抑制糖酵解活性限制雄性原始生殖细胞的增殖

抑制糖酵解活性限制雄性原始生殖细胞的增殖

论文摘要

目的:雄性原始生殖细胞在植入生殖嵴后,会从有丝分裂退出进入静息状态,在这一过程中伴随着细胞内代谢状态的改变,本研究旨在体解析原始生殖细胞增殖的改变与细胞代谢之间的因果关系。方法:通过体内Brdu掺入实验明确不同时间点雄性生殖细胞的增殖状态;分析比较增殖状态和静息状态原始生殖细胞糖酵解相关基因的表达;利用腹腔注射HK2特异性抑制剂2-Deoxy-D-glucose (2-DG),构建糖酵解抑制小鼠模型;通过免疫荧光与qPCR分析抑制糖酵解后原始生殖细胞的表型。结果:免疫荧光结果显示雄性生殖细胞增殖停滞从E13.5开始,至E15.5完全停滞;qPCR和Western Blot显示在此过程中HK2的表达是逐渐降低的;在E11.5抑制小鼠胚胎中的糖酵解过程,可以在E13.5检测到雄性PGCs增殖下降,并且可以抑制多能性基因如Sox2、Oct4的表达。结论:研究发现,E11.5-E13.5雄性原始生殖细胞内增殖与多能性的维持需要糖酵解。改变胚胎糖酵解水平可以影响原始生殖细胞增殖分化进程。

论文目录

  • 前言
  • 1 材料和方法
  •   1.1 材料
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 Brd U掺入实验
  •     1.2.2 糖酵解抑制小鼠模型建立
  •     1.2.3 免疫荧光实验
  •     1.2.4 qPCR实验
  •   1.3 统计学分析
  • 2 结果
  •   2.1 探究雄性原始生殖细胞有丝分裂阻滞发生时期
  •   2.2 雄性生殖细胞分化过程中糖酵解的变化
  •   2.3 构建糖酵解抑制小鼠模型
  •   2.4 糖酵解的抑制影响雄性小鼠PGCs分化过程
  •   2.5 糖酵解的抑制不影响雄性命运分化基因转录水平的表达
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 徐瑜珊,陈丽,王娜,臧春燕,彭凡珂,张军

    关键词: 雄性生殖细胞,糖代谢,多能性,分化

    来源: 现代生物医学进展 2019年10期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学

    单位: 南京医科大学生殖医学国家重点实验室

    基金: 国家自然科学基金项目(31871445),国家自然科学基金项目(31501211)

    分类号: Q492

    DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2019.10.005

    页码: 1823-1828

    总页数: 6

    文件大小: 542K

    下载量: 74

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