工程大肠杆菌异源表达D-阿洛酮糖3-差向异构酶的诱导工艺研究

工程大肠杆菌异源表达D-阿洛酮糖3-差向异构酶的诱导工艺研究

论文摘要

以异源表达D-阿洛酮糖3-差向异构酶(D-psicose 3-epimerase,缩写为DPEase)的工程大肠杆菌为出发菌株,在5L发酵罐培养的基础上,系统研究了大肠杆菌异源表达DPEase酶的诱导工艺。通过依次考察诱导时间点、诱导温度、诱导pH和诱导剂用量对工程大肠杆菌生长和DPEase酶活(单位时间内的转化率)的影响,综合考虑能耗和发酵周期,确定相应的最佳控制点,系统优化诱导条件。结果表明:指数生长期进行诱导,诱导前培养温度由37℃降至25℃、pH恒定7.0、IPTG诱导剂添加终浓度为0.5 mmol/L,可以理想平衡菌体生长和蛋白酶表达,反应30 min的DPEase酶平衡转化率达到28%左右,达到已公开报道的平均水平,为后续的生物转化工艺摸索提供原料供应。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 菌 株
  •   1.2 菌种培养基
  •   1.3 仪器与设备
  •   1.4 培养方法
  •     1.4.1 种子培养
  •     1.4.2 发酵罐发酵
  •   1.5 检测方法
  •     1.5.1 菌体量测定
  •     1.5.2 残糖测定
  •     1.5.3 DPEase酶浓度测定
  • 2 实验设计与结果分析
  •   2.1 工程大肠杆菌NHRI-Ec01的生长曲线测定
  •   2.2 诱导温度对工程菌生长和DPEase酶平衡转化率的影响
  •   2.3 pH对工程菌生长和DPEase酶平衡转化率的影响
  •   2.4 诱导剂用量对工程菌的生长和DPEase酶表达的影响
  • 3 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 周卫强,何太波,唐堂,汤维涛,吕哲,郭元亨,王靖,王小艳,彭超,陈博,李义,佟毅

    关键词: 大肠杆菌,阿洛酮糖差向异构酶,阿洛酮糖,诱导工艺

    来源: 发酵科技通讯 2019年04期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 一般化学工业

    单位: 中粮营养健康研究院有限公司,营养健康与食品安全北京市重点实验室,老年营养食品研究北京市工程实验室,玉米深加工国家工程研究中心

    基金: 国家十三五重点研发计划项目(2017YFC1600906)

    分类号: TQ925

    DOI: 10.16774/j.cnki.issn.1674-2214.2019.04.002

    页码: 192-196

    总页数: 5

    文件大小: 584K

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