多克隆通用抗体论文-许啸晨

多克隆通用抗体论文-许啸晨

导读:本文包含了多克隆通用抗体论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:2,4-D,拟除虫菊酯,酶联免疫分析法,荧光淬灭法

多克隆通用抗体论文文献综述

许啸晨[1](2012)在《农药2,4-D与通用Ⅱ型拟除虫菊酯完全抗原和多克隆抗体制备》一文中研究指出随着农业产业的快速发展,农药杀虫剂与除草剂等降低虫害和提高产量农药产品在农业领域中广泛应用。由于农药使用不当和过量使用,导致过量的农药残留而引发食品安全问题,引起了全世界食品安全领域的广泛重视。所以美国、欧盟等发达国家相继严格限用和禁止使用农药,从而产生对农残检测的需求。而传统的农药残留分析方法需要复杂的仪器和专业技术人员,不能满足在大批量检测的要求。因此建立高效、灵敏的残留分析方法具有重要意义。因此,本文利用酶联免疫分析法(Elisa)技术,建立2,4-D与通用Ⅱ型拟除虫菊酯检测Elisa检测体系。对采用两种2,4-D合成方法免疫原注射4只新西兰兔,抗2,4-D兔血清采用直接Elisa法测定效价,并对其中对3号兔血清进行间接Elisa竞争法测定。结果表明采用混合酸酐法的3号兔抗2,4-D兔血清半抑制率分别为半数最大抑制浓度为121.9ng/ml(IC50=121.9ng/ml)。对不同免疫原免疫,效价不同的抗2,4-D血清进行荧光淬灭检测,获得抗体结合常数为3529.393mol/l和252.8716mol/l。对2只新西兰兔采用DCC法合成通用Ⅱ型拟除虫菊酯免疫原,获得通用Ⅱ型拟除虫菊酯抗血清,采用通用Ⅱ型拟除虫菊酯兔抗血清采用直接Elisa法测定效价,结果为1024000,间接竞争法测定IC50对氯氰菊酯为0.313μg/ml,氰戊菊酯IC50为0.374μg/ml,氰氟菊酯IC50为0.354μg/ml,氯菊酯IC50为0.375μg/ml。(本文来源于《上海师范大学》期刊2012-04-01)

独军政,常惠芸,高闪电,王光华,王景锋[2](2007)在《牛口蹄疫病毒受体通用亚基αv配体结合域的原核表达和多克隆抗体制备》一文中研究指出目的:利用原核细胞表达牛口蹄疫病毒受体通用亚基整联蛋白αv的配体结合域(LBD)片段,分离纯化目的蛋白后制备兔多克隆抗体。方法:以含有牛整联蛋白全长cDNA的质粒为模板PCR扩增得到位于αv成熟肽氨基端的LBD基因片段,经酶切消化处理后,与同样酶切处理的原核表达载体pPRoEXTMHTb相连,构建原核表达质粒pPRo/αvLBD,测序确认读码框正确后,将其转化感受态细胞BL21(DE3),以IPTG诱导表达αvLBD蛋白。通过SDS-PAGE鉴定后提取包涵体,以电泳分离纯化的重组蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体。通过ELISA和Western blot鉴定血清效价和特异性。结果:成功构建了pPRo/αvLBD原核表达载体,实现了重组αvLBD蛋白在大肠杆菌中的高效表达,SDS-PAGE显示其Mr约为40000,主要以包涵体形式存在于菌体中。制备的兔多克隆抗体效价达1∶25600以上。以Western blot检测,该血清可与目的蛋白发生特异性反应,证明其具有良好的免疫原性。结论:实现了牛口蹄疫病毒受体通用亚基αvLBD的高效表达和高效价多克隆抗体的制备,为深入研究整联蛋白αv在口蹄疫病毒致病过程中的作用奠定基础。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2007年10期)

多克隆通用抗体论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的:利用原核细胞表达牛口蹄疫病毒受体通用亚基整联蛋白αv的配体结合域(LBD)片段,分离纯化目的蛋白后制备兔多克隆抗体。方法:以含有牛整联蛋白全长cDNA的质粒为模板PCR扩增得到位于αv成熟肽氨基端的LBD基因片段,经酶切消化处理后,与同样酶切处理的原核表达载体pPRoEXTMHTb相连,构建原核表达质粒pPRo/αvLBD,测序确认读码框正确后,将其转化感受态细胞BL21(DE3),以IPTG诱导表达αvLBD蛋白。通过SDS-PAGE鉴定后提取包涵体,以电泳分离纯化的重组蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体。通过ELISA和Western blot鉴定血清效价和特异性。结果:成功构建了pPRo/αvLBD原核表达载体,实现了重组αvLBD蛋白在大肠杆菌中的高效表达,SDS-PAGE显示其Mr约为40000,主要以包涵体形式存在于菌体中。制备的兔多克隆抗体效价达1∶25600以上。以Western blot检测,该血清可与目的蛋白发生特异性反应,证明其具有良好的免疫原性。结论:实现了牛口蹄疫病毒受体通用亚基αvLBD的高效表达和高效价多克隆抗体的制备,为深入研究整联蛋白αv在口蹄疫病毒致病过程中的作用奠定基础。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

多克隆通用抗体论文参考文献

[1].许啸晨.农药2,4-D与通用Ⅱ型拟除虫菊酯完全抗原和多克隆抗体制备[D].上海师范大学.2012

[2].独军政,常惠芸,高闪电,王光华,王景锋.牛口蹄疫病毒受体通用亚基αv配体结合域的原核表达和多克隆抗体制备[J].细胞与分子免疫学杂志.2007

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