多能性论文_陈兴

导读:本文包含了多能性论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:干细胞,胚胎,小鼠,体外,山羊,诱导,进展。

多能性论文文献综述

陈兴^[1]（2019）在《O-GlcNAc糖基化对胚胎干细胞多能性维持的调控作用（英文）》一文中研究指出O-GlcNAc(O-linked N-acetylglucosamine)modification is a non-canonical form of protein glycosylation,which occurs intracellular and is dynamically regulated.Our lab has developed chemical labeling methods that allow quantitative profiling of O-GlcNAcylated proteins and the modification sites.Recently,by applying chemical profiling for probing O-GlcNAcylation of pluripotency transcription factors in mouse(本文来源于《中国生物化学与分子生物学会2019年全国学术会议暨学会成立四十周年论文集》期刊2019-10-24）

陈凌懿,刘林^[2]（2019）在《异染色质在多能性维持中的作用和调控机制》一文中研究指出多能干细胞(pluripotent stem cell, PSC),包括胚胎干细胞(embryonic stem cell, ESC)和诱导多能性干细胞(induced pluripotent stem cell, iPSC),具有无限自我更新及分化成体内所有类型细胞的潜能,因此,在再生医学中有着重要的临床应用前景.独特的异染色质及其组蛋白修饰对于PSC的多能性、快速增殖、命运决定和基因组稳定性起重要作用.本文总结了近年来发现的异染色质在维持多能性和基因组稳定性中的作用和机制,以及PSC如何维持其特有的异染色质状态.(本文来源于《中国科学:生命科学》期刊2019年09期）

蒋雪梅,顿耀艳^[3]（2019）在《HER2信号通路与干细胞多能性分子网络的研究进展》一文中研究指出乳腺癌的临床和分子亚型存在人类表皮生长因子受体2(HER2)蛋白的表达或扩增[从人类染色体17q上的酪氨酸激酶受体2(ERBB2)基因转录而来],并具有靶向性。在所有乳腺癌中,HER2阳性亚型占15%～20%,这一亚型与侵袭性的生物学特性有关,靶向抑制HER2受体的治疗反应良好~([1]),但不完全一致。在大多数乳腺癌亚型肿瘤中,肿瘤细胞对HER2有依赖性,阻断HER2信号通路对肿瘤的建立和维持(本文来源于《现代医药卫生》期刊2019年17期）

杨艺^[4]（2019）在《Dmrt1对ESC多能性状态调控的机制研究》一文中研究指出前期研究中,我们利用CRISPR-Cas9敲除文库在LIF/FBS培养条件下筛选到Nanog-GFP～(low)/GFP～(high)的sgRNA中发现Dmrt1的表达明显增加,提示Dmrt1的缺失影响到了Nanog的表达,而Nanog是胚胎干细胞自我更新非常重要的核心调控基因,调控着ESC多能性状态。为此,我们利用CRISPR-Cas9敲除技术研究Dmrt1是否通过对Nanog的调控参与了胚胎干细胞多能性状态的调控及其机制。主要内容为:(1)分析Dmrt1(本文来源于《中国解剖学会2019年年会论文文摘汇编》期刊2019-08-18）

刘高科,何建荣,阮艳,张俊磊,王嘉丽^[5]（2019）在《Dax1剪接体在小鼠胚胎干细胞多能性维持中的作用研究》一文中研究指出可变剪接体是真核细胞调节基因表达和产生蛋白质组多样性的重要方式。孤核受体Dax1是维持小鼠胚胎干细胞(mESC)自我更新和多能性稳态的关键转录抑制因子。但是,mESC中Dax1的剪接体的表达形式和功能均不清楚。我们利用cDNA末端快速扩增法,以mESC及其分化细胞中的cDNA为模板,对Dax1剪接体的表达谱进行分析,发现Dax1在mESC中存在至少6个可以正常编(本文来源于《中国解剖学会2019年年会论文文摘汇编》期刊2019-08-18）

卢电,谢英俊,孙筱放^[6]（2019）在《诱导多能性干细胞重编程方法及应用研究进展》一文中研究指出干细胞研究是再生医学中最具潜力的研究领域之一。诱导多能性干细胞(iPSC)不仅成功避开了胚胎干细胞的伦理问题,同时也解决了干细胞来源受限的问题,为再生医学的发展带来了新的机遇。本文在回顾人iPSC技术革新的基础上,对近年来iPSC重编程方法及国内外临床应用的现状进行综述,为探讨建立该技术相关的临床医学新模式提供理论基础。(本文来源于《实用医学杂志》期刊2019年11期）

王聪^[7]（2019）在《LncRNA Oeblr20通过Oct4 eRNA通路调控干细胞多能性和重编程的作用及机制研究》一文中研究指出研究背景:多能性干细胞(pluripotent stem cells,PSCs)因其无限的自我更新及向叁个胚层分化的多能性,在发育生物学及再生医学中拥有巨大的应用潜能。PSCs包括由哺乳动物囊胚中的内细胞团分离而来的胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)及由体细胞过表达Oct4 Sox2,Klf-4,c-Myc(OSKM)四种转录因子重编程而产生的诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)。其中iPSCs来源于自体体细胞,回避了 ESCs应用时的伦理争议,且避免了异体移植产生的免疫排异,因此应用前景更广。然而,目前的重编程体系存在效率低、耗时长的瓶颈,阻碍了 iPSCs在再生医学中的应用。近期的研究发现长链非编码RNA(lnon-coding RNA,lncRNA)在重编程及多能性的维持上可能具有重要的调控作用。lncRNAs的长度一般超过200个核苷酸,此类RNAs虽然不编码蛋白质,但以其独特的方式在多种层面上调控基因的表达,包括转录层面、转录后层面及蛋白质层面等等。通常,物种越复杂,lncRNAs的种类越繁多,且lncRNAs常常具有较强的组织、细胞特异性。因此,提示lncRNAs在细胞命运决定上具有重要作用,如干细胞多能性维持、细胞分化及重编程等。深入揭示lncRNAs的作用机制,对于探索决定细胞命运的关键因素,形成高效稳定的诱导体系具有十分重要的理论意义和应用价值。为寻找具有多能性潜能的lncRNA,本研究前期通过比较Fib及iPSCs RNA-Seq数据,筛选出iPSCs中高表达的lncRNA。再通过RNA原位逆转录捕获测序技术(RNA reverse transcription-associated trap sequencing,RAT-seq),进一步从中挑选出与多能性基因调控区结合的具有调控潜能的lncRNA。研究者应用该方法筛选出一条位于17号染色体的全新lncRNA,RNA-Seq示它在iPSCs中高表达,RAT-Seq示它富集在多能性基因Oct4增强子区域,故将其命名为Oct4 enhancer binding lncRNA 20,简称Oeblr20。因此,本研究需要进一步深入探讨具有多能性潜能的lncRNAs Oeblr20是否可调控多能性并促进重编程,更重要的是揭示其具体的调控机制。研究目的:1.明确lncRNA Oeblr20差异性表达的特点、亚细胞定位及全长序列信息。2.探讨lncRNA Oeblr20调控干细胞多能性及促进重编程的作用。3.揭示lncRNA Oeblr20结合Oct4增强子后通过eRNA通路发挥作用的分子机制。研究方法:1.应用RT-PCR明确lncRNA Oeblr20在不同细胞及组织中的表达差异,RNA-FISH明确它的亚细胞定位,cDNA末端快速扩增技术(rapid-amplification of cDNA ends,RACE)获得它的全长信息。2.合成shRNA敲低质粒,转染iPSCs后观察lncRNA Oeblr20表达水平降低对多能性基因表达的影响。3.合成过表达质粒,转染体细胞Fib后观察]ncRNA Oeblr20表达水平上调对多能性基因表达的影响。4.将Oeblr20过表达及对照质粒转染DOX-OSKM-MEFs,诱导完成重编程,观察lncRNA Oeblr20对重编程效率及多能性的影响。5.应用RAT-Seq、DNA-RNA FISH及Luciferase双荧光素酶报告系统明确Oct4增强子为lncRNA Oeblr20的作用靶点。6.通过RT-qPCR明确过表达及敲低lncRNA Oeblr20影响Oct4增强子RNA的表达水平。7.通过甲基化水平检测明确lncRNA Oeblr20对Oct4增强子区域DNA甲基化水平的影响。8.应用ChIP及RIP方法确定lncRNA Oeblr20、Oct4及去甲基化酶之间的互相作用。研究结果:1.通过RNA-Seq及RAT-Seq筛选出具有多能性潜能的lncRNA Oeblr20,RNA-Seq提示它在iPSCs中高表达而在Fib中不表达;RAT-Seq提示它与关键多能性基因Oct4的增强子区域结合。2.RNA-FISH提示Oeblr20位于细胞核内;差异性表达实验提示它的表达水平与干细胞多能性密切相关,Oeblr20在Fib及未编程成功的URC细胞中几乎不表达,然而一旦重编程为iPSCs,它的表达水平明显增加;而且lncRNAOeblr20在分化为终末脏器的组织中并不表达。3.LncRNA Oeblr20对干细胞多能性的维持至关重要,在敲低实验中,当敲低Oeblr20的表达水平时,关键性多能性基因的表达水平均下降,且iPSCs发生分化,NANOG免疫荧光染色为阴性,细胞难以维持多能性。4.LncRNAOeblr20可促进多能性基因Oct4的表达,在过表达实验中,当在Fib中过表达Oeblr20后,Oct4的表达水平也提高了 3倍左右。5.LncRNA Oeblr20可提高重编程效率,在DOX-OSKM-MEFs体系中过表达Oeblr20可提高iPSCs的诱导效率及iPSCs的多能性。6.Oct4是Oeblr20的作用靶点,尤其是Oct4的增强子区域。前期的RAT-seq已明确lncRNA Oeblr20可结合Oct4的增强子区域;随后我们在iPSCs及过表达了Oeblr20的Fib中进行Oeblr20ncRNA-Oct4 DNA FISH发现两者在空间上毗邻;最后Luciferase双荧光素酶报告系统也证实lncRNA Oeblr20可提高Oct4增强子的活性。7.LncRNA Oeblr20通过促进OctDNA区域去甲基化而激活OcteRNA表达:功能实验中,当Oeblr20敲低后Oct4 eRNA水平明显下调,而Oeblr20过表达后Oct4 eRNA水平随之升高,提示lncRNA Oeblr20可直接影响Oct4 eRNA的表达水平。且通过DNA甲基化水平检测发现外源性过表达Oeblr20时,Oct4增强子区域DNA甲基化水平明显下降。8.LncRNA Oeblr20招募TET2到Oc4增强子区域:用抗TET1、抗TET2及IgG对照抗体进行ChIP实验发现在Oeblr20过表达的Fib中TET2可结合于Oct4的增强子区域。而且随后的RIP实验提示TET2主要与Oeblr20的3'端及5'端结合。提示lncRNA Oeblr20可能通过招募TET2到Oct4增强子区域,促进DNA去甲基化而调控eRNA表达。研究结论:1.lncRNA Oeblr20位于细胞核内,在iPSCs及ESC中高表达,在Fib、未编程成功的细胞及分化的组织器官中不表达或表达量极低,其表达水平与其他关键多能性基因呈正相关。2.lncRNA Oeblr20对多能性的维持至关重要,敲低Oeblr20后iPSCs发生分化难以维持多能性,且关键多能性基因表达随之下调。3.lncRNA Oeblr20可促进体细胞Fib多能性基因Oct4的表达,提高OSKM重编程体系的诱导效率,并提高iPSCs的多能性。4.RAT-Seq、RNA-DNA FISH 及 Luciferase 实验均证实 Oct4 为 lncRNA Oeblr20的作用靶点。Oeblr20可提高Oct4增强子的活性,促进Oct4 eRNA的表达。5.lncRNA Oeblr20可招募TET2去甲基化酶,促进Oct4增强子区域DNA去甲基化,从而促进Oct4eRNA表达。(本文来源于《吉林大学》期刊2019-06-05）

孟庆丽^[8]（2019）在《Activin A和BMP4单独添加对小鼠胚胎干细胞多能性的影响》一文中研究指出自从1981年首次由小鼠囊胚建立胚胎干细胞系(Embryonic Stem Cells,ESCs)以来,人们不断的探索其体外培养条件,试图用化学成分明确的培养基来替代原始的饲养层上皮细胞和胎牛血清的培养基。经过近30年的努力,研究者发现Mek1/2和GSK3b通路的抑制剂(PD和CH:2i)和白血病抑制因子(LIF)的共同使用,可以成功获得一种化学成分明确的培养基(2i/LIF)使小鼠ESCs维持类似囊胚内细胞团(Inner Cell Mess,ICM)的na?ve多能性状态。然而在2017年《Nature》发表的两篇论文指出,用2i/LIF长期培养小鼠ESCs会使它产生不可逆的表观遗传改变和基因组不稳定性,主要原因是Mek1/2的抑制剂PD对小鼠ESCs的多能性发育有阻滞作用。本实验首先将2i/LIF培养液中的PD分别替换为Activin A和BMP4,对2i/LIF-ESCs进行体外培养,诱导得到的细胞系依次命名为ACL-ESCs和BCL-ESCs。其次,研究ACL-ESCs和BCL-ESC的干细胞特征,基因表达模式和体内发育潜能等,具体实验结果如下:(1)在形态学特征上ACL-ESCs和BCL-ESCs与2i/LIF-ESCs细胞形态基本相同;由△PE-Oct4激活表达的绿色荧光蛋白(GOF/GFP)一直存在,说明在ACL-ESCs和BCL-ESCs培养体系中,Oct4远端启动子依然处于被激活的状态;碱性磷酸酶染色结果显示ACL-ESCs和BCL-ESCs均呈较强碱性磷酸酶活性。但是ACL-ESCs和BCL-ESCs的细胞增殖速度与2i/LIF-ESCs存在一定差异。(2)在ACL-ESCs和BCL-ESCs中Oct4、Sox2和Klf4等多能性相关基因的表达均与2i/LIF-ESCs无显着差异;而与2i/LIF-ESCs相比,BCL-ESCs细胞的DNA甲基化相关基因Dnmt3b和Dnmt3l和中胚层相关基因Hand1,Evx1,Eomes和T的表达量均显着提高。更值得注意的是Myc的表达量与对照组细胞相比较,诱导后得到的两种细胞系中均显着上调。(3)从RNA测序结果可以看出,在2i/LIF-ESCs中高表达的基因与骨骼系统发育、脊椎动物胚胎发育和感觉器官发育等相关;在ACL-ESCs中高表达的基因与有机羟基化合物代谢过程,无机分子实体跨膜转运蛋白活性及无机离子稳态调控等代谢过程相关;在BCL-ESCs中高表达的基因主要与组织形态发生,生殖结构发育以及胚胎形态发生等有关。说明ACL-ESCs和BCL-ESCs具有独特的基因表达模式。(4)体内发育潜能检测结果显示,在受精后第10天(E10.5)的小鼠嵌合胚胎中ACL-ESCs和BCL-ESCs单个细胞均可贡献到胚胎及部分胚外组织中;而2i/LIF-ESCs不能贡献到胚胎外组织。表明本实验获得的两种细胞系的体内发育潜能比对照组更高。综上所述,本实验结果表明,用Activin A或BMP4替代2i/LIF培养液中的PD可使小鼠ESCs维持干细胞特征,并分别具有独特的基因表达模式,对小鼠ESCs的多能性具有一定的扩展潜能。我们推测这个培养系统对研究早期胚胎发育和小鼠胚胎干细胞的研究提供了新的途径。(本文来源于《内蒙古大学》期刊2019-06-05）

汪若凤,郭永洪,田勤,段维鸽^[9]（2019）在《多能性胚胎干细胞与DNA甲基化的关系》一文中研究指出胚胎干细胞是一种能够维持自我更新、具有无限扩增能力的多能性干细胞。灵长类多能干细胞(iPSCs)根据其发育能力、细胞形态、基因表达谱以及表观遗传学的差异分为初始态多能干细胞(pPSCs)和原始态多能干细胞(nPSCs)。nPSCs因其容易进行基因工程处理以及体内外再生出功能组织器官等优势而在临床潜在应用上备受关注,因而有效维持ESCs的原始状态对其用于基础及临床研究具有重要意义。nPSCs的线粒体活性和自我更新能力高于pPSCs,且这两种多能性干细胞在DNA甲基化等方面都存在明显差别,DNA甲基化在nPSCs的转化及代谢中起到重要的作用。本文综述了DNA甲基化对ESCs的作用,特别是维持原始态的作用。(本文来源于《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》期刊2019年03期）

郑贝贝^[10]（2019）在《小分子化合物Vc和RG108组合对山羊iPSC-like细胞多能性维持的研究》一文中研究指出本研究利用山羊诱导多能干细胞(giPSCs-like)为实验材料,筛选能够促进giPSCs多能性状态维持的小分子化合物,从而优化培养体系。再对优化后的培养体系下获得的giPSCs进行一系列生物学特性检测,同时结合RNA-seq技术和生物信息学分析,探究其促进多能性维持的相关分子机制。1.促进山羊iPSC-like细胞多能性的培养条件筛选(1)通过比对添加单个作用于表观遗传的小分子药物对giPSC-like细胞的影响,以克隆形态,碱性磷酸酶活性以及相关基因的表达量作为鉴定指标,结果发现:Vc组与RG108组可以明显促进克隆的生长速度与维持克隆形态,克隆更加透亮,碱性磷酸酶(AP)活性增强。同时添加Vc组显着提高了组蛋白去甲基化酶KDM2B和DNA去甲基化酶TET1,TET3的表达。添加RG108组降低了 DNA甲基转移酶抑制剂(DNMT1)的表达。(2)进一步筛选小分子组合,结果发现:Vc与RG108(即VR)组合使用时,AP活性更强,同时显着上调TET1,TET3和显着下调DNMT1的表达。另外多能性基因OCT4,SOX2,NANOG的表达量也显着提高,促进多能性的维持。(3)筛选基础培养基发现:DMEM/F12+10%FBS+10%KSR(DFK)的基础培养基明显提高克隆的生长速度和质量,QRT-PCR结果显示该基础培养基结合VR培养细胞时,OCT4,KLF4,NANOG,TET1表达量上调最显着。最终在此基础上完善培养基,发现添加碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),进一步促进克隆增殖速度和显着上调相关基因表达量,从而确定“DFK-VR+bFGF”(DMEM/F12+10%FBS+10%KSR+DOX+β-巯基乙醇+L-谷氨酰胺+ NEAA+Vc+RG108+bFGF)为优化后的培养体系。(4)“DFK-VR+bFGF”培养体系下获得的giPSCs进行生物学鉴定和无DOX条件培养。结果显示:giPSCs克隆圆润透亮,形态聚拢,呈现山羊正常的染色体核型,共60条染色体。与对照组相比,克隆生长速度快,AP活性强。相对荧光强度结果显示:H3K9me3的荧光强度显着降低,多能性基因SOX2和NANOG的荧光强度显着提高。无DOX培养条件下,“DFK-VR+bFGF”培养体系中能够在一定程度上维持克隆形态。2.山羊iPSC-like细胞在“DFK-VR+bFGF”以及对照组(GIPS)培养体系下转录组测序分析比较根据测序结果,分析“DFK-VR+bFGF”与GIPS两个体系下差异基因显着富集的KEGG通路,找到造成两组多能性差异的关键信号通路,包括有 Wnt signaling pathway,Hippo signaling pathway,PI3K-AKT signaling pathway等。发现激活Wnt信号通路有利于多能性的提升,激活PI3K-AKT信号通路会促进细胞增殖、抑制凋亡和促进糖原生成过程。Hippo信号通路对于有助于giPSCs的增殖、存活和多能性的维持至关重要。综上,我们筛选获得可促进giPSCs多能状态维持的培养体系“DFK-VR+bFGF”,推测该体系可能是通过小分子化合物Vc和RG108降低细胞整体甲基化,从而促进多能性的提升,同时激活了Wnt信号通路,Hippo信号通路和PI3K-AKT信号通路发挥重要作用。上述结果为山羊多能干细胞培养条件的进一步优化提供一定的理论基础,也为促进转基因动物生产以及畜牧业发展奠定基础。(本文来源于《广西大学》期刊2019-06-01）

多能性论文开题报告

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

多能干细胞(pluripotent stem cell, PSC),包括胚胎干细胞(embryonic stem cell, ESC)和诱导多能性干细胞(induced pluripotent stem cell, iPSC),具有无限自我更新及分化成体内所有类型细胞的潜能,因此,在再生医学中有着重要的临床应用前景.独特的异染色质及其组蛋白修饰对于PSC的多能性、快速增殖、命运决定和基因组稳定性起重要作用.本文总结了近年来发现的异染色质在维持多能性和基因组稳定性中的作用和机制,以及PSC如何维持其特有的异染色质状态.

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

多能性论文参考文献

[1].陈兴.O-GlcNAc糖基化对胚胎干细胞多能性维持的调控作用（英文）[C].中国生物化学与分子生物学会2019年全国学术会议暨学会成立四十周年论文集.2019

[2].陈凌懿,刘林.异染色质在多能性维持中的作用和调控机制[J].中国科学:生命科学.2019

[3].蒋雪梅,顿耀艳.HER2信号通路与干细胞多能性分子网络的研究进展[J].现代医药卫生.2019

[4].杨艺.Dmrt1对ESC多能性状态调控的机制研究[C].中国解剖学会2019年年会论文文摘汇编.2019

[5].刘高科,何建荣,阮艳,张俊磊,王嘉丽.Dax1剪接体在小鼠胚胎干细胞多能性维持中的作用研究[C].中国解剖学会2019年年会论文文摘汇编.2019

[6].卢电,谢英俊,孙筱放.诱导多能性干细胞重编程方法及应用研究进展[J].实用医学杂志.2019

[7].王聪.LncRNAOeblr20通过Oct4eRNA通路调控干细胞多能性和重编程的作用及机制研究[D].吉林大学.2019

[8].孟庆丽.ActivinA和BMP4单独添加对小鼠胚胎干细胞多能性的影响[D].内蒙古大学.2019

[9].汪若凤,郭永洪,田勤,段维鸽.多能性胚胎干细胞与DNA甲基化的关系[J].中华细胞与干细胞杂志(电子版).2019

[10].郑贝贝.小分子化合物Vc和RG108组合对山羊iPSC-like细胞多能性维持的研究[D].广西大学.2019

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