成人粪便中长双歧杆菌长亚种的分离鉴定及多位点序列分型分析

成人粪便中长双歧杆菌长亚种的分离鉴定及多位点序列分型分析

论文摘要

为了对成人粪便中分离的长双歧杆菌长亚种进行多位点序列分型分析,采用改良MRS培养基从健康成人粪便中分离的长双歧杆菌长亚种,通过生理生化试验结合16S rDNA和热应激蛋白60(heat-shock protein,hsp60)同源性分析鉴定分离株,利用同源性分析及多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)技术进一步分析长双歧杆菌长亚种的基因多态性。从12个健康成人体内分离得到24株厌氧的细菌菌株,经形态学观察、生理生化试验、16S rDNA及hsp60同源性分析发现,其中14株分离株为长双歧杆菌长亚种(Bifidobacterium longum subsp.longum)。MLST结果表明:14株长双歧杆菌长亚种可分为10种基因型,且均与Bifidobacterium longum subsp.longum ATCC 15707为不同基因型。健康成人粪便中分离的长双歧杆菌长亚种具有较大的基因多态性。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与仪器
  •   1.2 实验方法
  •     1.2.1 粪便采集与菌株的分离纯化
  •       1.2.1.1 粪便采集
  •       1.2.1.2 菌株的分离纯化
  •     1.2.2 生理生化试验
  •     1.2.3 分离菌株基因同源性分析
  •       1.2.3.1 基因组DNA的提取
  •       1.2.3.2 分离菌株16S rDNA序列同源性分析
  •       1.2.3.3 分离菌株hsp60同源性分析
  •       1.2.3.4 PCR扩增产物分析
  •       1.2.3.5 分离株多位点序列分型分析
  • 2 结果与分析
  •   2.1 分离菌株形态及生理生化试验结果
  •     2.1.1 分离菌株的菌落菌体形态
  •     2.1.2 生理生化试验结果
  •   2.2 分离菌株基因同源性分析
  •     2.2.1 16S rDNA同源性分析
  •     2.2.2 hsp60同源性分析
  •   2.3 长双歧杆菌长亚种MLST分析
  •     2.3.1 看家基因电泳及测序结果
  •     2.3.2 长双歧杆菌长亚种的看家基因分型
  •     2.3.3 长双歧杆菌长亚种等位基因系统发育树的构建
  • 3 讨论
  • 4 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 刘瑞娜,周雪,梁玉,贺菁,赵鹏昊,赵桉,孟祥晨

    关键词: 成人粪便,长双歧杆菌长亚种,分离鉴定,热应激蛋白,多位点序列分型,序列型

    来源: 食品工业科技 2019年21期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

    专业: 生物学,轻工业手工业

    单位: 东北农业大学乳品科学教育部重点实验室

    基金: 国家重点研发计划(2017YFD0400304)

    分类号: TS201.3

    DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.21.011

    页码: 65-71

    总页数: 7

    文件大小: 797K

    下载量: 301

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