郭艳霜[1]2004年在《聚乳酸载药纳米微球的制备及其对脑胶质瘤的抑制研究》文中认为采用自乳化/溶剂挥发法制备了包载卡氮芥的聚乳酸纳米微粒(BCNU-PLANPs),扫描电子显微镜、透射电子显微镜、激光粒度仪等表征显示,纳米微粒呈表面光滑的球形,粒径较小且分布均匀,分散性好。制备工艺条件,如滴加方式、油相配比、聚乳酸浓度及乳化剂浓度等,对纳米微粒粒径及产率均有影响,在实验范围内最佳制备方法为:油相配比丙酮/乙醇:6:4、聚乳酸浓度为2%、乳化剂浓度为0.5%。采用显色法测定纳米微粒的载药率及包封率,考察了初始投药量、聚乳酸相对分子质量和挥发时间对微粒载药率和包封率的影响,纳米微粒的最高载药率和包封率分别为5.63%和33.45%。结合考虑纳米微粒的粒径、形态、产率、载药量及包封率,选择最佳制备方案为:初始投药比(BCNU/PLA)为1:5;聚乳酸相对分子质量为10 000,30 000和50 000;微球制备时间为5小时。载药纳米微粒的体外释药实验表明,聚乳酸纳米微粒具有药物缓释特性,且随聚乳酸相对分子质量减小,药物释放速度加快,突释现象明显。体外胶质瘤细胞抑制实验显示:空载微粒对肿瘤细胞没有抑制作用,显示出载体材料良好的生物相容性,载药纳米微粒对C6鼠胶质瘤细胞的抑制率等于或大于游离药物,且具有缓释抑制特性。以荷瘤鼠为模型的动物实验表明:无论是早期治疗还是晚期治疗,与对照组及原药治疗组相比,载药纳米微粒能有效的抑制胶质瘤细胞的增值,显示了较强的细胞毒性,显着提高了实验动物的生存期。尤其是在大剂量早期治疗中,一只荷瘤鼠肿瘤消失并长期存活,其余大鼠平均存活期为24.3天,存活期平均延长88.37%。另外,实验还证明空白微球有较好的体内生物相容性。在以上实验基础上,采用同种方法制备了表面修饰转铁蛋白的聚乳酸纳米微粒(Tf-PLA NPs),以X-光电子能谱对其表面结构进行了表征。荧光相差倒置显微镜观察显示纳米微粒表面的转铁蛋白具有活性,纳米微粒可进入细胞胞浆,具有瘤细胞靶向性。以99mTc放射性标记纳米微粒,SPECT观察不同途径给药后纳米微粒体内分布,结果显示:鼠尾静脉注射后纳米微粒主要浓集于腹腔的肝和脾;颈动脉注射后在腹腔脏器存在分布,颅内分布显着提高;立体定位注射后纳米微粒滞留于颅内,在外周器官未观察到放射活性。
聂玲辉[2]2017年在《纳米靶向递药系统AS1411-PLGA-DOX的构建及其对脑胶质瘤的治疗作用与机制研究》文中提出背景:恶性肿瘤给人类健康和社会发展带来了沉重的伤害。由于肿瘤呈侵袭性生长,手术难以完全根除,加之放疗、化疗的毒副作用大,因此,寻找最佳的是肿瘤综合治疗的手段迫在眉睫。随着材料学、生物医学及纳米科学的交叉融合,纳米靶向制剂逐渐引起科学家的重视。纳米靶向给药系统是目前研究的热点,它具有可靶向性,提高药物稳定性及缓释性等特点。聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)被广泛用于载药系统的研究,主要是由于具有生物相容性、低毒性和可降解性等良好的特性。盐酸多柔比星(又称阿霉素,DOX),对多种肿瘤均具有显着的抑制作用,它但它的骨髓抑制、心脏损伤等不良反应成为DOX治疗肿瘤的瓶颈。核酸适配体(AS1411)具有特异性强的靶标结合能力、易于穿透肿瘤组织、易于体外修饰等优点,并特异性结合于核仁蛋白(C23),以发挥其抗肿瘤的重要作用。C23是细胞凋亡相关蛋白,它可调控细胞增殖生长过程,其中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)在细胞凋亡的过程所起的重要作用越来越来引起广大科学研究者的重视。目的:本课题以DOX为抗脑胶质瘤药物,以PLGA为纳米载体,AS1411偶联于PLGA纳米微球,以构成纳米靶向递药系统AS1411-PLGA-DOX,以发挥其特异性靶向抗脑胶质瘤的作用,并进一步明确其抗脑胶质瘤作用的分子机制。方法:采用复乳乳化溶剂挥发法及碳二亚胺两步缩合反应法进行AS1411-PLGA-DOX的制备;并对其进行表征;再从体内外两方面明确AS1411-PLGA-DOX抗脑胶质瘤的作用;最后从分子生物学方面,以肿瘤凋亡的分子机制为着眼点,深入研究AS1411-PLGA-DOX抗脑胶质瘤的内在分子机制。结果:1.AS1411-PLGA-DOX为球形的纳米粒,大小(245±42.6nm)分布较规整,表面较光滑;多分散系数 0.212±0.023,电位-36.2±1.8mV,LC%为 1.72±0.06%、EE%为 88.1±4.7%;体外释放性为 47.7±3.9.%(pH=7.4),57.0±4.6%(pH=5),其结果展现出具有pH响应性释放的特性;溶血率为0.244%以展现出良好的生物形容性。同时,AS1411-PLGA-DOX的荧光强度显着高于PLGA-DOX,且被细胞摄入内部并释药,细胞定量定位的结果表明其具有一定的靶向性。2.体外实验表明,AS1411-PLGA-DOX对U87细胞生长抑制率的变化呈现浓度依赖性,并可将细胞阻滞于G2/M,S期,其抑制肿瘤的机制可能与AS1411-PLGA-DOX 激活 p38MAPK 通道,上调 p38 的表达,下调 C23、Bcl-2、Bcl-XL的表达有关。3.体内实验表明,AS1411-PLGA-DOX可抑制皮下荷瘤裸鼠的瘤体生长,延长荷瘤裸鼠的生存时间,其进一步的分子生物学机制与细胞实验相一致。结论:本课题已成功构建具有靶向作用的纳米递药系统AS1411-PLGA-DOX,同时其体内外实验结果表明,AS1411-PLGA-DOX是一种有潜在开发价值的抑制脑胶质瘤的纳米制剂,其作用机制可能激活p38凋亡信号通路,造成p38蛋白的上调表达及C23、Bcl-2、Bcl-XL蛋白的下调表达。
参考文献：
[1]. 聚乳酸载药纳米微球的制备及其对脑胶质瘤的抑制研究[D]. 郭艳霜. 天津大学. 2004
[2]. 纳米靶向递药系统AS1411-PLGA-DOX的构建及其对脑胶质瘤的治疗作用与机制研究[D]. 聂玲辉. 南方医科大学. 2017