论文摘要
着色性干皮病F蛋白（xeroderma pigmentosum group F,XPF）和切除修复交叉互补组1蛋白（excision repair cross complementing group 1,ERCC1）组成一种结构特异性的核酸内切酶（XPFERCC1）复合物,参与DNA链间交联（interstrand crosslink,ICL）损伤修复。其中,XPF蛋白的去泛素化修饰对DNA损伤修复的影响尚未见报道。本工作主要研究泛素特异性蛋白酶15 （ubiquitinspecific protease 15,USP15）对XPF的稳定性及ICL修复的影响。本研究通过蛋白质质谱和Western印迹法分析发现,XPF蛋白与USP15存在相互作用,进而使XPF蛋白去泛素化修饰;采用CRISPR-Cas9技术构建USP15基因敲除的He La细胞株（USP15 KO）并进行Western印迹分析,结果显示,敲除组XPF蛋白水平低于对照组（P<0. 001）。克隆形成试验显示,在ICL诱导剂顺铂（cisplatin,DDP）和丝裂霉素C （mitomycin,MMC）的作用下,USP15基因敲除的HeLa细胞增殖能力显著降低（P<0. 01）。本研究表明,去泛素化酶USP15是一种重要的DNA修复调节因子,该酶通过稳定XPF蛋白促进由XPF-ERCC1介导的ICL修复。本研究为改善ICL诱导剂类抗癌药物的耐药性提供了理论依据,并为肿瘤的治疗提供了潜在的新靶点。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 耿瑞,赵美美,王嘉东
关键词: 泛素特异性蛋白酶,核酸内切酶,去泛素化修饰,链间交联损伤
来源: 中国生物化学与分子生物学报 2019年05期
年度: 2019
分类: 基础科学,医药卫生科技
专业: 生物学
单位: 北京大学基础医学院放射医学教研室
基金: 国家自然科学基金(No.81472906,No.81672981),重大慢性非传染性疾病防控研究专项基金(No.2016YFC1302101),蛋白质机器与生命过程调控专项基金(No.2017YFA0503900)资助~~
分类号: Q75
DOI: 10.13865/j.cnki.cjbmb.2019.05.07
页码: 509-516
总页数: 8
文件大小: 301K
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标签：泛素特异性蛋白酶论文; 核酸内切酶论文; 去泛素化修饰论文; 链间交联损伤论文;