒酶反转录酶蛋白。说明以慢病毒介导的人端粒酶催化亚单位基因修饰人骨髓基质细胞能强化细胞表达人端粒酶催化亚单位。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2012年41期）
李燕,王谦[4]（2011）在《大肠癌围手术期血行微转移中细胞角蛋白mRNA和人端粒酶催化亚单位mRNA的表达》一文中研究指出目的探讨细胞角蛋白(cytokeratin,CK20)mRNA和人端粒酶催化亚单位(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)mRNA作为大肠癌围手术期血行微转移标志物的价值。方法以良性疾病和健康者作对照,采用逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测40例大肠癌患者术前、术中及术后外周血CK20 mRNA和hTERT mRNA的表达,并对不同(本文来源于《中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编》期刊2011-05-24）
关劼,房青,刘芳,李红艳,徐波[5]（2010）在《胃癌前病变组织中人端粒酶催化亚单位的表达及其与幽门螺杆菌感染的关系》一文中研究指出目的:探讨胃癌前病变组织中人端粒酶催化亚单位(hTERT)的表达状况及其与幽门螺杆菌(Hp)感染的关系。方法:采用实时定量荧光RT-PCR方法检测胃黏膜中hTERT表达水平,将hTERT与GAPDH拷贝数之比的100倍作为标准化hTERT(NhTERT),用快速尿素酶法和Warthin-Starry银染色法检测Hp。结果:伴肠上皮化生的萎缩性胃炎组织中hTERT表达明显增高(80.9±6.36),而肠上皮化生的Hp感染率明显高于无肠上皮化生者(69%vs31%),Hp阳性患者hTERT表达水平为(101.5±13.50),Hp阴性患者hTERT表达水平为(49.6±8.58),二者相比有统计学意义(P<0.01)。结论:在胃癌前病变阶段,Hp感染与端粒酶表达水平之间有直接关系,呈正相关,提示端粒酶、Hp感染在胃癌的发生、发展中起重要作用。(本文来源于《中日友好医院学报》期刊2010年06期）
滕小春,刘海峰,王国安[6]（2010）在《人端粒酶催化亚单位和c-myc蛋白在胃癌及癌前病变中的表达及意义》一文中研究指出目的:探讨人端粒酶催化亚单位(human telomerase catalytic subunit,hTERT)和c-myc蛋白在胃癌和胃癌前病变中的表达及意义。方法:应用免疫组织化学技术检测71例慢性胃炎和胃癌中hTERT和c-myc蛋白的表达,其中慢性胃炎伴萎缩者18例,伴肠化生者16例,伴中、重度不典型增生者16例,胃癌21例。结果:hTERT和c-myc蛋白的表达率在胃癌组织中均高于不典型增生、肠化生和萎缩性胃炎组织(P<0.05);在不典型增生组织中均显着高于肠化生、萎缩性胃炎组织(P<0.05);在肠化生组织中均显着高于萎缩性胃炎组织(P<0.05)。hTERT蛋白表达率在c-myc蛋白阳性患者中显着高于c-myc蛋白阴性患者(P<0.01)。结论:hTERT与c-myc蛋白在胃癌发生发展过程中,均可能发挥重要作用,对胃癌的发生、发展起促进作用,c-myc表达增加可能是胃黏膜上皮细胞端粒酶激活的重要机制之一。(本文来源于《现代肿瘤医学》期刊2010年02期）
王荣福,刘萌,张春丽,闫平[7]（2010）在《人端粒酶催化亚单位(hTERT)反义分子探针的制备与理化性质初步研究》一文中研究指出制备放射性核素99Tcm标记的针对人端粒酶催化亚单位(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)mRNA的反义分子探针,探讨其在体外的稳定性和相关理化性质。针对hTERT mRNA(GEN-BANK号为AF015950)的第2331~2348位核苷酸(含18个碱基),即5′-TCAAGAGCCACGTCTCTA-3′(hTERT SON),设计反义寡核苷酸序列(hTERT ASON)为5′-TAGAGACGTGGCTCTTGA-3′;对hTERTASON进行适当修饰。通过双功能螯合剂S-Acetyl NHS-MAG3进行放射性核素99Tcm标记。针对影响标记的主要因素(SnCl2用量、反应体积、反应时间等)进行条件摸索,建立最优化标记方案。纸层析法测定反义分子探针(99Tcm-hTERT ASON)的标记率和放射化学纯度,计算比活度。检测99Tcm-hTERT ASON的放射稳定性与序列稳定性,以及血清蛋白结合率。所有结果通过统计学软件SPSS12.0进行分析。室温下反应15~30 min后,99Tcm-hTERT ASON的标记率为76%±5%(n=5);在相同条件下,无双功能螯合剂作用,ASON的标记率仅为5.0%±1.6%(n=5);二者比较有显着差异(P<0.05)。99Tcm-hTERT ASON放射化学纯度达到96%以上,比活度为1 850 GBq/g。在不同条件下,99Tcm-hTERT ASON的放射化学纯度在24 h内均达到93%以上。PAGE凝胶电泳显示99Tcm-hTERT ASON在与人新鲜血清37℃孵育6 h内未发生任何降解。与人新鲜血清37℃孵育1、3和6 h后,99Tcm-hTERT ASON的血清蛋白结合率分别为15.0%±1.6%、18.0%±1.9%和20.0%±2.4%。99Tcm-hTERT ASON具有较高标记率、放射化学纯度和比活度;其放射稳定性和序列稳定性均良好,与血清蛋白结合率较低,适合作为反义显像剂用于进一步研究。(本文来源于《核化学与放射化学》期刊2010年01期）
王荣福,刘萌,张春丽,闫平,于明明[8]（2009）在《人端粒酶催化亚单位反义分子探针的药代动力学与急性毒性研究》一文中研究指出目的分析放射性核素锝[99mTc]标记的人端粒酶催化亚单位反义分子探针的药代动力学与急性毒性作用。方法制备反义分子探针(99mTc-hTERT ASON),进行体内生物分布、药代动力学以及急性毒性实验。结果99mTc-hTERT ASON标记率为(76±5)%,放射性化学纯度达96%以上,比活度为1850kBq.μg-1;主要分布在肾脏、肝脏组织;体内分布符合叁室模型;注射48h内,小鼠无不良反应与死亡。结论99mTc-hTERT ASON具有良好组织分布特点,无急性毒性作用;适合作为一种肿瘤分子显像剂应用于活体显像。(本文来源于《中国临床药理学杂志》期刊2009年05期）
王荣福,刘萌,张春丽,闫平,于明明[9]（2009）在《人端粒酶催化亚单位(hTERT)反义分子探针细胞摄取动力学与生物学性质》一文中研究指出目的:研究人端粒酶催化亚单位(hTERT)反义分子探针(99mTc-hTERT ASON)在体外靶细胞摄取动力学情况,以及特异识别靶基因的生物学性质。方法:以双功能螯合剂法,制备放射性核素99mTc标记的针对hTERT mRNA的反义分子探针(99mTc-hTERTASON)。培养hTERT表达阳性的人肝细胞癌细胞株(HepG2细胞)。观察在有/无脂质体介导下,细胞对99mTc-hTERT ASON的摄取动力学情况。阳离子脂质体介导99mTc-hTERTASON转染细胞,逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)分析其特异识别靶基因的生物学活性。结果:99mTc-hTERT ASON的标记率达到(76±5)%(n=5),放射性化学纯度达到96%,比活度为1.850×106Bq/μg。不论脂质体介导与否,99mTc-hTERT ASON在不同时相的细胞摄取率均高于对照组(P<0.05);脂质体明显提高细胞对99mTc-hTERT ASON的摄取(P<0.05);通过脂质体介导,细胞对99mTc-hTERT ASON的摄取高峰值提前至2h,并保持稳定水平至3h。RT-PCR结果显示99mTc-hTERT ASON转染细胞后,hTERT mRNA表达量明显降低。结论:脂质体在体外能有效提高99mTc-hTERT ASON的细胞摄取率。分子探针99mTc-hTERT ASON能特异识别靶基因。为进一步开展99mTc-hTERT ASON体内研究奠定了基础。(本文来源于《北京大学学报(医学版)》期刊2009年04期）
樊丽,许景伟,邹宇[10]（2008）在《人端粒酶催化亚单位(hTERT)特异性锤头状核酶真核表达载体的构建及鉴定》一文中研究指出目的设计并合成人TERT特异性的锤头状核酶(hammerhead ribozyme)基因并构建其真核表达载体。含有核酶靶基因hTERTcDNA保守序列的T载体pMD18-T-hTERT的构建。方法运用计算机软件人工设计并合成核酶基因(RZ),将核酶基因克隆到真核表达载体pcDNA 3.1(+)中,重组子由BamH I和EcoR I酶切,琼脂糖凝胶电泳鉴定及DNA测序。RT-PCR法扩增目的基因cDNA保守序列,与pMD-18进行T-A连接,重组子经菌液PCR及测序鉴定。结果RZ人工合成后与pcDNA 3.1(+)连接,酶切电泳及DNA测序证实合成的核酶基因序列正确并已被准确克隆入pcDNA 3.1(+)的BamH I和EcoR I位点之间,命名为pcDNA 3.1-RZ。220bp的hTERT基因cDNA保守序列准确克隆于pMD18-T,命名为pMD18-T-hTERT。结论成功合成hTERT特异性的锤头状核酶基因并构建了该基因的真核表达载体,以及核酶靶基因的pMD18-T-hTERT载体。(本文来源于《齐齐哈尔医学院学报》期刊2008年21期）
人端粒酶催化亚单位论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的构建人端粒酶蛋白催化亚单位(Human telomerase reverse transcriptase,hTERT)逆转录病毒真核表达质粒,并检测其在人乳腺癌相关的成纤维细胞(Cancer-associated fibroblast,CAF)中的表达及其对CAF增殖的影响。方法扩增pIRES-EGFP-hTERT质粒,酶切回收hTERT片段,正向克隆至逆转录病毒载体pBABE-puro上,构建重组质粒pBABE-puro-hTERT,转染PT67细胞,进行逆转录病毒的包装。将PT67细胞上清感染原代培养的人乳腺癌CAF,荧光定量PCR和Westernblot分别检测hTERT基因在人乳腺癌CAF中的转录和表达,流式细胞术检测细胞的增殖情况。结果重组质粒pBABE-puro-hTERT经酶切和测序证实构建正确;与未处理的人乳腺癌CAF和感染pBABE-puro的细胞相比,感染重组质粒的人乳腺癌CAF中hTERT基因mRNA的转录水平及蛋白的表达水平均明显增强,其增殖指数也明显增加(P<0.05)。结论成功构建了hTERT基因逆转录病毒真核表达质粒,其能增强人乳腺癌CAF的增殖能力,为乳腺癌微环境CAF的研究提供了良好的细胞模型。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
人端粒酶催化亚单位论文参考文献
[1].范羽,侯梅,李璐,许峰,尤嘉琮.人端粒酶催化亚单位启动子调控nm23-H1基因靶向性表达抑制肺癌转移的实验研究[C].第13届全国肺癌学术大会论文汇编.2013
[2].彭琼乐,王黎阳,赵浏阳,孙艳,柳满然.人端粒酶蛋白催化亚单位基因逆转录病毒真核表达质粒的构建及其对人乳腺癌相关成纤维细胞增殖的影响[J].中国生物制品学杂志.2012
[3].陈镇洲.构建人端粒酶催化亚单位基因慢病毒表达载体转染人骨髓基质细胞[J].中国组织工程研究.2012
[4].李燕,王谦.大肠癌围手术期血行微转移中细胞角蛋白mRNA和人端粒酶催化亚单位mRNA的表达[C].中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编.2011
[5].关劼,房青,刘芳,李红艳,徐波.胃癌前病变组织中人端粒酶催化亚单位的表达及其与幽门螺杆菌感染的关系[J].中日友好医院学报.2010
[6].滕小春,刘海峰,王国安.人端粒酶催化亚单位和c-myc蛋白在胃癌及癌前病变中的表达及意义[J].现代肿瘤医学.2010
[7].王荣福,刘萌,张春丽,闫平.人端粒酶催化亚单位(hTERT)反义分子探针的制备与理化性质初步研究[J].核化学与放射化学.2010
[8].王荣福,刘萌,张春丽,闫平,于明明.人端粒酶催化亚单位反义分子探针的药代动力学与急性毒性研究[J].中国临床药理学杂志.2009
[9].王荣福,刘萌,张春丽,闫平,于明明.人端粒酶催化亚单位(hTERT)反义分子探针细胞摄取动力学与生物学性质[J].北京大学学报(医学版).2009
[10].樊丽,许景伟,邹宇.人端粒酶催化亚单位(hTERT)特异性锤头状核酶真核表达载体的构建及鉴定[J].齐齐哈尔医学院学报.2008
论文知识图
