TRPC1/C4/C5通道调节胸主动脉平滑肌收缩作用研究

TRPC1/C4/C5通道调节胸主动脉平滑肌收缩作用研究

论文摘要

目的研究胸主动脉平滑肌瞬时受体电位离子通道(TRPC)家族C1/C4/C5三个亚型与大电导钙激活钾通道(BKCa)蛋白相互作用差异,阐明TRPC1/C4/C5通道在激动剂引起的胸主动脉平滑肌收缩中的作用。方法采用瞬时转染小干扰RNA(siRNA)敲低昆明小鼠胸主动脉平滑肌组织中TRPC1、TRPC4、TRPC5蛋白表达并用免疫蛋白印迹实验检测其表达水平改变情况;通过离体血管实验检测内皮素1引起的血管收缩改变;采用免疫共沉淀实验检测TRPC1/C4/C5通道蛋白与BKCa蛋白相互作用情况。结果瞬时转染特异性TRPC1/C4/C5 siRNA显著敲低昆明小鼠胸主动脉平滑肌中TRPC1/C4/C5蛋白表达;在内皮素1引起的胸主动脉环收缩中,TRPC1或TRPC5 siRNA处理组较对照组血管收缩显著增强,但TRPC4 siRNA处理组较对照组血管收缩显著减弱;免疫共沉淀结果显示,TRPC1可以共沉淀TRPC4、TRPC5和BKCa,同时,TRPC4可以共沉淀TRPC1,TRPC5可以共沉淀TRPC1、BKCa,但TRPC4不能共沉淀BKCa。结论 TRPC1可以与TRPC4或TRPC5蛋白在小鼠胸主动脉平滑肌中组成异聚体通道,并且TRPC1-TRPC5两种蛋白组成的异聚体通道和BKCa形成钙信号复合物调节血管平滑肌收缩。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 试剂与仪器
  •     1.1.2 实验动物
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 血管环的制备
  •     1.2.2 siRNA转染
  •     1.2.3 离体胸主动脉环张力实验
  •     1.2.4 免疫共沉淀
  •     1.2.5 Western blot
  •   1.3 统计学处理
  • 2 结果
  •   2.1 TRPC1/C4/C5 siRNA分别敲低其蛋白表达
  •   2.2 TRPC1/C4/C5 siRNA对高钾引起的胸主动脉收缩的影响
  •   2.3 TRPC1/C4/C5 siRNA对内皮素1引起的胸主动脉收缩的影响
  •   2.4 TRPC1/C4/C5与BKCa蛋白的相互作用
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 陈良余,毛雨,周扬,费亮,王健,周利民,范涛涛,沈兵

    关键词: 大电导钙激活钾通道,瞬时受体电位通道,血管平滑肌,内皮素

    来源: 安徽医科大学学报 2019年10期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 安徽医科大学滁州临床学院心内科,滁州市第一人民医院心内科,安徽医科大学

    基金: 国家自然科学基金(编号:81570403),安徽省“十三五”医疗卫生重点专科建设项目,滁州市科技指导性计划项目(编号:201507)

    分类号: R331

    DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2019.10.001

    页码: 1501-1505

    总页数: 5

    文件大小: 1302K

    下载量: 119

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