嗜热四膜虫有性后代的分离纯化

嗜热四膜虫有性后代的分离纯化

论文摘要

在实验条件下诱导四膜虫种群交配进行有性生殖时,交配后的种群中除有性后代外,还会混杂一定比例的亲本细胞,而高纯度的有性后代是研究四膜虫一些基本生物学问题的重要基础。本研究利用四膜虫交配时不能摄食并且新产生的有性后代几小时后才恢复摄食能力的特性,以嗜热四膜虫(Tetrahymenathermophila)交配种群为对象,在其有性生殖阶段后期向交配体系中加入Fe3O4磁性纳米颗粒,未交配的亲本细胞由于能够摄入磁性颗粒而具有磁性;再利用有性后代和未交配细胞的磁性差异,在磁场作用下将有性后代分离纯化出来。通过优化过柱分离的时间点、分离柱的口径、分离柱中铁粉/石英粉的质量等分离条件,有性后代的分离纯度及收率均能达到98%以上。该分离方法亦可为其他种四膜虫或纤毛虫有性后代的分离纯化提供借鉴。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 细胞株制备
  •   1.2 细胞培养与交配
  •   1.3 有性后代分离纯化
  •     1.3.1 Fe3O4磁性纳米颗粒预处理
  •     1.3.2 分离纯化装置
  •     1.3.3 有性后代分离纯化时间点的确定
  •       1.3.3. 1 种群配对率计算和有性生殖发育过程观察
  •       1.3.3.2饥饿细胞摄食磁性纳米颗粒情况观察
  •       1.3.3. 3 有性后代恢复摄食能力时间点观察
  •     1.3.4 过柱分离及数据记录
  • 2 结果
  •   2.1 种群配对率计算及有性生殖发育过程观察
  •   2.2 饥饿细胞摄食磁性纳米颗粒的情况
  •   2.3 有性后代恢复摄食能力时间
  •   2.4 有性后代分离纯化效果
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 马雪凤,孙宗毅,张晶,陈凯,王光营,缪炜

    关键词: 嗜热四膜虫,磁性纳米颗粒,有性后代,纤毛虫

    来源: 动物学杂志 2019年02期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,农业科技

    专业: 生物学

    单位: 中国科学院水生生物研究所水生生物多样性与保护重点实验室,中国科学院大学

    基金: 国家自然科学基金项目(No.91631303)

    分类号: Q958

    DOI: 10.13859/j.cjz.201902014

    页码: 279-287

    总页数: 9

    文件大小: 1622K

    下载量: 84

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