导读:本文包含了血管平滑肌细胞游走论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:平滑肌,血管,细胞,球蛋白,因子,基因,抑制。
血管平滑肌细胞游走论文文献综述
胡晓琳,潘平喜,杨丽,刘小菁,付华[1]（2009）在《缺氧对大鼠血管平滑肌细胞表达巨噬细胞游走抑制因子的影响》一文中研究指出目的观察缺氧对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)表达巨噬细胞游走抑制因子(MIF)的影响,探讨缺氧在动脉粥样硬化等血管增生性疾病中引起动脉壁损伤的可能机制。方法将大鼠VSMCs细胞株A7r5细胞分别在缺氧(37℃、5%CO2、1%O2)及常氧(37℃5、%CO2、20%O2)条件下培养不同的时间(2 h4、h1、2 h2、4 h、48h),在相应时间点收集细胞总RNA及培养上清液。用半定量RT-PCR及ELISA方法分别检测MIFmRNA的表达及VSMCs MIF的蛋白水平变化。结果与常氧培养的对照组相比,缺氧不同时间的大鼠VSMCs的MIFmRNA表达均显着增加(P<0.05),并且合成MIF蛋白的水平也明显增加(P<0.05)。结论缺氧能诱导VSMCsMIF的表达,MIF的表达增加可能是缺氧参与动脉粥样硬化等血管增生性疾病发生的机制之一。(本文来源于《四川大学学报(医学版)》期刊2009年02期）
徐丹[2]（2003）在《原肌球蛋白对血管平滑肌细胞游走能力影响的研究》一文中研究指出目的： 原肌球蛋白(Tropomyosin，TM)是肌肉收缩过程中的一种调节蛋白。本课题将基因重组的人平滑肌TM的同源体-β(hsmTM-β)表达于人冠状动脉平滑肌细胞(CASMC)中，旨在探讨TM对血管平滑肌细胞(VSMC)游走能力的影响，为探索平滑肌中原肌球蛋白的作用开辟新径。 方法与结果： 一．基因重组hsmTM-β 采用套式PCR技术，从人主动脉cDNA文库中扩增hsmTM-β的cDNA目的基因片段，用dGTP和T4 DNA聚合酶修饰；在逆转录病毒载体pLIB基础上正向插入AS-RI-Nru片段构建载体pLIB-AS，用限制性内切酶NruⅠ和EcoRI消化。目的基因和载体经酚氯仿抽提，盐乙醇沉淀纯化后，用GENECLEAN Turbo核酸纯化试剂盒从琼脂糖胶中提纯DNA，最后在DNA连接酶作用下，将hsmTM-β的cDNA反插入pLIB-AS中，获得重组质粒pLIB-AS-hsmTM-β。用热休克法将重组DNA转化入感受态大肠杆菌XL10-Gold中，重组质粒按质粒的小规模制备的碱裂解法提取和纯化后，用限制性内切酶EcoRI验证其全长，用PCR方法验证其插入片段。结果显示用反插入法可以实现hsmTM-β的基因重组。借助DNA SIS软件分析人平滑肌TM和鸡平滑肌TM的cDNA核苷酸序列，发现二者同源性达84.7％。 二．hsmTM-β重组体的转染和表达 参照逆转录病毒基因的转染和表达使用手册，在DMEM和SmBM细胞培养液中分别培养人胚肾细胞(AmphoPack-293)和人冠状动脉平滑肌细胞(CASMC)至第叁代，用CalPhos~(TM)哺乳类转染试剂盒，将hsmTM-β重组质粒pLIB-AS-hsmTM-β和含有增强绿色荧光蛋白(EGFP)cDNA的重组质粒pLIB-EGFP分别转染进AnlphoPack一293中，产生逆转录病毒，然后感染CAsMC使基因表达。用chariot蛋白转染试剂盒将鸡胃平滑肌原肌球蛋白(gTM)转染进hsmTM一p/AS反义表达组细胞中。蛋白表达用Westem Blot法检测。 叁.WestemBlot分析 从CASMC中获取胞质蛋白，经12.5%SDS一AGE电泳后，将蛋白转至PDVF膜上，用Westem blot法分析TM表达。PDV下膜用5%脱脂奶粉封闭液过夜后，以兔抗原肌球蛋白多克隆抗体为一抗(l:1000)，抗兔免疫球蛋白抗体为二抗(1: 5000)，结果显示以纯gTM为标准，与对照组和EGFP表达组相比，基因重组后的hsmTM一p表达敲除。在hamTM一p/AS反义表达组细胞补充了gTM后表达平滑肌原肌球蛋白(s mTM)，并随gTM蛋白转染量增多smTM表达增多。 四.VSMC游走测定 用Boyden’5 Ch田刀ber方法测定vSMC的游走，聚碳酸盐滤过膜使用前以0.01%I型胶原包被。培养的CASMC细胞以2 xl护/ml的密度经胰蛋白酶消化后悬于游走细胞培养液DMEM(含0.4%BSA)中。于Ch田刀ber的上室加感染不同质粒的CASMC;下室加含有PDGF一BB和不含有PDGF一BB游走细胞培养液。将Chamber移至二氧化碳孵箱中，37oC孵育5小时。随机选取四个400X高倍视野(4H卫F)内游走细胞平均数评估细胞游走能力。 在PDGF一BB趋化剂刺激下，与对照组和EGFP表达组相比，单纯hsmTM一p/AS反义表达组细胞游走能力明显增强(P<005)。细胞的随机游走能力在hemTM一p基因敲除时同样增强(P<0.05)。在hsmTM一侧AS反义表达组细胞补充gTM之后，hsmTM一p基因敲除对细胞游走的刺激作用消失口<0.05)。 结论 人平滑肌TM一p和鸡胃平滑肌TM一p的cDNA核昔酸序列的同源性达84.7%。反插入法可实现hsmTM一p的基因重组，westem blot证实hsmTM基因敲除。Boyden’s Chamber法测定平滑肌细胞游走，在PDGF一BB趋化剂下和细胞随机游走下hsmTM一p基因敲除后CASMC的游走能力均增强。(本文来源于《大连医科大学》期刊2003-05-01）
血管平滑肌细胞游走论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的： 原肌球蛋白(Tropomyosin，TM)是肌肉收缩过程中的一种调节蛋白。本课题将基因重组的人平滑肌TM的同源体-β(hsmTM-β)表达于人冠状动脉平滑肌细胞(CASMC)中，旨在探讨TM对血管平滑肌细胞(VSMC)游走能力的影响，为探索平滑肌中原肌球蛋白的作用开辟新径。 方法与结果： 一．基因重组hsmTM-β 采用套式PCR技术，从人主动脉cDNA文库中扩增hsmTM-β的cDNA目的基因片段，用dGTP和T4 DNA聚合酶修饰；在逆转录病毒载体pLIB基础上正向插入AS-RI-Nru片段构建载体pLIB-AS，用限制性内切酶NruⅠ和EcoRI消化。目的基因和载体经酚氯仿抽提，盐乙醇沉淀纯化后，用GENECLEAN Turbo核酸纯化试剂盒从琼脂糖胶中提纯DNA，最后在DNA连接酶作用下，将hsmTM-β的cDNA反插入pLIB-AS中，获得重组质粒pLIB-AS-hsmTM-β。用热休克法将重组DNA转化入感受态大肠杆菌XL10-Gold中，重组质粒按质粒的小规模制备的碱裂解法提取和纯化后，用限制性内切酶EcoRI验证其全长，用PCR方法验证其插入片段。结果显示用反插入法可以实现hsmTM-β的基因重组。借助DNA SIS软件分析人平滑肌TM和鸡平滑肌TM的cDNA核苷酸序列，发现二者同源性达84.7％。 二．hsmTM-β重组体的转染和表达 参照逆转录病毒基因的转染和表达使用手册，在DMEM和SmBM细胞培养液中分别培养人胚肾细胞(AmphoPack-293)和人冠状动脉平滑肌细胞(CASMC)至第叁代，用CalPhos~(TM)哺乳类转染试剂盒，将hsmTM-β重组质粒pLIB-AS-hsmTM-β和含有增强绿色荧光蛋白(EGFP)cDNA的重组质粒pLIB-EGFP分别转染进AnlphoPack一293中，产生逆转录病毒，然后感染CAsMC使基因表达。用chariot蛋白转染试剂盒将鸡胃平滑肌原肌球蛋白(gTM)转染进hsmTM一p/AS反义表达组细胞中。蛋白表达用Westem Blot法检测。 叁.WestemBlot分析 从CASMC中获取胞质蛋白，经12.5%SDS一AGE电泳后，将蛋白转至PDVF膜上，用Westem blot法分析TM表达。PDV下膜用5%脱脂奶粉封闭液过夜后，以兔抗原肌球蛋白多克隆抗体为一抗(l:1000)，抗兔免疫球蛋白抗体为二抗(1: 5000)，结果显示以纯gTM为标准，与对照组和EGFP表达组相比，基因重组后的hsmTM一p表达敲除。在hamTM一p/AS反义表达组细胞补充了gTM后表达平滑肌原肌球蛋白(s mTM)，并随gTM蛋白转染量增多smTM表达增多。 四.VSMC游走测定 用Boyden’5 Ch田刀ber方法测定vSMC的游走，聚碳酸盐滤过膜使用前以0.01%I型胶原包被。培养的CASMC细胞以2 xl护/ml的密度经胰蛋白酶消化后悬于游走细胞培养液DMEM(含0.4%BSA)中。于Ch田刀ber的上室加感染不同质粒的CASMC;下室加含有PDGF一BB和不含有PDGF一BB游走细胞培养液。将Chamber移至二氧化碳孵箱中，37oC孵育5小时。随机选取四个400X高倍视野(4H卫F)内游走细胞平均数评估细胞游走能力。 在PDGF一BB趋化剂刺激下，与对照组和EGFP表达组相比，单纯hsmTM一p/AS反义表达组细胞游走能力明显增强(P<005)。细胞的随机游走能力在hemTM一p基因敲除时同样增强(P<0.05)。在hsmTM一侧AS反义表达组细胞补充gTM之后，hsmTM一p基因敲除对细胞游走的刺激作用消失口<0.05)。 结论 人平滑肌TM一p和鸡胃平滑肌TM一p的cDNA核昔酸序列的同源性达84.7%。反插入法可实现hsmTM一p的基因重组，westem blot证实hsmTM基因敲除。Boyden’s Chamber法测定平滑肌细胞游走，在PDGF一BB趋化剂下和细胞随机游走下hsmTM一p基因敲除后CASMC的游走能力均增强。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
血管平滑肌细胞游走论文参考文献
[1].胡晓琳,潘平喜,杨丽,刘小菁,付华.缺氧对大鼠血管平滑肌细胞表达巨噬细胞游走抑制因子的影响[J].四川大学学报(医学版).2009
[2].徐丹.原肌球蛋白对血管平滑肌细胞游走能力影响的研究[D].大连医科大学.2003
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