转基因鼠论文_原丽,韩玲娜,常永丽,张翠英

导读:本文包含了转基因鼠论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:阿尔,淀粉,转基因,蛋白,因子,前脑,电针。

转基因鼠论文文献综述

原丽,韩玲娜,常永丽,张翠英^[1]（2019）在《肠促胰岛素类似物拮抗APP/PS1转基因鼠认知功能损伤的研究》一文中研究指出目的:观察探讨肠促胰岛素类似物DAla2GIP-Glu-PAL对APP/PS1转基因小鼠认知功能损伤的神经保护效应。方法:9月龄雄性APP/PS1小鼠与同窝野生型小鼠(WT)随机分为:WT-PBS组、APP/PS1-PBS组、WT-DAla2GIP-Glu-PAL组和APP/PS1-DAla2GIP-Glu-PAL组。各组小鼠连续腹腔注射5μmol/L DAla2GIP-Glu-PAL 0.2 mL或同等体积0.01 mol/L PBS 21 d并持续至Morris行为学实验结束,进行免疫荧光、Western blot和ELISA实验。结果:Morris水迷宫定位航行实验后3～5 d,与WT-PBS组相比,APP/PS1-PBS组小鼠逃逸潜伏期明显延长(P<0.01);而APP/PS1-DAla2GIP-Glu-PAL组小鼠第4～5天的逃逸潜伏期小于APP/PS1-PBS组小鼠(P<0.01)。空间探索实验,APP/PS1-PBS组小鼠目标象限游泳时间百分比显着小于WT-PBS组小鼠(P<0.01);DAla2GIP-Glu-PAL治疗后,APP/PS1转基因小鼠目标象限游泳时间百分比明显升高(P<0.01);小鼠海马脑区Aβ和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光强度及Aβ蛋白含量的检测中,APP/PS1-PBS组明显高于WT-PBS组(P<0.01),APP/PS1-DAla2GIP-Glu-PAL组明显低于APP/PS1-PBS组(P<0.01);ELISA实验中,与WT-PBS组比较,APP/PS1-PBS组小鼠海马脑区IL-1β和TNF-α含量明显增高,胰岛素降解酶含量显着下降(P<0.01),与APP/PS1-PBS组比较,APP/PS1-DAla2GIP-Glu-PAL组IL-1β和TNF-α含量明显下降,胰岛素降解酶含量明显升高(P<0.01)。结论:DAla2GIP-Glu-PAL通过抑制海马脑区Aβ沉积,星形胶质细胞增生和炎症因子分泌,以及上调胰岛素降解酶含量来拮抗APP/PS1小鼠认知功能伤害。(本文来源于《中国临床药理学与治疗学》期刊2019年07期）

梁婵婵,陈燕春,刘金梦,张雅雯,王巧真^[2]（2019）在《自噬相关基因4a在超氧化物歧化酶1- G93A突变型肌萎缩侧索硬化症转基因鼠大脑皮层和纹状体的表达》一文中研究指出目的检测自噬相关基因(Atg)4a在不同时期超氧化物歧化酶(SOD)1-G93A突变型肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因鼠大脑皮层和纹状体中表达以探究Atg4a与ALS发病的关系。方法 SOD1-G93A突变型ALS转基因鼠和同窝野生型WT鼠于95 d(发病早期)、108 d(中期)和122 d(晚期)分别取材,运用定量实时聚合酶链反应(qRT-PCR)检测大脑皮层和纹状体中Atg4a mRNA水平,运用Western印迹技术检测蛋白水平,运用免疫荧光双标技术进行形态学检测。结果与WT鼠相比,ALS鼠大脑皮层中Atg4a mRNA和蛋白在发病95 d和108 d表达上调,122 d下调,而纹状体中Atg4a mRNA在95 d、108 d和122 d均上调,Atg4a蛋白则在95 d、108 d表达上调,122 d下调,差异均有统计学意义(P<0.05)。Atg4a在大脑皮层和纹状体中与神经元共表达。108 d,与WT鼠相比,ALS鼠大脑皮层和纹状体中Atg4a免疫反应性均显着增强(P<0.05)。结论 Atg4a在大脑皮层和纹状体中的异常表达与SOD1-G93A突变型ALS转基因鼠发病关系密切。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2019年10期）

朱清,陈艳,龙大宏,胡楠,姜荣荣^[3]（2019）在《EGFP示踪NSCs海马移植对APP/PS1转基因鼠认知功能及基底前脑胆碱能神经元的影响》一文中研究指出目的观察神经干细胞(NSCs)移植对APP/PS1双转基因小鼠认知功能及基底前脑胆碱能神经元的影响,并探讨其可能机制。方法体外分离培养EGFP转基因小鼠胎脑来源NSCs,24只12月龄雄性APP/PS1双转基因小鼠随机分入实验组(Tg-NSCs组)和AD对照组(Tg-AD组),每组12只,12只同月龄雄性野生型小鼠作为正常对照组(WT组),Tg-NSCs组进行EGFP示踪NSCs移植,其余两组进行等量磷酸盐缓冲液注射,移植部位为双侧海马区。移植4周后采用Morris水迷宫检测叁组小鼠学习记忆功能,免疫荧光组化法和Western blot检测基底前脑胆碱能神经元的变化情况;Q-PCR检测海马神经营养因子NGF、BDNF、NT3的mRNA水平的变化。结果①体外悬浮培养的神经球表达EGFP阳性,免疫荧光检测显示神经干细胞特异性标志物Nestin阳性。移植4周后,可见EGFP阳性NSCs在海马注射移植部位存活并向胼胝体,海马深部和齿状回迁移,基底前脑未见EGFP阳性细胞。②与Tg-AD组相比,Tg-NSCs组基底前脑ChAT神经元及蛋白水平均增加(P<0.05),但ChAT蛋白表达低于WT组水平(P<0.05)。③Tg-NSCs组海马区神经营养因子NGF、BDNF、NT3的mRNA表达增加,高于Tg-AD组(P<0.05),且与WT组相比差异无统计学意义(P>0.05)。④水迷宫结果显示Tg-NSCs组学习记忆功能改善优于Tg-AD组(P<0.05),但仍低于WT组水平(P<0.05)。结论 NSCs海马移植并不能对该转基因鼠基底前脑胆碱能神经元丢失产生直接的替代与补充,可能通过分泌神经营养因子对基底前脑胆碱能神经元起到保护作用,从而促进其认知功能的恢复。(本文来源于《解剖学研究》期刊2019年02期）

陈新,吴慧颖,邢晓娜^[4]（2019）在《DNA疫苗对APP/PS1转基因鼠免疫反应类型及脑内炎症反应的影响》一文中研究指出目的探讨DNA疫苗p(Aβ3-10)10-mIL-4免疫阿尔茨海默病转基因鼠(APP/PS1)免疫反应类型及对脑内炎症反应的影响。方法构建DNA疫苗p(Aβ3-10)10-mIL-4,用其免疫APP/PS1转基因鼠,Aβ42肽及pcDNA3.1(+)作为对照组。ELISA法检测免疫后转基因鼠脾细胞培养上清中白细胞介素-4(IL-4)及γ干扰素(IFN-γ)的含量,免疫荧光检测小鼠脑内老年斑及小胶质细胞。结果 Aβ42组及p(Aβ3-10)10-mIL-4组的IL-4的含量均明显高于pcDNA3.1(+)组(P<0.01),但是两组比较无显着差异(P>0.05)。Aβ42组的IFN-γ的含量明显高于p(Aβ3-10)10-mIL-4组及pcDNA3.1(+)组(P<0.01),而p(Aβ3-10)10-mIL-4组和pcDNA3.1(+)组比较没有显着差别(P>0.05,)。Aβ42组及p(Aβ3-10)10-mIL-4组脑组织中老年斑及小胶质细胞与pcDNA3.1(+)组相比明显减少。结论DNA疫苗p(Aβ3-10)10-mIL-4免疫APP/PS1转基因鼠后,产生了Th2型免疫反应,减轻小鼠脑内Aβ沉积,同时可以改善鼠脑内的炎症反应,可以作为阿尔茨海默病的候选疫苗进一步进行研究。(本文来源于《中国实验诊断学》期刊2019年01期）

陈海超^[5]（2019）在《外源性Aβ_(42)在hIAPP转基因鼠海马区的沉积及其机制研究》一文中研究指出目的阿尔兹海默症(Alzheimer’s disease,AD)是老年人中常见的神经退行性疾病,具有年龄依赖性和进行性发展的特征,其主要症状为显着的记忆缺陷,主要病理特征是特定脑区β-淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)沉积。Aβ_(42)可以以单体形式、寡聚体形式或者纤维样斑块的形式沉积,这些淀粉样沉积具有很强的神经毒性作用,是淀粉样老年斑的主要成分。糖尿病的主要特征是葡萄糖代谢和利用异常,分为1型和2型糖尿病。其中2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)在糖尿病中的占比高达90%。胰岛淀粉样蛋白(islet amyloid polypeptide,IAPP,又称Amylin)形成的淀粉样沉积是T2DM的病理特征,在稳态条件下IAPP的分泌是无害的,但其加工或产生失衡时,就会形成具有细胞毒性的寡聚体,从而引起胰岛β细胞的功能障碍。同时,外周产生的IAPP可以通过血脑屏障(blood brain barrier,BBB)进入中枢神经系统(central nervous system,CNS),CNS有IAPP受体,因此,IAPP在CNS发挥多重作用。AD和T2DM都是多因素疾病,尽管在表型上存在差异,但局部的淀粉样蛋白沉积是两者发病的共同特征。IAPP和Aβ虽然来源独立,但其原纤维序列具有高度同源性,且在T2DM人群中AD的发病率远高于正常人群。这两种疾病在发病机制上的联系尚不清楚,因此,本实验通过给hIAPP~(+/-)转基因小鼠的海马齿状回(dentate gyrus,DG)立体定位注射寡聚体Aβ_(42),研究hIAPP和Aβ_(42)在脑内的相互作用及其机制。方法1.评价2月龄野生型/hIAPP~(+/-)转基因小鼠外周胰岛的功能和海马区神经细胞对葡萄糖的利用:检测空腹血糖水平、胰岛素耐量实验(ITT)、葡萄糖耐量实验(GTT)评价胰岛功能;海马区立体定位注射2-NBDG 4小时后,灌注、取脑、切片,评价海马区神经细胞对葡萄糖的利用。2.小鼠双侧海马DG区注射寡聚体Aβ_(42)、注射后Aβ_(42)和Amylin表达评价:将人工合成的寡聚体Aβ_(42),通过脑立体定位注射于两月龄的野生型/hIAPP~(+/-)转基因小鼠双侧海马DG区,对照组注射溶媒对照。寡聚体Aβ_(42)注射后8小时、24小时、3天、7天和15天,免疫组化方法hIAPP~(+/-)转基因小鼠海马区Aβ_(42)的表达。注射2个月、6个月后,免疫荧光法检测野生型/hIAPP~(+/-)转基因小鼠嗅球、海马区Amylin和Aβ_(42)的表达。3.行为学检测:寡聚体Aβ_(42)注射后2个月和6个月,通过开场实验评价小鼠自发活动;通过社交实验评价小鼠社交识别能力;通过嗅觉偏好实验评价小鼠的嗅觉功能及依赖于嗅觉的记忆功能;通过物体识别评价小鼠空间记忆功能。4.野生型/hIAPP~(+/-)转基因小鼠注射寡聚体Aβ_(42)后,脑损伤的分子机制研究:Western Blot检测海马区线粒体功能相关蛋白的表达水平;Western Blot检测海马和嗅球突触标志物表达水平;免疫荧光检测海马区和SVZ区的神经干细胞的数目。结果1.和野生型小鼠比较,hIAPP~(+/-)转基因小鼠胰岛素敏感性下降、血糖升高,呈现T2DM特征。hIAPP~(+/-)转基因小鼠海马葡萄糖利用水平低于野生型,尤其是DG和CA1区。2.外源性注射的寡聚体Aβ_(42)在hIAPP~(+/-)转基因小鼠脑内不会被全部清除,随着注射时间的延长会产生Aβ_(42)聚集体。并且,外源性Aβ_(42)和Amylin在脑内可以互相作用,Aβ_(42)促进了Amylin的沉积,脑内沉积的Amylin也促进了Aβ_(42)的沉积。3.注射外源性寡聚体Aβ_(42)不会影响野生型/hIAPP~(+/-)转基因小鼠的运动能力,但会影响小鼠社交识别能力、嗅觉能力和依赖于嗅觉的记忆能力以及空间记忆能力,而且对转基因小鼠的影响更加显着。4.hIAPP~(+/-)转基因小鼠海马注射Aβ_(42)会引起海马区线粒体功能相关分子的改变、海马DG区神经细胞的变性死亡、海马DG区和SVZ区神经干细胞的丢失以及海马和嗅球突触的损伤,两者共同作用时改变最为显着。结论1.hIAPP~(+/-)转基因小鼠胰岛素敏感性下降,海马区神经细胞对葡萄糖利用水平下降。2.hIAPP~(+/-)转基因小鼠海马注射Aβ_(42),Aβ_(42)和Amylin在小鼠海马区有共定位,且Aβ_(42)和Amylin在海马区的沉积均增加。3.hIAPP~(+/-)转基因小鼠海马注射Aβ_(42)导致小鼠认知记忆功能受损更加显着。4.hIAPP~(+/-)转基因小鼠海马注射Aβ_(42)会引起海马区线粒体功能相关分子更加明显的改变。5.hIAPP~(+/-)转基因小鼠海马注射Aβ_(42)会导致海马和嗅球更明显的突触减少以及海马DG和SVZ区神经干细胞数量的减少。(本文来源于《兰州大学》期刊2019-01-01）

唐帆,徐立霞,武俏丽^[6]（2018）在《β-淀粉样蛋白导致阿尔兹海默转基因鼠脑内血管周细胞的损伤》一文中研究指出目的探讨β-淀粉样蛋白对阿尔兹海默转基因鼠脑内血管周细胞损伤的影响。方法选取12月龄的APP/PS1转基因鼠(7只)及其同窝阴性鼠(6只),免疫荧光染色法检测β-淀粉样蛋白(Amyloid-β,Aβ)的表达,利用CD31及Desmin共染鉴定小鼠脑内周细胞覆盖的变化。MTT观察Aβ42对人脐带间充质干细胞活性的影响,Western Blot观察Aβ42对人脐带间充质干细胞向周细胞分化的影响。结果 12月龄的APP/PS1转基因鼠大脑皮层有明显的Aβ蛋白沉积(P <0.001)。CD31及Desmin共染检测结果显示,与同窝阴性组比较,APP/PS1转基因鼠大脑皮层脑血管周细胞的覆盖明显减少(P <0.05)。MTT观察不同浓度Aβ42处理人脐带间充质干细胞结果显示,Aβ42对周细胞生长并没有影响。Western Blot结果显示,Aβ42处理间充质干细胞3天时α-SMA及Desmin蛋白表达显着降低。结论 APP/PS1转基因鼠内Aβ42通过抑制间充质干细胞向周细胞的分化进而降低了脑内血管周细胞的覆盖。(本文来源于《继续医学教育》期刊2018年11期）

王林佳,张缨^[7]（2018）在《一次性力竭运动对HIF-1α转基因鼠骨骼肌Nrf2抗氧化信号的影响》一文中研究指出目的:探讨一次性力竭运动对HIF-1α转基因鼠骨骼肌Nrf2抗氧化信号的影响。方法:HIF-1α转基因鼠和野生型C57BL/6J小鼠各20只。随机分为野生安静组(WC组)、野生运动组(WE组)、转基因安静组(HC组)和转基因运动组(HE组)。正式实验时运动组小鼠做递增负荷跑台运动直至力竭,运动后即刻取材,脱颈处死后取两侧小腿骨骼肌。采用酶联免疫法(ELISA)测定骨骼肌Nrf2-ARE结合活性,实时荧光定量PCR测定骨骼肌Nrf2下游抗氧化基因表达,Western Blot法测定骨骼肌中蛋白表达,高质荧光测定法测定小鼠骨骼肌ROS。结果:1)与WC组相比,HC组小鼠骨骼肌Nrf2 mRNA和蛋白表达显着增加,Nrf2-ARE结合活性显着增加,靶基因SOD1、SOD2、NQO-1 mRNA表达显着增加,NQO-1蛋白表达显着增加,骨骼肌ROS水平极显着下降;2)与HC组相比,HE组小鼠骨骼肌核蛋白Nrf2含量显着性增加,SOD2和NQO-1 mRNA表达量显着增加,且NQO-1蛋白表达显着增加,ROS无明显变化;3)与WE组相比,HE组小鼠Nrf2 mRNA和蛋白表达显着增加,Nrf2核蛋白及P-Nrf2表达增加。骨骼肌SOD2和NQO-1 mRNA表达增加,NQO-1蛋白表达显着增加,骨骼肌ROS含量极显着下降。结论:适当的HIF-1α高表达可提高安静状态下小鼠骨骼肌Nrf2-ARE通路的激活,且对一次力竭运动后骨骼肌ROS的消除也有积极的调节作用。(本文来源于《体育科学》期刊2018年11期）

王志飞^[8]（2018）在《UL122转基因鼠模型的建立及该蛋白对神经系统的影响》一文中研究指出人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)是一种双链的DNA病毒,属于β疱疹病毒亚科。CX43属于缝隙链接蛋白家族成员,有关实验数据表明HCMV能够下调CX43的表达水平。NMDARS为在神经细胞中发现的谷氨酸受体和离子通道蛋白,其表达与学习记忆能力有着密切的联系。IE2由病毒基因UL122编码,在病毒的复制和许多疾病的病理过程中起到重要作用。先前的研究表明,在孕妇中,原发或新的HCMV感染均可引起新生儿宫内感染或围产期感染,可导致胎儿畸形,智力低下或发育迟缓等。据报道,HCMV孕期感染与新生儿迟发性神经损伤密切相关,先天性HCMV感染导致学习和记忆障碍,但HCMV IE2是否在这一过程中起关键作用尚不清楚。由于种属特异性,先前对HCMV IE2的研究仅限于细胞和分子水平。为了进一步在整体水平上研究HCMV IE2是否通过影响转基因小鼠海马神经元NMDA受体和CX43表达水平来间接影响小鼠的学习记忆能力首先,建立了能稳定持续表达IE2蛋白的ul122转基因小鼠模型。然后将小鼠分为实验组(阳性小鼠)和对照组(野生型小鼠)。每个组n=24。用PCR技术鉴定了ul122转基因小鼠的建模成功。学习和记忆能力是用Morris水迷宫测试来测量的。Western blot和免疫组织化学研究检测Cx43和NMDA受体的表达水平。PCR结果表明,ul122转基因小鼠建模成功。Morris水迷宫测试结果表明,实验组与对照组相比,平台穿越次数和目的象限百分比(%)在转基因鼠中较少(p<0.05),但逃逸潜伏期实验组和对照组相比无明显差异。免疫组化结果表明实验组海马CA1中Cx43与NMDA受体的表达水平显着降低(p<0.05)。在ul122转基因小鼠海马中Cx43和NMDA受体的表达水平显着降低,可能与空间记忆损伤机制有关。该实验中ul122转基因鼠建模的成功克服了HCMV种属特异性的限制,首次实现了在小鼠体内研究IE2对神经系统的影响。这将阐释HCMV IE2导致神经发育异常的分子机制奠定了理论基础。(本文来源于《青岛大学》期刊2018-05-15）

周英奕^[9]（2018）在《电针对4月龄APP/PS1转基因鼠海马脑间质液Aβ和P-糖蛋白水平的影响》一文中研究指出一、研究背景阿尔茨海默病(Alzheimer's Disease,AD)是最为常见的中枢神经系统退行性病变。该病隐匿性起病,慢性进行性加重。其主要临床表现为记忆力缺失、认知功能障碍(语言障碍,空间功能障碍等)以及人格改变。目前AD的病因未明,发病机制也不完全清楚。关于AD的发病学说,目前主要有β淀粉样蛋白(β amyloid protein,Aβ)级联假说、神经细胞凋亡学说、基因突变学说以及tau蛋白异常修饰学说等。AD会在脑内产生大量的Aβ沉积和老年斑,并对神经元产生毒性作用,这是几乎所有假说都认可的。Aβ是β-分泌酶和γ-分泌酶切割淀粉样前体蛋白(Amyloid Precursor Protein,APP)而产生的裂解产物。A 清除和生成失衡导致了其在脑中堆积,其在脑内的清除主要是通过血-脑屏障(Blood-brain Barrier,BBB)途径完成的;分别透过脑毛细血管内皮细胞(brain microvascular endothilial cells,BMECs)细胞膜的基底侧和基顶侧的受体相关蛋白,由脑转运进入外周血液循环从而完成清除。脑组织间液(ISF)是Aβ进入不同代谢途径的中间场所,因此观测ISFAβ的水平可以对脑内可溶性Aβ水平进行总体评估。ISF Aβ主要也是通过血脑屏障上的内皮细胞进行清除,从BMECs的基底侧到顶侧外排至脑微血管腔。本课题组前期重点观察脑内A β含量的变化与BMECs基底侧的转运Aβ的运载蛋白---低密度脂蛋白受体相关蛋白 1(Low density lipoprotein receptor-related protein 1,LRP1)水平的关系。本实验如今关注的重点放在目前研究的热点,Aβ的外排蛋白---BMECs基顶侧的P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp),观察其是否在海马内存在广泛的阳性表达、其水平变化与Aβ含量变化的关系以及针刺对其表达的可能影响。二、实验目的本实验以4月龄双转基因APPswe/PSldE9雄性小鼠为实验对象,对“百会,涌泉”两穴进行短期的电针干预。目的是为验证电针是否通过增加内皮细胞P-糖蛋白的表达,促进脑组织间液可溶性Aβ经血脑屏障途径清除出脑。三、实验方法本实验选取20只雄性4月龄APP/PS1双转基因鼠为动物模型,利用随机数字表法进行完全随机分组,分为电针治疗组(A)和模型组(M),每组各10只小鼠。选取10只雄性4月龄C57BL/6鼠为正常对照组(C)。以上实验动物来源均为南京大学模式动物研究所,实验已通过北京中医药大学实验动物伦理委员会的审查。针刺“百会、涌泉”穴,进针深度为2-3mm,小幅度捻转针柄。其中双侧“涌泉穴”接韩式电针仪,使用频率为1/50Hz的疏密波,电针强度为0.1mA;以针柄微微颤动,动物不挣扎嘶叫为度。每次15min,隔日干预1次,共7次。模型组及正常对照组的小鼠以相同的自制鼠袋束缚,时间为15min,隔日束缚1次,共7次。针刺干预治疗结束后,每组小鼠随机取3只麻醉,行心脏灌注固定后取脑,采用免疫组化法观察海马P-糖蛋白的阳性表达。每组其余小鼠进行手术,经脑微透析取小鼠脑组织间液,酶联免疫吸附测定(Elisa)法检测4月龄APP/PS1鼠海马脑间质液Aβ1-42水平,观察电针对其的影响。微透析手术结束后,麻醉小鼠,断头取微透析探针进入的左侧海马组织,采用蛋白质免疫印记(Western blot)法观察其海马内P-糖蛋白水平及电针干预对其影响。对所得指标结果进行相关性分析,观察海马P-糖蛋白水平与脑间质液Aβ1-2水平之间的关系。四、实验结果2.1免疫组化法观察P-糖蛋白免疫组化法处理不同组别的小鼠海马组织石蜡切片,在400倍放大的视野下观察海马CA1区P-糖蛋白表达情况。发现在海马CA1区内,叁组均存在P-糖蛋白的阳性表达,且均表达于微血管壁上。正常对照组阳性表达面积最大,且颜色较深;模型组阳性表达面积明显减少,颜色也明显变浅;与模型组相比,电针治疗组阳性表达面积有所增加。采用了 IPP软件,对于免疫组化法检测后的海马P-糖蛋白阳性表达IOD值进行半定量分析。与正常对照组相比,模型组海马的P-糖蛋白IOD值较低;与模型组相比,电针治疗组海马P-糖蛋白较高。2.2 ELISA检测间质液Aβ水平脑微透析取样各组小鼠海马脑间质液,用酶联免疫吸附测定ELISA法检测其Aβ1-2水平。与正常对照组相比,模型组的脑组织间液Aβ1-42水平增加,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组相比,电针治疗组的脑组织间液Aβ1-42水平下降,差异有统计学意义(P<0.01)。这说明短期的电针治疗有降低脑组织间液Aβ1-42的作用。2.3 Western blot法检测海马P-糖蛋白取样小鼠新鲜海马组织,加入RIPA裂解液后进行组织匀浆的制备,蛋白质免疫印记Western blot法检测其海马P-gp水平。与正常对照组相比,模型组的P-糖蛋白水平较低,二者差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,电针治疗组的P-糖蛋白水平较高,二者差异有统计学意义(P<0.05)。这说明电针治疗对于海马P-gp的表达有促进作用。2.4相关性分析结果小鼠脑组织间液Aβ 1-42指标与海马P-糖蛋白水平指标进行相关性分析,结果显示:小鼠脑组织间液的Aβ1-42含量和海马组织内P-糖蛋白的水平呈负相关(r=-0.69,P≤0.01),且呈强相关,差异显着,有统计学意义。五、实验结论根据实验结果,4月龄的APP/PS1双转基因鼠已经出现了脑组织间液Ap水平的升高,以及Aβ相关转运蛋白P-糖蛋白在海马处表达降低。实验结果提示,电针干预可以降低脑组织间液Aβ水平,其机制可能与通过升高海马内P-糖蛋白的表达有关,该途径可能是电针治疗AD的作用途径之一。(本文来源于《北京中医药大学》期刊2018-05-01）

张磊^[10]（2018）在《电针对4月龄APP/PS1转基因鼠额叶BACE-1、β-CTF、γ分泌酶及Aβ1-42水平影响的研究》一文中研究指出AD的发病机制非常繁杂,目前关于AD发病机制有许多种假说。在众多假说当中Aβ级联学说是当下比较能被公众所接受的AD病理机制猜想。该假说的观点是,在AD病程中,淀粉样前体蛋白APP非正常的裂解生成过量Aβ以及脑内清除Aβ功能下降,Aβ生成与清除之间的动态平衡被打破,导致Aβ整体水平以及不同类型Aβ1-42与Aβ1-40之间的比例升高。脑内超量的的Aβ,特别是Aβ1-42会在短时间内转化成有超强毒性的寡聚体形态,这种寡聚体会导致神经系统中突触功能异常。在病程发展的过程中Aβ以寡聚体的形态逐渐形成弥散状态的沉积物质,并且最终形成淀粉样斑块堆积在脑内。Aβ由β、γ分泌酶对APP蛋白于相应位点进行切割加工而生成。在此淀粉样裂解途径中,APP首先被β分泌酶切割,BACE-1作为一种具有β分泌酶全部功能的蛋白酶,与APP相互作用,产生可溶性的APPN端片段sAPPβ以及含89或99个氨基酸残基的APPC端片段,又称β-CTF。β-CTF再经γ-分泌酶作用于丙氨酸Ala713和苏氨酸Thr714 之间产生 Aβ1-42。有临床报道显示,针刺或针药结合治疗AD临床疗效显着,AD患者的认知功能以及生活能力均得到改善,说明针刺可以降低AD患者脑内Aβ水平,而这种疗效有可能是通过对从APP裂解到Aβ生成的中间环节产生影响而实现的。因此,本实验欲从电针是否对可生成Aβ的APP淀粉样裂解途径产生干预作用进行初步探讨。如果在干预过程中,BACE-1、β-CTF、γ分泌酶水平产生变化,导致最终Aβ生成减少,则提示电针可能对APP裂解生成Aβ的过程产生影响,从而降低脑内Aβ水平。实验目的以APP/PS1转基因小鼠为动物模型,电针刺激“百会、涌泉”穴,观察电针是否是通过对APP淀粉样裂解过程中BACE-1、β-CTF及γ分泌酶等环节产生影响从而降低脑内Aβ水平。实验方法将14只4月龄雄性APP/PS1转基因小鼠随机分为电针治疗组与模型组,每组7只,以7只同性别的C57BL/6野生背景鼠作为正常对照组。电针治疗组针刺百会及双侧涌泉穴,平刺2～3mm,双侧涌泉穴接入电针仪,采用疏密波,频率1/50Hz,强度0.1mA,针柄微颤,每次15 min,隔日治疗1次,持续2周。模型组、正常对照组以相同方法用鼠袋束缚15min,隔日1次。共束缚2周。干预治疗结束后,取各组小鼠额叶,采用Elisa方法,检测4月龄APP/PS1转基因鼠额叶β分泌酶BACE-1、剪切片段β-CTF、γ-分泌酶以及最终产物Aβ1-42水平,明确电针是否对其产生影响。实验结果模型组小鼠额叶AβP-42水平高于正常对照组小鼠,统计有极显着性差异(P<0.01),电针治疗组小鼠额叶Aβ1-42水平低于模型组,统计有极显着性差异(P<0.01)。提示4月龄APP/PS1模型小鼠额叶Aβ1-42水平高于野生型小鼠,而电针干预可以降低额叶Aβ1-42 水平。模型组小鼠额叶BACE-1水平高于正常对照组小鼠,统计有极显着性差异(P<0.01),电针治疗组小鼠额叶BACE-1水平低于模型组,统计有极显着性差异(P<0.01)。提示4月龄APP/PS1模型小鼠额叶BACE-1表达水平相比于野生型小鼠偏高,而电针干预可以降低额叶BACE-1表达水平。模型组小鼠额叶β-CTF水平高于正常对照组小鼠,统计有极显着性差异(P<0.01),电针治疗组小鼠额叶β-CTF水平低于模型组小鼠,统计有极显着性差异(P<0.01)。提示4月龄APP/PS1模型小鼠额叶β-CTF生成增多,而电针干预可能减少β-CTF生成。叁组小鼠额叶γ分泌酶水平比较无显著性差异(P>0.05),或许提示4月龄APP/PS1模型小鼠额叶γ分泌酶水平与野生型小鼠无差异,由于BACE-1切割APP增多导致了Aβ1-42水平升高;电针治疗组中,电针对于APP淀粉样裂解途径的干预是作用也是在BACE-1这一环节,而γ分泌酶只是与减少的BACE-1切割产物β-CTF正常发生作用。结论电针干预可以降低APP/PS1小鼠脑内Aβ1-42水平,而其机理可能是通过影响β-分泌酶BACE-1切割APP前体蛋白减少Aβ1-42生成来实现的。(本文来源于《北京中医药大学》期刊2018-05-01）

转基因鼠论文开题报告

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

目的检测自噬相关基因(Atg)4a在不同时期超氧化物歧化酶(SOD)1-G93A突变型肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因鼠大脑皮层和纹状体中表达以探究Atg4a与ALS发病的关系。方法 SOD1-G93A突变型ALS转基因鼠和同窝野生型WT鼠于95 d(发病早期)、108 d(中期)和122 d(晚期)分别取材,运用定量实时聚合酶链反应(qRT-PCR)检测大脑皮层和纹状体中Atg4a mRNA水平,运用Western印迹技术检测蛋白水平,运用免疫荧光双标技术进行形态学检测。结果与WT鼠相比,ALS鼠大脑皮层中Atg4a mRNA和蛋白在发病95 d和108 d表达上调,122 d下调,而纹状体中Atg4a mRNA在95 d、108 d和122 d均上调,Atg4a蛋白则在95 d、108 d表达上调,122 d下调,差异均有统计学意义(P<0.05)。Atg4a在大脑皮层和纹状体中与神经元共表达。108 d,与WT鼠相比,ALS鼠大脑皮层和纹状体中Atg4a免疫反应性均显着增强(P<0.05)。结论 Atg4a在大脑皮层和纹状体中的异常表达与SOD1-G93A突变型ALS转基因鼠发病关系密切。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

转基因鼠论文参考文献

[1].原丽,韩玲娜,常永丽,张翠英.肠促胰岛素类似物拮抗APP/PS1转基因鼠认知功能损伤的研究[J].中国临床药理学与治疗学.2019

[2].梁婵婵,陈燕春,刘金梦,张雅雯,王巧真.自噬相关基因4a在超氧化物歧化酶1-G93A突变型肌萎缩侧索硬化症转基因鼠大脑皮层和纹状体的表达[J].中国老年学杂志.2019

[3].朱清,陈艳,龙大宏,胡楠,姜荣荣.EGFP示踪NSCs海马移植对APP/PS1转基因鼠认知功能及基底前脑胆碱能神经元的影响[J].解剖学研究.2019

[4].陈新,吴慧颖,邢晓娜.DNA疫苗对APP/PS1转基因鼠免疫反应类型及脑内炎症反应的影响[J].中国实验诊断学.2019

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[6].唐帆,徐立霞,武俏丽.β-淀粉样蛋白导致阿尔兹海默转基因鼠脑内血管周细胞的损伤[J].继续医学教育.2018

[7].王林佳,张缨.一次性力竭运动对HIF-1α转基因鼠骨骼肌Nrf2抗氧化信号的影响[J].体育科学.2018

[8].王志飞.UL122转基因鼠模型的建立及该蛋白对神经系统的影响[D].青岛大学.2018

[9].周英奕.电针对4月龄APP/PS1转基因鼠海马脑间质液Aβ和P-糖蛋白水平的影响[D].北京中医药大学.2018

[10].张磊.电针对4月龄APP/PS1转基因鼠额叶BACE-1、β-CTF、γ分泌酶及Aβ1-42水平影响的研究[D].北京中医药大学.2018

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