论文摘要
我国长期以来存在过度使用化学肥料和农药的现象,对生态环境产生了极大的危害。开发高效率,无污染的生物肥料和农药,是保障粮食安全的重要手段。本课题组前期分离筛选获得具有高效拮抗稻瘟病菌的水稻内生放线菌Streptomyces hygroscopicus OsiSh-2和对水稻植株具有显著的促生长效果的水稻内生放线菌Streptomyces albidoflavus OsiLf-2,具有开发成生物农药和生物肥料的潜力。本论文以OsiSh-2和OsiLf-2为研究对象,对将其开发为微生物制剂开展了一系列研究,取得了如下成果:一、研究了两株水稻内生放线菌OsiSh-2和OsiLf-2的孢子特点,确定了其作为微生物制剂开发的可行性。OsiSh-2孢子亲水性强,剂型开发方向为可湿性粉剂;OsiLf-2孢子具有高度疏水性可开发为根际固定化制剂。同时,OsiSh-2与春雷霉素和嘧菌酯具有较好的生物相容性;OsiLf-2与三环唑和嘧菌酯具有较好的生物相容性。可见水稻内生放线菌OsiSh-2和OsiLf-2作为生物制剂可与化学农药适当复配。OsiSh-2孢子具有长时间耐高温的能力,在55℃高温处理下可保存一周以上;而OsiLf-2孢子不具备长时间耐高温能力,因此在生产、运输和贮存过程中需要注意控制温度。二、以秸秆粉,大豆粉,大米粉为原料,通过单因素实验、正交实验确定了OsiSh-2固体发酵产孢的最适条件。当物料配比为秸秆粉36.8%、大豆粉30.2%和大米粉32.9%,培养温度30℃,培养时间15天,产孢量可达到3.75?109个/g。三、以水溶性壳聚糖,海藻酸钠等包埋固定化材料,开发了具有活力的OsiLf-2固定化微球并在其基础上制备了OsiLf-2种子包衣。对OsiLf-2固定化微球和OsiLf-2种子包衣性能的测试发现,固定化微球和种子包衣中的OsiLf-2孢子活力在常温下可以保持300天以上,OsiLf-2种子包衣对种子萌发没有明显的抑制作用,且能够明显促进水稻生长。培养15天后,具备OsiLf-2种子包衣的水稻的株高、地上部鲜重和干重都显著高于未用OsiLf-2处理的对照组水稻,分别增加了12.4%、30.4%和26.3%。本工作初步探索了水稻内生放线菌OsiSh-2和OsiLf-2的微生物制剂,为这两株功能性内生菌在农业上的实际应用打下基础。
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摘要Abstract第1章 绪论 1.1 农药化肥过量使用的危害 1.1.1 过量使用化学农药的危害 1.1.2 过量使用化肥的危害 1.2 农用微生物制剂 1.2.1 微生物农药 1.2.2 微生物肥料 1.3 植物内生放线菌 1.3.1 水稻内生放线菌OsiSh-2 1.3.2 水稻内生放线菌OsiLf-2 1.4 固体发酵 1.5 本课题研究背景及研究路线 1.5.1 本课题研究背景 1.5.2 本课题的研究路线第2章 水稻内生放线菌OsiSh-2和OsiLf-2 孢子特性研究 2.1 引言 2.2 实验材料,试剂与方法 2.2.1 实验菌株 2.2.2 实验试剂 2.2.3 主要实验仪器和设备 2.2.4 实验培养基及试剂配制方法 2.2.5 水稻内生菌OsiSh-2和OsiLf-2 孢子悬液制备 2.2.6 水稻内生菌OsiSh-2和OsiLf-2 孢子湿润分散剂的流点法筛选 2.2.7 直接观察法测定湿润分散剂对内生菌OsiSh-2和OsiLf-2 孢子的分散效果 2.2.8 测试内生菌OsiSh-2和OsiLf-2 孢子的长时间耐高温能力 2.2.9 水稻内生放线菌OsiSh-2和OsiLf-2 与常用化学农药的生物相容性测试 2.3 实验结果与讨论 2.3.1 水稻内生菌OsiSh-2和OsiLf-2 孢子湿润分散剂的流点法筛选 2.3.2 直接观察法测定湿润分散剂对内生菌OsiSh-2和OsiLf-2 孢子分散效果 2.3.3 内生菌放线菌OsiSh-2和OsiLf-2 孢子的长时间耐高温能力 2.3.4 水稻内生放线菌OsiSh-2和OsiLf-2 与常用化学农药的生物相容性 2.4 本章小结第3章 水稻内生放线菌OsiSh-2 固体发酵培养条件优化 3.1 引言 3.2 实验材料、仪器与方法 3.2.1 实验菌株 3.2.2 实验试剂 3.2.3 主要实验仪器和设备 3.2.4 实验培养基及试剂配制方法 3.2.5 初步探究OsiSh-2 固体发酵可行性 3.2.6 单因素实验探究OsiSh-2 固体发酵最适初始含水量 3.2.7 测试先液体后固体发酵方法培养OsiSh-2 的可行性 3.2.8 OsiSh-2 固体发酵基质营养成分配比正交实验 3.2.9 对固体发酵培养基质中的OsiSh-2 进行观察和鉴定 3.2.10 从固体发酵培养基质中粗提取OsiSh-2 孢子的方法 3.3 实验结果与讨论 3.3.1 初步探究OsiSh-2 固体发酵可行性 3.3.2 单因素实验探究OsiSh-2 固体发酵最适初始含水量 3.3.3 测试先液体后固体发酵方法培养OsiSh-2 的可行性 3.3.4 OsiSh-2 固体发酵基质营养成分配比正交实验 3.3.5 对固体发酵培养基质中的OsiSh-2 进行观察和鉴定 3.4 本章小结第4章 水稻内生放线菌OsiLf-2 新型根际固定化制剂的制备与促生效果测定 4.1 引言 4.2 实验材料,试剂与方法 4.2.1 实验菌株和水稻种子 4.2.2 实验试剂 4.2.3 主要实验仪器和设备 4.2.4 放线菌OsiLf-2 固定化微球的制备 4.2.5 放线菌OsiLf-2 种子包衣的制备 4.2.6 OsiLf-2 固定化微球和OsiLf-2 种子包衣中OsiLf-2 孢子活力测试 4.2.7 固定化微球的吸水溶胀度的测定 4.2.8 OsiLf-2 种子包衣对水稻种子萌发影响的测试 4.2.9 OsiLf-2 固定化微球和种子包衣活力保持时间测定 4.2.10 OsiLf-2 种子包衣对水稻的促生长效果测定 4.2.11 水稻水培液的配制 4.2.12 水稻种子消毒方法 4.3 实验结果与讨论 4.3.1 OsiLf-2 固定化微球及微球中OsiLf-2 孢子活力 4.3.2 含OsiLf-2 包衣的湘矮早7 号水稻种子及包衣中OsiLf-2 孢子活力 4.3.3 OsiLf-2 种子包衣对水稻种子萌发的影响 4.3.4 OsiLf-2 固定化微球和种子包衣活力保持时间 4.3.6 OsiLf-2 种子包衣对水稻的促生长效果 4.4 本章小结结论和下一步实验展望 结论 下一步实验展望参考文献附录 A 攻读学位期间发表的论文和专利致谢
文章来源
类型: 硕士论文
作者: 刘则一
导师: 朱咏华,杨远柱
关键词: 水稻内生菌,微生物制剂,固体发酵,种子包衣,促生长
来源: 湖南大学
年度: 2019
分类: 基础科学
专业: 生物学
单位: 湖南大学
分类号: Q939.9
DOI: 10.27135/d.cnki.ghudu.2019.004181
总页数: 56
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标签：水稻内生菌论文; 微生物制剂论文; 固体发酵论文; 种子包衣论文; 促生长论文;
水稻内生放线菌OsiSh-2与OsiLf-2的功能性生物制剂的研究
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