3种病原菌多重IMS-荧光RPA检测体系的建立及初步应用

论文摘要

建立一种同时检测沙门氏菌、大肠杆菌O157:H7和布氏杆菌的快速、灵敏、高通量的检测方法。利用特异性免疫磁珠,在37℃条件下从200 mL样液体系中循环捕获目标致病菌。磁珠液提取DNA后,对3种病原菌进行多重IMS-荧光RPA检测。结果表明:针对沙门氏菌、大肠杆菌O157:H7和布氏杆菌的检测限分别达到3.0、4.5和8.7 CFU/mL。使用新建多重IMS-荧光RPA方法对人工感染60份皮张、毛皮纺织品DNA样本进行扩增,结果显示与预期结果一致;对60份公共场所收集的皮张、毛皮、纺织品DNA样本进行扩增,结果显示有2个样本沙门氏菌阳性、1个样本大肠杆菌O157:H7阳性,3份阳性样品送测序,测序结果与GenBank检索沙门氏菌、大肠杆菌O157:H7 DNA序列一致。得出结论:建立的多重IMS-荧光RPA检测体系灵敏度、特异性、准确度符合要求,能够在2 h内完成对3种病原菌检测,可以作为快速应对此三类病原菌安全突发事件的检测手段。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 李轲,郭华麟,禹建鹰,张淑霞,连素梅,徐超,韩国全,郭会清

关键词: 免疫磁珠分离,荧光,沙门氏菌,大肠杆菌,布氏杆菌

来源: 畜牧与兽医 2019年03期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 郑州海关,四川农业大学,石家庄海关

基金: 2018年度河南省科技攻关项目(182102210226),2017年度质检总局科技计划项目(2017IK289),2016年度国家质检总局科技计划项目(2016IK114)

分类号: S852.61

页码: 106-112

总页数: 7

文件大小: 1526K

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