刘升云[1]2004年在《阿司匹林和NS-398对胃癌SGC7901细胞增殖和血管生成相关因素的体内、外实验研究》文中研究说明血管生成是原发性肿瘤生长、转移及浸润到邻近正常组织的重要环节。实验研究及临床资料表明，肿瘤的生长和转移都依赖于血管生成。与正常血管相比，肿瘤新生血管结构迂曲，血流不规则，通透性增加。免疫组织化学法可检测肿瘤内微血管密度(microvessel density，MVD)，其程度可反映肿瘤细胞及其支持基质的血管生成活性。大量研究表明，血管生成活性增强与多种恶性肿瘤的不良预后有关，包括胃癌。血管生成是一复杂的过程，是促血管生成因子和血管稳定因子共同作用的结果，涉及多种途径，最终导致内皮细胞增殖、分化，组成一有功能的血管网。而抑制血管生成过程、从而阻止肿瘤生长已成为实体瘤治疗学研究的新热点。 环氧合酶(cyclooxyengase，COX)是花生四烯酸转化为前列腺素的限速酶，有二种同功酶，即环氧合酶1(COX-1)和环氧合酶2(COX-2)。COX-1为一固有酶，调节控制生理功能的多种前列腺素产生，如保护胃粘膜、调节肾血流、维持血小板的聚集功能等。COX-2为一诱导酶，炎症、丝裂原刺激、生长因子和细胞因子等信号可诱导其产生，从而使前列腺素在炎症及肿瘤部位的合成增加。大量研究表明，COX-2蛋白在结肠癌、食管癌、胃癌、乳腺癌、膀胱癌及前列腺癌中可过度表达。同时，有少量报道表明，在人类结直肠癌和子宫内膜癌COX-2可通过上调血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)而促进肿瘤血管生成，表明COX-2可能对肿瘤的进展起一定作用。 很多证据显示，非甾体类抗炎药(nonsteroidal antiinflammatory drugs，NSAIDs)特别是阿司匹林可减少结直肠癌和腺瘤的风险。流行病学研究和动物实验已经证明其 阿司匹林和NS一398对胃癌SGC7901细胞增殖和血管生成相关因素的体内、外实验研究抗肿瘤作用，随机试验表明舒林酸和塞莱昔布可使家族性腺瘤性息肉病患者的腺瘤消退。人群研究及病例对照调查研究也表明，口服阿司匹林和其它NSAIDs可降低胃癌的发生率。NSAIDs降低胃癌风险的机制尚不清楚，抗血管形成作用可能在其中起一定作用。 胃癌是中国最常见的恶性肿瘤之一。胃切除手术联合化疗和/或放疗是治疗胃癌的常规手段。迄今为止，阿司匹林对胃癌增殖及血管形成影响的研究尚未见文献报道。仅有少数有关选择性COX一2抑制剂对胃癌细胞凋亡、血管生成和增殖的研究。本研究拟探讨阿司匹林和选择性COX一2抑制剂NS一398对胃癌SGC7901细胞体外增殖的影响，同时观察对COX一2和VEGF的抑制作用。用免疫组织化学方法观察胃癌裸鼠移植瘤的微血管密度，以探讨阿司匹林和NS一398对胃癌血管生成的影响。本研究分为以下叁部分:第1部分阿司匹林及NS一398对胃癌SGC7901细胞增殖及细胞周期的影响 方法: 1.采用噬哩蓝(MTT)法观察阿司匹林和NS一398对体外培养胃癌SGC7901细胞 增殖的影响。 2.流式细胞仪(F CM)检测阿司匹林和NS一398对SGC7901细胞周期的作用。 3.统计学处理:应用SPSS 10.0统计软件包，不同药物浓度、不同时间对变量 影响采用双因素方差分析，均数间两两比较采用LSD法或DuImett’s法。以 。二0.05作为检验水准。 结果 1.MTT检测表明，阿司匹林呈时间和浓度依赖性对SGC7901细胞活性产生抑 制，吸光度值明显下降(F时间=109.81，p<0.0001。F药物雄=30.25，p<0.0001)。 阿司匹林浓度为o.lmol几时，24，48和72h抑制率分别为7.1%，10.4%和 24.5%;浓度为1 .ommol/L时抑制率分别为7，9%，15.5%和50.5%;浓度为 8.ommol几时抑制率分别为10.2%，23.6%和81.3%。 2.MTT检测表明，NS一398呈时间和浓度依赖性对SGC7901细胞活性产生抑制， 吸光度值明显下降(F时间=131.01，P<0.0001OF药物雄=55.50，P<0.0001)。NS一398 浓度为10协mol几时，NS一398作用24，48和72h，SGC7901细胞的抑制率分 别为3.8%，12.0%和19.8%;浓度为50林mol几时抑制率分别为5.1%，17.4% 阿司匹林和NS一398对胃癌SGC7901细胞增殖和血管生成相关因素的体内、外实验研究 和35.8%;浓度为100“mol几时抑制率分别为12.4%，28.1%和51.1%。 3.流式细胞仪检测表明，经终浓度为0.lmmol/L，1.ommol/L，8.Ommol/L阿司匹 林处理24小时后，GO/Gl期细胞比例各为62.5士1.7，64.7士1.9，67.6士1.8， 显着高于对照组护<0.0001)。经终浓度为10林 mol/L，50砰mol/L，100林mol/L NS一398处理24小时后，GO/G1期细胞比例各为59.8士1.9，69.3士1.1，72.1 士2.2，显着高于对照组(P<0.0001)。第2部分阿司匹林和Ns一395对人胃癌SGC7901细胞体外pGEZ、CoX一2、VEGF的作用 方法 1.采用ELISA法测定药物作用前后培养液中PGE:水平的变化。 2.采用RT一PCR技术测定药物作用前后细胞中COX一2 mRNA的表达。 3.采用免疫印迹(Western blot)法测定细胞内COX一2和VEGF的蛋白表达变化。 4.统计学处理:应用SPSS 10.0统计软件包，采用t检验对计量资料进行统计 学分析。COX一2和PGEZ、COX一2和VEGF进行相关分析。以a
王红静[2]2005年在《非甾体类抗炎药Celecoxib对卵巢癌生长抑制作用的研究》文中指出目的:了解非甾体类抗炎药Celecoxib对人卵巢癌SKOV3细胞生长的抑制作用,以及对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响和毒副作用,并初步探讨其抗肿瘤作用机制,评价Celecoxib作为卵巢癌辅助治疗和化学预防新方法的可行性。 方法: 1.采用MTT法、流式细胞技术(flow cytometry,FCM)和缺口末端标记实验(TdT-mediated deoxyuridine triphosphate-biotin nick end labling,TUNEL),检测不同浓度(10~(-7)mmol/L～10~(-3)mmol/L)的特异性COX-2抑制剂Celecoxib对人卵巢癌SKOV3细胞株增殖和凋亡的影响,同时与不同浓度(10~(-5)mmol/L～10~(-1)mmol/L)的非选择性COX-2抑制剂Aspirin相比较。 2.建立人卵巢癌SKOV3细胞裸鼠皮下移植瘤模型,随机分成4组:对照组、实验1组(Celecoxib10mg/kg/day)、实验2组(Celecoxib25mg/kg/day)、实验3组(Celecoxib50mg/kg/day)。实验组连续口服给药8周,对照组饮用等容积灭菌蒸馏水,末次用药24小时后处
彭利[3]2005年在《环氧合酶-2及NS-398对肝细胞癌凋亡、血管生成的作用机制研究》文中认为目的：肝细胞癌(The hepatocellular carcinoma，HCC)是世界上死亡率最高的恶性肿瘤，但是关于肝细胞癌发生的确切分子机制还不清楚，目前仍然没有有效的预防措施，因此研究肝细胞癌的发病机理以及探讨新的预防措施具有极其重要的临床意义。 流行病学资料表明，使用非甾体类抗炎药(nonsteroidal anti-inflammatory drugs，NSAIDs)可以降低结肠癌发生率的40％-50％。大量临床研究表明，NSAIDs能抑制结肠息肉及某些肿瘤的生长。研究认为NSAIDs抗肿瘤作用主要与环氧合酶(cyclooxygenase，COX)有关。COX又称前列腺素合成酶，是催化花生四烯酸转化成前列腺素类物质(PGs)和血栓素的关键酶，环氧合酶有两种异构酶：COX-1和COX-2。COX-1被认为是稳定保守的看家基因，在大多数组织中呈持续表达，介导机体各种生理功能的PGs合成(如胃肠粘膜和肾等)。COX-2被认为在大多数正常组织中不表达或低表达，但受到生长因子、细胞因子和促癌剂等因素的刺激时，COX-2蛋白表达急剧增加，可产生对丝裂原刺激作用产生反应的PGs。近年来研究表明，环氧合酶-2(cyclooxygenase，COX-2)在前列腺癌、乳腺癌、胃癌、胰腺癌、大肠癌、肺癌和头颈部的鳞状细胞癌中过度表达，与癌细胞增殖、分化、凋亡和肿瘤生成有关。新近研究表明，COX-2的表达与肿瘤微血管生成有关。肿瘤微血管生成是肿瘤生长所必需的，推测是由COX-2催化花生四烯酸代谢产生PGs和诱导促肿瘤微血管生成因子的表达来实现的。 已有报道COX-2的过度表达与肝细胞癌生成有关。本研究拟检测肝细胞癌组织中COX-2的蛋白表达与凋亡、血管生成相关因子表达之间的关系，同时应用COX-2特异性抑制剂NS-398，对肝癌细胞株和肝癌裸鼠移植瘤进行药物干预，进一步在体外、体内实验中探讨COX-2对肝细胞癌增殖、凋亡和肿瘤血管生成的影响。 方法：1对肝细胞癌组织的检测 45例肝细胞癌新鲜手术切除标本
刘改芳[4]2006年在《幽门螺杆菌促癌与胃癌化学预防机制的实验研究》文中研究说明目的:流行病学、组织病理和动物实验研究显示, H.prlori感染与胃癌发生相关,因此世界卫生组织属下的国际癌症研究机构将其定为胃癌的肯定致癌原,但其确切的致癌机制仍在研究中。研究表明, H.prlori感染可上调COX-2的表达,H.prlori可能通过COX-2途径导致或促进胃癌的发生,但其具体的分子机制尚需进一步研究;在H.prlori感染通过COX-2途径参与胃癌的演进过程中cagA~+与cagA~- H.prlori的作用是否不同现有报道并不一致。另有研究表明COX-2表达强度与肝细胞癌分化程度有关,在胃癌组织COX-2表达强度与胃癌分化程度如何,目前尚不清楚。H.prlori感染在不同分化程度胃癌发生、发展过程中的促癌作用是否不同亦未见报道,因此,通过本研究进一步了解H.prlori通过COX-2途径致癌的分子机制、cagA的作用以及H.prlori促癌与胃癌的分化程度是否有关。研究消化系统肿瘤的化学预防,并通过预防来降低其发病率和死亡率,也是消化病学研究者及临床工作者所面临的任务之一。肿瘤发生发展过程中的关键步骤或限速酶都可作为肿瘤化学预防的作用靶点。流行病学调查、动物实验和临床研究发现NSAIDs或COX-2抑制剂能减少人类和实验动物大肠癌的发生,能减少家族性结肠息肉病患者息肉的数量和大小,但对胃癌的研究相对较少。另研究显示选择性COX-2抑制剂还能增加化疗药的敏感性,提高化疗药的作用,为此,通过本研究拟进一步了解COX-2抑制剂及其联合化疗药对胃癌的化学预防作用以及在不同分化程度胃癌中作用情况并进一步探讨其作用机制,最终为胃癌的化学治疗和预防提供更为有利的实验依据。方法和结果:1 cagA~+与cagA~- H.prlori培养滤液对不同分化程度胃癌细胞COX-2mRNA及PGE_2的影响选取和制备cagA~+与cagA~-H.prlori培养滤液,并以肉汤滤液作为对照,分别与人高分化癌MKN28、低分化胃MKN45和未分化癌BGC823细胞系共培养24h,应用RT-PCR方法检测各细胞系COX-2 mRNA的表达,
参考文献：
[1]. 阿司匹林和NS-398对胃癌SGC7901细胞增殖和血管生成相关因素的体内、外实验研究[D]. 刘升云. 郑州大学. 2004
[2]. 非甾体类抗炎药Celecoxib对卵巢癌生长抑制作用的研究[D]. 王红静. 四川大学. 2005
[3]. 环氧合酶-2及NS-398对肝细胞癌凋亡、血管生成的作用机制研究[D]. 彭利. 河北医科大学. 2005
[4]. 幽门螺杆菌促癌与胃癌化学预防机制的实验研究[D]. 刘改芳. 河北医科大学. 2006