胆碱脱氢酶论文_何冬华,齐文静,纪婧琦,戴美学,夏志洁

导读:本文包含了胆碱脱氢酶论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:胆碱,植株,基因,脱氢酶,转基因,花粉,引物。

胆碱脱氢酶论文文献综述

何冬华,齐文静,纪婧琦,戴美学,夏志洁[1](2012)在《CODEHOP法设计引物克隆色盐杆菌ST307胆碱脱氢酶基因及其序列分析》一文中研究指出目的研究色盐杆菌ST307甜菜碱的合成,克隆分析其胆碱脱氢酶betA基因片段。方法采用醇提法提取色盐杆菌ST307中的甜菜碱并检测,用CODEHOP在线程序设计简并引物扩增胆碱脱氢酶betA基因序列,并进行序列分析。结果色盐杆菌ST307细胞中积累甜菜碱,通过PCR获得长度为485 bp的betA基因片段。BLAST序列分析显示该基因序列与多个菌株的betA基因序列具有较高的同源性,最高达83%。核苷酸序列比对及进化树构建结果显示,色盐杆菌ST307胆碱脱氢酶基因序列与Pseudomonas fulva 12-X进化关系最为接近。结论 CODEHOP法设计的简并引物可信性较强,同时betA基因片段的成功克隆将为获得ST307胆碱脱氢酶基因的全序列、研究耐盐机制和遗传改良提供科学依据。(本文来源于《食品与药品》期刊2012年01期)

刘桂丰,杨传平,程贵兰,白爽,于影[2](2008)在《以胆碱脱氢酶基因对小黑杨花粉植株的遗传转化》一文中研究指出以小黑杨(Populus simonii×P.nigra)花粉植株叶片为外植体,用根癌农杆菌介导法将胆碱脱氢酶基因(betA)导入其中,将获得的4株卡那霉素抗性转基因株系进行PCR检测,结果均为阳性。用荧光定量PCR对转基因株系的betA基因转录结果检测表明,4个转基因株系均已表达外源基因,但表达量有差异。对获得的4株转基因株系及对照进行NaCl胁迫处理,当NaCl浓度为0.55%时,非转基因小黑杨花粉植株生根率为0,转基因株系生根率为80%~100%;在NaCl为0.70%~0.80%时,则转基因株系生根率也为0。4个转基因株系的甜菜碱含量显着高于未转基因对照,说明betA基因的导入提高了转基因株系的耐盐性。(本文来源于《第六届全国林木遗传育种大会论文集》期刊2008-11-01)

吕素莲,张可炜,张举仁[3](2006)在《转胆碱脱氢酶基因棉花的耐旱性研究》一文中研究指出对农杆菌介导法获得的转胆碱脱氢酶(CDH)基因betA棉花的5个株系的T2代纯合植株在苗期、蕾期和开花期的耐旱性进行了研究。在干旱条件下,转基因株系1,3,4和5的叶片甜菜碱含量显着高于对照植株鲁棉19号,其中株系4的叶片甜菜碱含量最高达到354.3μmolg-1DW。苗期的PEG6000渗透胁迫试验表明渗透胁迫24小时后,除株系2外,其它四个转基因株系小苗的(本文来源于《2006年中国植物逆境生理生态与分子生物学学术研讨会论文摘要汇编》期刊2006-07-01)

刘桂丰,程贵兰,姜静,白爽,于影[4](2006)在《以胆碱脱氢酶基因对小黑杨花粉植株的遗传转化》一文中研究指出以小黑杨(Populussimonii×P.nigra)花粉植株叶片为外植体,用根癌农杆菌介导法将胆碱脱氢酶基因(betA)导入其中,将获得的4株卡那霉素抗性转基因株系进行PCR检测,结果均为阳性。用荧光定量PCR对转基因株系的betA基因转录结果检测表明,4个转基因株系均已表达外源基因,但表达量有差异。对获得的4株转基因株系及对照进行NaCl胁迫处理,当NaCl浓度为0.55%时,非转基因小黑杨花粉植株生根率为0,转基因株系生根率为80% ̄100%;在NaCl为0.70% ̄0.80%时,则转基因株系生根率也为0。4个转基因株系的甜菜碱含量显着高于未转基因对照,说明betA基因的导入提高了转基因株系的耐盐性。(本文来源于《植物生理与分子生物学学报》期刊2006年02期)

李佳忠,王春明,袁金铎,安利国[5](2006)在《一种大肠杆菌胆碱脱氢酶活性的测定方法》一文中研究指出本文提出了一种简单易行的测定微生物中胆碱脱氢酶活力的方法。通过测定549nm波长下电子传递体系PMS(吩嗪二甲酯硫酸盐)-cty.c(细胞色素C)光吸收值的增加,就可以计算出胆碱脱氢酶活力。利用此方法测定了大肠杆菌胆碱脱氢酶热激诱导前后的活力,结果发现受到诱导的大肠杆菌中胆碱脱氢酶的活力明显高于对照组。(本文来源于《山东科学》期刊2006年01期)

薛哲勇,贺晨霞,孙松,夏光敏[6](2004)在《农杆菌介导的胆碱脱氢酶基因(betA)转化小麦及影响转化效率的因素》一文中研究指出用LBA4404/pCDH,Agl1/pUNN2和AglO(无质粒)3种菌株分别转化小麦品种济南177、99P、核生3号幼胚诱导的愈伤组织以及济南177的幼胚.其中以胚性愈伤组织为外植体,获得了转基因植株.PCR和PCR-Southern分析证实转化植株中包含了外源基因.通过染色体分析,发现胚性愈伤组织在农杆菌LBA4404侵染后形成的染色体削减比经Agl1侵染和未经感染的对照形成的染色体削减程度更大,甚至发现较多的染色体断片.分析了农杆菌菌株,材料的基因型,外植体类型,培养时间和温度以及筛选的时间和周期对于转化效率的影响.(本文来源于《山东大学学报(理学版)》期刊2004年03期)

王春明[7](2004)在《大肠杆菌胆碱脱氢酶基因在毕氏酵母(pichia pastoris)中的表达》一文中研究指出甜菜碱作为参与生物渗透调节的优良保护剂受到人们的广泛关注,最近甜菜碱的甲基供体功能也得到了临床和生化实验的进一步验证,甜菜碱对肠胃的渗透调节功能、甲基供体功能以及抗球虫病和提高饲料的利用率的特性,使其成为良好的饲料添加剂。本实验采用基因工程的方法,在毕氏酵母(Pichia pastoris)中表达大肠杆菌(Escherichia coli)的CDH酶(choline dehydrogenase),以期获得能够催化甜菜碱合成的基因工程化的益生酵母菌株。 本实验以E. coli基因组DNA为模板,利用nested PCR扩增得到CDH的编码基因betA,连接入pUC-T vector,与已报道序列比较发现存在6个碱基序列的差异,编码的氨基酸在3个位点存在差异,但疏水性相差不大。 选择能够在毕氏酵母中特异表达的载体pPIC9K,构建了可以在E. coli和毕氏酵母中表达的穿梭质粒,转化E. coli后提取质粒并用sacI酶线性化,750V/4.3ms电击转化毕氏酵母,在MGY(Minimal Glycerol Medium)培养基上筛选得到转betA的酵母菌,PCR鉴定结果显示转化的betA基因整合进入酵母基因组中。 转化菌株经甲醇诱导后能够表达CDH并分泌到细胞外。CDH经50%的硫酸铵沉淀后,SDS-PAGE电泳可以检测到表达的CDH;体外用PMS-Cytc作为电子受体检测到CDH酶的活性明显高于对照菌株;HPLC也检测到CDH催化的以胆碱为底物合成的甜菜碱。 结果表明,转betA的毕氏酵母能够表达CDH,并能将合成的具有活性的CDH分泌到细胞外;体外实验显示有胆碱存在时,CDH可以催化甜菜碱的合成。我们获得了成功转化betA的酵母菌株。(本文来源于《山东师范大学》期刊2004-04-28)

黄圣兵[8](2003)在《大鼠肝线粒体胆碱脱氢酶与电子传递黄素蛋白—泛醌氧化还原酶的研究》一文中研究指出大鼠肝线粒体胆碱脱氢酶(CHDH,EC1.1.99.1)位于线粒体内膜,由一条多肽链构成,含FAD 和铁硫中心两个氧化还原中心。本文从测定胆碱脱氢酶的N-末端氨基酸序列着手,进而克隆了全长cDNA,它包含了一个开放阅读框,编码一个599 氨基酸(64KD)的蛋白质前体。但是从cDNA 推导的蛋白质序列难以推断出这个蛋白质前体在线粒体内的剪接位点及其信号肽的序列。根据测定的成熟CHDH 的N-末端序列,发现剪接位点的-1 位为A(丙氨酸),-3 位为S(丝氨酸),符合IMP 的剪接要求,表明蛋白质前体可能于膜间间隙被剪接。激光共聚焦成像实验显示了在NIH-3T3 细胞中外源表达的胆碱脱氢酶前体基因的产物最终定位于线粒体。表达于酿酒酵母中的重组CHDH 前体蛋白基因的产物显示催化胆碱脱氢的活性并富集于酵母的线粒体内膜组分,表明成熟CHDH 定位在线粒体内膜上而且在酵母表达系统中FAD 和铁硫中心被正确地组装到蛋白上。免疫印迹实验表明胆碱脱氢酶在大鼠肝脏和肾脏有较高的表达量。(本文来源于《中国科学院研究生院(上海生命科学研究院)》期刊2003-09-01)

王淑芳,王峻岭,赵彦修,张慧[9](2001)在《胆碱脱氢酶基因的转化及转基因番茄耐盐性的鉴定》一文中研究指出采用PCR方法从E .coliTG1菌株中扩增得到胆碱脱氢酶 (cholinedehydrogenase ,CDH)基因 (betA) ,其氨基酸编码序列与文献中的资料一致 ,且能在原核表达载体pBV2 2 1中正确表达 ,并表现出活性。构建该基因的植物表达框架pRbA ,经农杆菌介导叶圆盘法转化番茄 ,对转基因番茄的PCR、Southern、RT PCR分析证实betA已整合到番茄基因组中 ,转基因番茄的耐盐性高于对照番茄。(本文来源于《植物生理学报》期刊2001年03期)

傅晓红,林其谁[10](1997)在《胆碱脱氢酶的N端氨基酸序列测定》一文中研究指出采用SDS PAGE凝胶电泳及电转移方法 ,将增溶的鼠肝线粒体胆碱脱氢酶进一步纯化 ,且去掉增溶线粒体胆碱脱氢酶 (CDH)中所包含的大部分磷脂、去垢剂、辅基FAD等 .对进一步纯化的CDH进行了N端氨基酸序列测定 ,得到CDHN端 1 0个氨基酸残基序列为VAAAAGGGKD ,这一部分序列与小鼠CO5蛋白 (即补体C5的前体蛋白 )、大鼠腺苷酰 (基 )环化酶 (adenylylcyclase)、人甾体结合蛋白 (oxysterol bindingprotein)有很高同源性 ,但与大肠杆菌CDH并无明显的同源性(本文来源于《生物化学与生物物理进展》期刊1997年02期)

胆碱脱氢酶论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

以小黑杨(Populus simonii×P.nigra)花粉植株叶片为外植体,用根癌农杆菌介导法将胆碱脱氢酶基因(betA)导入其中,将获得的4株卡那霉素抗性转基因株系进行PCR检测,结果均为阳性。用荧光定量PCR对转基因株系的betA基因转录结果检测表明,4个转基因株系均已表达外源基因,但表达量有差异。对获得的4株转基因株系及对照进行NaCl胁迫处理,当NaCl浓度为0.55%时,非转基因小黑杨花粉植株生根率为0,转基因株系生根率为80%~100%;在NaCl为0.70%~0.80%时,则转基因株系生根率也为0。4个转基因株系的甜菜碱含量显着高于未转基因对照,说明betA基因的导入提高了转基因株系的耐盐性。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

胆碱脱氢酶论文参考文献

[1].何冬华,齐文静,纪婧琦,戴美学,夏志洁.CODEHOP法设计引物克隆色盐杆菌ST307胆碱脱氢酶基因及其序列分析[J].食品与药品.2012

[2].刘桂丰,杨传平,程贵兰,白爽,于影.以胆碱脱氢酶基因对小黑杨花粉植株的遗传转化[C].第六届全国林木遗传育种大会论文集.2008

[3].吕素莲,张可炜,张举仁.转胆碱脱氢酶基因棉花的耐旱性研究[C].2006年中国植物逆境生理生态与分子生物学学术研讨会论文摘要汇编.2006

[4].刘桂丰,程贵兰,姜静,白爽,于影.以胆碱脱氢酶基因对小黑杨花粉植株的遗传转化[J].植物生理与分子生物学学报.2006

[5].李佳忠,王春明,袁金铎,安利国.一种大肠杆菌胆碱脱氢酶活性的测定方法[J].山东科学.2006

[6].薛哲勇,贺晨霞,孙松,夏光敏.农杆菌介导的胆碱脱氢酶基因(betA)转化小麦及影响转化效率的因素[J].山东大学学报(理学版).2004

[7].王春明.大肠杆菌胆碱脱氢酶基因在毕氏酵母(pichiapastoris)中的表达[D].山东师范大学.2004

[8].黄圣兵.大鼠肝线粒体胆碱脱氢酶与电子传递黄素蛋白—泛醌氧化还原酶的研究[D].中国科学院研究生院(上海生命科学研究院).2003

[9].王淑芳,王峻岭,赵彦修,张慧.胆碱脱氢酶基因的转化及转基因番茄耐盐性的鉴定[J].植物生理学报.2001

[10].傅晓红,林其谁.胆碱脱氢酶的N端氨基酸序列测定[J].生物化学与生物物理进展.1997

论文知识图

聚类分析I.lacteusCD2于不同体系中参...一9菌落pCR电泳图葡萄糖氧化酶基因goxC保守结构域分析和WF-GFP表达规律一致的lncRN...质粒结构示意图Bet及其在蛋氨酸循环中的转甲基作用

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