白酒杂醇油酯化酶的分子构建

白酒杂醇油酯化酶的分子构建

论文摘要

为降低白酒中杂醇油含量,构建高活性杂醇油酯化酶,酯化杂醇油为较高沸点的酯从而降低酒体中杂醇油含量。该研究利用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增酯化酶基因,酶切、以其为模板,进行易错聚合酶链式反应,连接、转化大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α,筛选酶活显著提升的酯化酶。结果表明,酯化酶氨基酸中146位缬氨酸突变为天冬氨酸,198位苏氨酸突变为异亮氨酸,376位天冬氨酸突变为谷氨酸。初始酯化酶和构建酯化酶合成乙酸正丙酯、乙酸异丁酯、乙酸异戊酯酶活分别为10.83 U/L、24.72 U/L,2.58 U/L、6.24 U/L,3.83 U/L、8.78 U/L,构建酯化酶酶活分别是初始酯化酶酶活的2.28倍、2.42倍、2.29倍。构建杂醇油酯化酶在白酒生产中具有极大的应用潜力。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与试剂
  •     1.1.1 菌株
  •     1.1.2 化学试剂
  •     1.1.3 培养基
  •   1.2 仪器与设备
  •   1.3 方法
  •     1.3.1 基因克隆
  •     1.3.2 质粒构建
  •     1.3.3 易错PCR
  •     1.3.4 转化和筛选
  •     1.3.5 测序
  •     1.3.6 诱导表达和酯化酶酶液制备
  •     1.3.7 分析检测
  • 2 结果与分析
  •   2.1 Candida parapsilosis酯化酶基因扩增
  •   2.2 杂醇油酯化酶易错PCR
  •   2.3 筛选转化子产生的酯化酶的酯化性能
  •   2.4 高活性杂醇油酯化酶的氨基酸序列
  • 3 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 张瑞瑞

    关键词: 白酒,杂醇油,酯化酶,分子构建

    来源: 中国酿造 2019年05期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 轻工业手工业

    单位: 湖北工业大学马克思主义学院湖北省非物质文化遗产研究中心

    基金: 湖北省非物质文化遗产研究中心2018年开放基金项目(HGFY20180101,HGFY20180302),湖北省教育厅2018人文社科青年项目(18Q055)

    分类号: TS262.3

    页码: 86-89

    总页数: 4

    文件大小: 1420K

    下载量: 88

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