酶谱分析论文_沈有期,苏丹,刘露晖,黄世英,陈新妹

导读:本文包含了酶谱分析论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:黄芩,蛋白酶,阴道炎,低温,鉴定,芽孢,涂片。

酶谱分析论文文献综述

沈有期,苏丹,刘露晖,黄世英,陈新妹[1](2016)在《预成酶谱分析和涂片染色多功能检查在妇科感染诊治中的临床应用价值》一文中研究指出目的研究基于预成酶谱分析和涂片染色多功能检查的阴道菌群多维度评价方法在妇科感染诊治中的临床应用价值。方法选取到该院做妇科白带检查的21 175例患者作为研究对象,同一患者均同时采集白带标本做生化检查和涂片染色检查,生化检查采用新型预成酶谱分析技术检测,涂片染色多项检查采用妇科白带涂片多功能染色液染色镜检。结果预成酶谱生化五项阳性检出率:过氧化氢(H2O2)63.83%、唾液酸苷酶(SNa)7.73%、白细胞酯酶(LE)46.16%、β-葡萄糖醛酸苷酶(GUS)3.19%、凝固酶(GADP)46.16%;涂片染色多项检查的各项检出率:滴虫0.63%、念珠菌11.73%、淋球菌0.29%、纤毛菌2.63%、球菌1.82%、条件致病小杆菌17.00%、加特纳球杆菌24.89%、线索细胞17.18%、癌细胞0.23%、阴道清洁度Ⅲ~Ⅳ20.72%。结论联合妇科白带预成酶谱分析与涂片染色多功能检查可在短时间内检出女性常见下生殖道感染、宫颈炎、宫颈癌等异常情况,为全面诊断和治疗妇科疾病提供可靠依据,在大型妇科普查和癌症筛查方面具有重要的临床价值,尤其值得在基层医院推广应用。(本文来源于《中国妇幼保健》期刊2016年17期)

崔秀秀[2](2016)在《一株耐冷细菌产低温纤维素酶发酵条件优化及其活性酶谱分析》一文中研究指出低温纤维素酶较常温纤维素酶作用温度低20-30℃,这在我国冷凉期较长的北方地区有着极大优势。内切β-葡聚糖酶(CMCase)是纤维素酶系的关键组分。本文通过较为系统地对一株耐冷细菌(HQ)产低温CMCase的发酵条件优化及其活性酶谱分析,为其在实际工作中的应用提供理论依据。获得的主要成果如下:(1)通过分别测定HQ细胞培养液和超声细胞破碎液的CMCase酶活,确定HQ所产CMCase主要分泌在胞外。(2)通过16S rDNA序列测定及GenBank序列相似性分析,参照《伯杰氏细菌鉴定手册》第八版,结合生理生化特性,确定HQ为枯草芽孢杆菌亚种(Bacillus subtilis subsp.)。(3)以CMC-Na为底物进行CMCase酶学特性研究,结果表明:酶促反应最适作用温度为30℃,在30-50℃内有较高酶活;最适pH为5.0,在pH 3.0-5.0之间酶有较高稳定性;Mn2+和Cu2+能够显着提高CMCase酶活力,Zn2+、Mg2+和Fe3+对CMCase活性有较明显抑制。(4)以CMCase酶活为指标,运用P-B方法和响应面分析法(RSM)优化HQ产CMCase的发酵条件为:培养基碳源为CMC-Na 30.0 g·L-1,氮源为1:1牛肉膏-蛋白胨40.0 g·L-1;促进因子为吐温-800.11%;初始pH 5.35,温度40"C,接种量6.42%,在最适条件下摇瓶培养,4 d时CMCase酶活可达32.5 U·mL-1,较优化前提高了2.96倍。(5)以SDS-PAGE检测粗酶液,获得大约14种蛋白;运用CMC-Native PAGE检验CMCase活性,电泳胶板上显现3条活性带,表明由HQ所产低温纤维素酶中含3种具有CMCase活性的酶组分,进一步采用DEAE-Cellulose 52离子交换柱层析分离纯化,获得2个明显的CMCase活性峰,表明由HQ所产低温纤维素酶系至少含2种CMCase同工酶。(本文来源于《沈阳农业大学》期刊2016-06-12)

刘丽杰,林立东,张东向[3](2015)在《黄芩单细胞克隆愈伤组织酯酶同工酶及过氧化物同工酶酶谱分析》一文中研究指出以黄芩单细胞克隆愈伤组织为试材,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)法,通过分析酯酶同工酶(EST)和过氧化物同工酶(POD)的酶带,研究黄芩单细胞克隆愈伤组织与亲本愈伤组织的遗传特性与品系差异。结果表明:黄芩不同品系单细胞克隆愈伤组织EST谱带间具3个带区特征,最多谱带数品系为4条,最少谱带数品系为3条,其中1号、2号、3号谱带为黄芩单细胞克隆愈伤组织的特征谱带;POD谱带间具4个带区特征,其中1号、3号和7号酶带为特征谱带,EST和POD谱带的有无、宽窄、颜色深浅,相对迁移率大小均不尽相同。黄芩单细胞克隆愈伤组织与亲本细胞愈伤组织既具有亲缘特征又具有品系差异,以期为单细胞克隆品系的遗传特性和品系鉴别提供理论参考。(本文来源于《北方园艺》期刊2015年07期)

赵静,张东向,焦战战,张令昂,毕宇[4](2014)在《中药黄芩的悬浮培养及过氧化物同工酶酶谱分析》一文中研究指出以黄芩悬浮细胞为实验材料,研究黄芩悬浮培养过程中悬浮培养液pH值、电导率值、蔗糖质量分数,并对不同培养时间测定过氧化物同工酶酶谱进行分析,确定次生代谢产物黄芩苷与培养液及同工酶的关系.结果表明,在黄芩悬浮培养周期中,过氧化物酶酶谱变化与次生代谢产物黄芩苷的积累呈正相关,黄芩悬浮培养14 d过氧化物酶活性最强,黄芩悬浮培养第15天时,黄芩苷质量浓度最高.悬浮培养液pH值、电导率值、蔗糖质量分数随黄芩苷累积均有相应变化.(本文来源于《高师理科学刊》期刊2014年05期)

王晓辉,赵勇,赵小明,尹恒,杜昱光[5](2014)在《海洋低温几丁质酶菌株筛选、鉴定及酶谱分析》一文中研究指出以胶体几丁质为唯一碳源,从大连渤海湾的底泥样品中分离到1株高产低温几丁质酶的海洋细菌,命名为DL-06。由菌株的形态特征结合16SrDNA系统发育分析,初步确定该菌株属于交替假单胞菌(Pseudoalteromonas sp.DL-06)。该菌株经30h摇瓶发酵后测定粗酶液几丁质酶酶活为9.184U/mL,最适反应温度为15℃,60℃孵育1h仍保持50%以上的酶活性,表明该低温酶具有一定热稳定性。经SDSPAGE及酶谱分析,该菌株能够产生至少3种以上不同分子质量的几丁质酶组分。Pseudoalteromonas sp.DL-06产几丁质酶在低温下高活性与热稳定特点,使其具有潜在的工业应用价值。(本文来源于《西北农业学报》期刊2014年09期)

王晓辉,赵勇,赵小明,尹恒,杜昱光[6](2014)在《海洋低温几丁质酶菌株筛选、鉴定及酶谱分析》一文中研究指出以胶体几丁质为唯一碳源,从大连渤海湾的底泥样品中分离到1株高产低温几丁质酶的海洋细菌,命名为DL-06,根据菌株的形态特征、生理生化特征和16S rDNA序列,确定该菌株为交替假单胞菌(Pseudoalteromonas sp.DL-06)。该菌株经30h摇瓶发酵后测定粗酶液几丁质酶酶活为9.184 U/mL,最适反应温度为15℃,60℃仍保持50%以上的酶活性,表明该低温酶具有一定热稳定性。经SDS-PAGE及酶谱分析,该菌株能够产生至少3种以上不同分子量的几丁质酶组分。Pseudoalteromonas sp.DL-06产几丁质酶在低温下高活性与一定热稳定特点,使其具有潜在的工业应用价值。(本文来源于《全国第九届海洋生物技术与创新药物学术会议论文摘要集》期刊2014-08-06)

徐爱兰,朱林江,李永仙,王金晶,李崎[7](2014)在《淀粉液化芽孢杆菌BS5582产蛋白酶的酶谱分析与鉴定》一文中研究指出本研究对淀粉液化芽孢杆菌BS5582分泌的蛋白酶进行快速分析与鉴定。测定菌株胞外蛋白酶酶活,结果显示蛋白酶在中性条件下活力最高,且在发酵过程中出现叁个酶活高峰,表明菌株可能分泌多种蛋白酶。蛋白酶酶谱分析发现共有五条蛋白水解条带。通过质谱鉴定这些水解条带对应非变性-SDS-PAGE凝胶上的蛋白条带,表明该菌株可能产Bacillopeptidase F、胞外中性金属蛋白酶和枯草杆菌蛋白酶Bpn'这叁种蛋白酶,其中Bacillopeptidase F和胞外中性金属蛋白酶存在两种形式。结果显示酶谱分析法结合质谱鉴定能快速鉴定菌株BS5582分泌的胞外蛋白酶的多种复杂形式,是一种快速鉴定多种蛋白酶的有效方法。(本文来源于《食品工业科技》期刊2014年03期)

黄晓蕾[8](2013)在《耐冷菌Pseudomonas sp.W7所产低温蛋白酶的酶谱分析及基因克隆》一文中研究指出低温蛋白酶作用温度越低,催化效率越高,使其在工业和生活上得到了广泛的应用。但由于热不稳定性等限制条件,使得低温蛋白酶在应用方面受到了诸多限制。因此,越来越多的研究者们利用分子生物学技术及基因克隆等手段,通过异源表达来提高低温蛋白酶的产量,为低温蛋白酶的应用奠定了基础。本实验室筛选出来一株高产低温蛋白酶的耐冷菌Pseudomonas sp.W7,经过前期酶学性质分析发现,该菌株所产的低温蛋白酶在35℃时拥有较高酶活,可达193.2U·mL-1。且温度超过40℃后,酶活力急剧下降。本实验采用了两种途径克隆耐冷菌Pseudomonas sp.W7所产低温蛋白酶的基因序列。耐冷菌Pseudomonassp.W7经前期鉴定,确定属于假单胞菌属,我们首先依据NCBI数据库中假单胞菌属所产的胞外低温蛋白酶的同源保守区域序列设计引物,以耐冷菌Pseudomonassp.W7基因组DNA为模板,经PCR扩增,获得低温蛋白酶的基因序列。另外,我们还从Pseudomonas sp.W7所产低温蛋白酶出发,通过质谱分析获得了该酶匹配肽段氨基酸序列,并依此设计引物克隆到耐冷菌Pseudomonas sp.W7所产低温蛋白酶的基因序列。我们将对两种方式得到的基因序列进行比对并进行了生物信息学分析。利用假单胞菌属所产的胞外低温蛋白酶的同源保守序列设计引物,以耐冷菌Pseudomonas sp.W7基因组DNA为模板,PCR扩增出5’端长度为1238bp的序列和3’端长度为652bp的序列,拼接后找出完整的开放阅读框,其全长1719bp。该序列编码573个氨基酸,理论分子量为63639Da。通过NCBI比对发现该序列和Pseudomonas fluorescens A506所产的C13家族的肽酶的同源性高达到99%。,而且由氨基酸的组成成分来看,该序列脯氨酸的含量低而甘氨酸的含量高,且丝氨酸、缬氨酸等小分子量氨基酸的含量也很高,这说明该蛋白序列符合低温酶的低温特性。通过生物信息学的分析,该序列上还含有4个N-糖基化位点,N端还有19个氨基酸残基的碎片,二级结构中α螺旋占22.95%,β折叠占19.01%。在15℃、20℃和25℃下分别培养耐冷菌Pseudomonas sp.W7,对发酵液上清进行酶谱分析发现,该菌株在15℃下只产一种低温蛋白酶P1,酶活力为62.6U·mL~(-1),而在20℃和25℃下产两种低温蛋白酶P1和P2,酶活力为193.2U·mL~(-1)和134.0U·mL~(-1)。我们选择了酶活力较高的蛋白酶P2条带进行质谱鉴定,质谱结果由MASCOT检索比对得知,没有找到与低温蛋白酶完全匹配的蛋白,匹配率最高的蛋白的分数为84,推测该低温蛋白酶是一种新蛋白。与低温蛋白酶匹配度最高的蛋白为原肠胚锌指蛋白(RecName: Full=Gastrula zinc finger proteinXlCGF28.1)。该蛋白由252个氨基酸组成,其中与目的蛋白酶有12个肽段匹配。利用匹配的肽段设计引物,以耐冷菌Pseudomonas sp.W7基因组DNA为模板进行PCR扩增,获得了长为1798bp的序列,分析后发现其中含有1238bp的5’端序列。同理设计引物,PCR扩增出3’端长为678bp的序列,将两段序列拼接并通过PCR验证得到完整的ORF,全长为1737bp的序列。该序列编码578个氨基酸,理论分子量为63821Da。对以上序列在NCBI中进行同源性比对分析发现,该序列与原肠胚锌指蛋白的同源性只有43%,结合质谱分析结果推测该低温蛋白酶是一种新蛋白。分析该序列的氨基酸组成发现,序列中甘氨酸含量很高,且一些小分子量氨基酸的含量也很高。这说明此蛋白序列具有低温酶的低温特性。通过生物信息学分析发现,该序列含有3个N-糖基化位点,但不含有信号肽序列,在二级结构中α螺旋占32.01%,β转角占7.44%。通过两种方法获得的两条低温蛋白酶基因序列经过比对,它们的同源性仅为15.03%,说明这完全是两条不同的蛋白,只是由于分子量相差很小,因此酶谱分析中并没有显示。结合生物信息学的分析及获得基因序列来看,初步推测耐冷菌Pseudomonas sp.W7至少产两种低温蛋白酶,需要后续的功能验证来确认。(本文来源于《黑龙江大学》期刊2013-05-20)

周朝阳[9](2012)在《预成酶谱分析技术诊断女性需氧菌阴道炎的临床价值》一文中研究指出目的:探讨预成酶谱分析技术在女性需氧菌阴道炎(AV)诊断中的临床价值。方法:采用Donders湿片镜检法和预成酶谱分析技术分别对300例疑似AV患者的阴道分泌物进行检测分析。结果:300例就诊患者,使用Donders湿片镜检法检出AV患者181例,预成酶谱分析技术检出AV患者178例,两种方法检出AV阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。以Donders湿片镜检法为诊断标准,预成酶谱分析技术诊断AV的敏感性为94.9%(169/178)、特异性为90.2%(110/119),二者的符合率为93.0%(279/300)。结论:预成酶谱分析技术诊断AV具有很好的敏感度和特异度,与Donders湿片镜检法符合率高,且该方法操作简便、反应快速,值得妇科门诊及社区医院使用。(本文来源于《中国妇幼保健》期刊2012年36期)

李小龙,陈新元,王薇薇,黄小芳,王赛芳[10](2012)在《阴道分泌物ABV酶谱分析对需氧菌阴道炎和细菌性阴道病诊断的临床研究》一文中研究指出目的探讨阴道分泌物ABV酶谱分析在需氧菌阴道炎和细菌性阴道病诊断的临床价值。方法选取阴道感染患者及妇科体检健康者各1000例,分别采取阴道分泌物进行ABV酶谱分析和显微镜镜检,用卡方检验比较两种方法对阴道感染患者组BV检测的结果。结果 ABV法检出BV阳性率0.213,显微镜法检出BV阳性率0.166,ABV酶谱法阳性检出率比显微镜法高,经卡方检验,两方法检出率差异有显着性意义(x~2=25.39,p<0.05)。结论阴道分泌物ABV酶谱法较显微镜镜检法检出率高,灵敏度高,简便又快速,与镜检法结合下,实现了快速筛查、诊断AV、BV、混合感染和其他阴道炎症。(本文来源于《2012年浙江省检验医学学术年会论文集》期刊2012-08-16)

酶谱分析论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

低温纤维素酶较常温纤维素酶作用温度低20-30℃,这在我国冷凉期较长的北方地区有着极大优势。内切β-葡聚糖酶(CMCase)是纤维素酶系的关键组分。本文通过较为系统地对一株耐冷细菌(HQ)产低温CMCase的发酵条件优化及其活性酶谱分析,为其在实际工作中的应用提供理论依据。获得的主要成果如下:(1)通过分别测定HQ细胞培养液和超声细胞破碎液的CMCase酶活,确定HQ所产CMCase主要分泌在胞外。(2)通过16S rDNA序列测定及GenBank序列相似性分析,参照《伯杰氏细菌鉴定手册》第八版,结合生理生化特性,确定HQ为枯草芽孢杆菌亚种(Bacillus subtilis subsp.)。(3)以CMC-Na为底物进行CMCase酶学特性研究,结果表明:酶促反应最适作用温度为30℃,在30-50℃内有较高酶活;最适pH为5.0,在pH 3.0-5.0之间酶有较高稳定性;Mn2+和Cu2+能够显着提高CMCase酶活力,Zn2+、Mg2+和Fe3+对CMCase活性有较明显抑制。(4)以CMCase酶活为指标,运用P-B方法和响应面分析法(RSM)优化HQ产CMCase的发酵条件为:培养基碳源为CMC-Na 30.0 g·L-1,氮源为1:1牛肉膏-蛋白胨40.0 g·L-1;促进因子为吐温-800.11%;初始pH 5.35,温度40"C,接种量6.42%,在最适条件下摇瓶培养,4 d时CMCase酶活可达32.5 U·mL-1,较优化前提高了2.96倍。(5)以SDS-PAGE检测粗酶液,获得大约14种蛋白;运用CMC-Native PAGE检验CMCase活性,电泳胶板上显现3条活性带,表明由HQ所产低温纤维素酶中含3种具有CMCase活性的酶组分,进一步采用DEAE-Cellulose 52离子交换柱层析分离纯化,获得2个明显的CMCase活性峰,表明由HQ所产低温纤维素酶系至少含2种CMCase同工酶。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

酶谱分析论文参考文献

[1].沈有期,苏丹,刘露晖,黄世英,陈新妹.预成酶谱分析和涂片染色多功能检查在妇科感染诊治中的临床应用价值[J].中国妇幼保健.2016

[2].崔秀秀.一株耐冷细菌产低温纤维素酶发酵条件优化及其活性酶谱分析[D].沈阳农业大学.2016

[3].刘丽杰,林立东,张东向.黄芩单细胞克隆愈伤组织酯酶同工酶及过氧化物同工酶酶谱分析[J].北方园艺.2015

[4].赵静,张东向,焦战战,张令昂,毕宇.中药黄芩的悬浮培养及过氧化物同工酶酶谱分析[J].高师理科学刊.2014

[5].王晓辉,赵勇,赵小明,尹恒,杜昱光.海洋低温几丁质酶菌株筛选、鉴定及酶谱分析[J].西北农业学报.2014

[6].王晓辉,赵勇,赵小明,尹恒,杜昱光.海洋低温几丁质酶菌株筛选、鉴定及酶谱分析[C].全国第九届海洋生物技术与创新药物学术会议论文摘要集.2014

[7].徐爱兰,朱林江,李永仙,王金晶,李崎.淀粉液化芽孢杆菌BS5582产蛋白酶的酶谱分析与鉴定[J].食品工业科技.2014

[8].黄晓蕾.耐冷菌Pseudomonassp.W7所产低温蛋白酶的酶谱分析及基因克隆[D].黑龙江大学.2013

[9].周朝阳.预成酶谱分析技术诊断女性需氧菌阴道炎的临床价值[J].中国妇幼保健.2012

[10].李小龙,陈新元,王薇薇,黄小芳,王赛芳.阴道分泌物ABV酶谱分析对需氧菌阴道炎和细菌性阴道病诊断的临床研究[C].2012年浙江省检验医学学术年会论文集.2012

论文知识图

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