产鸡α干扰素的毕赤酵母菌高密度发酵工艺研究

产鸡α干扰素的毕赤酵母菌高密度发酵工艺研究

论文摘要

本试验以表达鸡α干扰素的毕赤酵母工程菌为研究对象,在50 L发酵罐水平,研究p H、装液量、溶氧、诱导条件等因素对发酵产鸡α干扰素的影响。确定了最优发酵工艺为菌体增殖阶段:控制p H为6.0,溶氧控制在30%~40%,诱导前菌体浓度为400 g/L,诱导时控制pH为5.5,溶氧控制在20%~30%,用50%质量浓度的山梨醇:甲醇=1:4的诱导剂,采取连续补料方式,诱导初期补料速度为1 mL/(L·h),每小时提升一个单位,5 h后控制流加速度为5~6 m L/(L·h)。此工艺条件可实现500 L规模发酵生产鸡α干扰素,并且工艺稳定,鸡α干扰素的抗病毒活性可达到4.5×107U/mL以上,生产成本降低55%,发酵效价提高了3.5倍,并且控制简单,适合规模化生产。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 供试菌
  •   1.2 主要试剂及培养基
  •   1.3 主要仪器设备
  •   1.4 菌株培养方法
  •   1.5 指标测定
  •     1.5.1 菌体生物量测定
  •     1.5.2 pH测定
  •     1.5.3 甘油浓度测定
  •     1.5.4 甲醇浓度测定
  •     1.5.5 鸡α干扰素抗病毒活性的测定
  • 2 结果与分析
  •   2.1 pH对毕赤酵母高密度培养表达鸡α干扰素的影响
  •   2.2 装液量对毕赤酵母高密度培养表达鸡α干扰素的影响
  •   2.3 溶氧量(DO)对毕赤酵母高密度培养表达鸡α干扰素的影响
  •   2.4 诱导前菌体浓度对毕赤酵母高密度培养表达鸡α干扰素的影响
  •   2.5 诱导剂添加模式对毕赤酵母高密度培养表达鸡α干扰素的影响
  •     2.5.1 诱导剂配方的选择
  •     2.5.2 诱导剂添加模式的选择
  •   2.6 50 L发酵工艺的确定
  •   2.7 500 L发酵工艺的确定
  • 3 结论与讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 曹丁,李学优,肖宏艳,昝继清

    关键词: 毕赤酵母,鸡干扰素,高密度发酵,工艺优化

    来源: 中国饲料 2019年23期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学,工程科技Ⅰ辑

    专业: 生物学,一般化学工业

    单位: 广州市微生物研究所

    基金: 广州市科技计划项目(201610010087)

    分类号: TQ929.1

    DOI: 10.15906/j.cnki.cn11-2975/s.20192306

    页码: 21-26

    总页数: 6

    文件大小: 314K

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