穿梭表达载体论文_刘燕,张宏福,孙哲,杨琳,王瑞军

导读:本文包含了穿梭表达载体论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:载体,大肠杆菌,质粒,乳酸菌,杆菌,血凝素,基因。

穿梭表达载体论文文献综述

刘燕,张宏福,孙哲,杨琳,王瑞军[1](2017)在《康宁木霉AS3.2774纤维素酶CBHⅡ基因与乳酸菌非抗性穿梭表达载体的重组及在大肠杆菌中的表达》一文中研究指出以康宁木霉AS3.2774 m RNA为模板,通过RT-PCR技术,扩增了1 413 bp的CBHⅡ全长基因,利用T-A克隆,将CBHⅡ克隆至克隆载体p MD18-T Simple Vector,构建质粒p MD18-T-CBHⅡ。以Sma I和Sph I双酶切p MD18-T-CBHⅡ和以胸苷酸合成酶基因(thymidylate synthase,thy A)为选择压力的非抗生素抗性的穿梭表达载体p W425t,将纯化的CBHⅡ亚克隆到p W425t中,得到原核表达重组质粒p W425t-CBHⅡ,可在乳酸菌与大肠杆菌之间穿梭表达。将p W425t-CBHⅡ转化在thy A基因缺陷型的大肠杆菌感受态E.coli X13中,通过质粒提取、PCR鉴定、酶切鉴定、分析测序以及生长功能弥补筛选阳性克隆。SDS-PAGE分析,约49.6 k D的蛋白可见,刚果红染色显示重组大肠杆菌可产生明显的水解圈,并用p NPC法测得重组大肠杆菌的CBHⅡ酶活力在温度50℃、p H值5.0时达到最大。(本文来源于《饲料工业》期刊2017年14期)

刘琼,王春凤,尚晓敏,李桂玲,李皓[2](2015)在《大肠杆菌不耐热肠毒素LTB大肠杆菌-乳酸菌穿梭表达载体的构建及表达》一文中研究指出为了获取大肠杆菌不耐热肠毒素LTB基因,试验以产肠毒素大肠杆菌的大质粒为模板,采用PCR技术扩增大肠杆菌不耐热肠毒素LTB基因,并将PCR产物克隆至p MD18-T载体中构建克隆质粒p MD18T-LTB;通过酶切、纯化将LTB基因与大肠杆菌-乳酸菌穿梭表达载体p W425et连接构建成重组质粒p W425et-LTB,将p W425et-LTB转化至thy A基因缺陷型大肠杆菌X13感受态细胞中,再进行SDS-PAGE、Western-blot检测。结果表明:重组大肠杆菌表达出LTB蛋白,且表达的融合蛋白能被LTB特异性抗体识别。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2015年19期)

张莹莹[3](2015)在《产TGase菌株的筛选、分泌型穿梭表达载体的构建及tgl的克隆表达》一文中研究指出微生物来源的谷氨酰胺转氨酶(Transglutaminase,TGase)能够催化蛋白的交联反应改善蛋白质结构、凝胶性和稳定性,使其在食品工业中有广泛应用前景。本研究先从土壤中筛选得到产TGase的菌株,并克隆了TGase编码基因,通过构建新的分泌型穿梭表达载体,将TGase编码基因分别在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌中成功表达,为其酶学性质研究和食品工业中的应用打下了基础。1.从土壤样品中筛选到3株产TGase酶活较高的菌株,包括2株放线菌和1株细菌,分别编号为A109.5、A110.4、TGase1318,另有本实验室保存的具有TGase活性的菌株Bacillus subtilis subsp.natto TGase1319。根据TGase1318菌体和菌落形态、生理生化特征初步证明该菌株为枯草芽孢杆菌。该菌株16S r DNA序列比对结果表明其16S r DNA序列与B.subtilis的同源性最高,达到99%以上,进一步证明菌株TGase1318为B.subtilis。2.根据B.subtilis TGase编码基因tgl的序列设计引物,用PCR法克隆了TGase1318、TGase1319两株菌的tgl基因,两个基因均为738 bp长,编码由245个氨基酸组成的TGase蛋白,两个蛋白序列之间有两个氨基酸的差异。用分子生物学相关软件分别对tgl基因所编码的氨基酸序列、等电点、二级结构和叁级结构等进行分析,结果显示分子量均为28.29 k Da,p I 6.71,两个TGase蛋白的结构特性相近。BLAST比对后发现与NCBI上来自B.subtilis其他菌株的TGase有94%~100%的同源性。3.通过重迭PCR法将源于菌株TGase1319的碱性蛋白酶基因E的信号肽序列Apre与E.coli-B.subtilis穿梭表达载体p TL上的木糖启动子序列(Pxylr)融合,替换了p TL载体上的T7短肽,构建了一个由D-木糖进行诱导表达外源蛋白的E.coli-B.subtilis的分泌型穿梭表达载体p TZ。将PCR方法扩增得到β-葡萄糖苷酸酶(GUS)基因gus和来自粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)的脂肪酶基因lipa,分别插入到p TZ载体的多克隆位点处构建重组质粒,转化B.subtilis WB800,获得工程菌W8-gus和W8-lipa。以GUS为报告基因,采用荧光分光光度法进行初步优化,得到W8-gus的诱导表达条件:37℃、200 r/min条件下,终浓度为2%的D-木糖诱导24 h后,W8-gus上清液出现了明显的蓝色。在同样条件下运用p-NPP比色法检测W8-lipa上清液的酶活,其活力达到了195.2±0.05 U/mg,与未经诱导的W8-lipa菌株的上清液相比提高了近300倍。结果表明二种基因均得到了很好的表达,证明载体p TZ是一个遗传操作简便、表达率高的E.coli-B.subtilis分泌型穿梭表达载体。4.将TGase1318、TGase1319两菌株的tgl基因分别克隆到分泌型穿梭表达载体p TZ和E.coli表达载体p ET-21b中,构建了分别包含两种tgl基因的重组质粒p TZ-tgl和p ET-21b-tgl,并转化B.subtilis WB800和E.coli BL21,获得了阳性转化子WB800-p TZ-t8、WB800-p TZ-t9和BL21-p ET21b-t8、BL21-p ET21b-t9。它们的发酵液和菌体裂解液都能在70℃下催化牛血清白蛋白(BSA)发生交联反应,大肠杆菌中活性达到0.45±0.06 U/m L,枯草芽孢杆菌中活性为0.17 U/m L,表明枯草芽孢杆菌的tgl基因得到了成功表达,且TGase活性高于已有报道。另外,该酶在70℃下仍表现出明显的对BSA的交联作用,这一特性表明TGase或可用于高温下的食品加工中。(本文来源于《河北农业大学》期刊2015-06-04)

李志辉[4](2014)在《枯草芽孢杆菌穿梭表达载体和表面展示载体的构建》一文中研究指出枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)是一种极具潜力的外源蛋白表达宿主菌,不论是用来高效表达外源蛋白还是作为口服疫苗或全细胞酶的载体,都展现出其他细菌无可比拟的优势,是研究较多、应用广泛的生物安全菌。质粒是外源蛋白异源表达的必须工具,目前,可用于外源蛋白在B. subtilis中表达的质粒虽然不少,但遗传操作方便、表达效率高的E. coli-B. subtilis穿梭表达载体和能直接将外源蛋白展示在芽孢表面的穿梭表达载体仍然缺乏。本实验构建了两个穿梭表达载体和一个表面展示的载体,用4种报告基因进行了验证,主要内容如下:1.通过融合PCR将来源于B. subtilis的木糖启动子(PxylR)序列和来源于大肠杆菌(Escherichia coli)表达载体pET21b的T7肽和多克隆位点区等序列融合替换了E. coli-B. subtilis穿梭载体pHT315的多克隆位点,构建了一个能由D-木糖诱导表达的E. coli-B. subtilis穿梭表达载体pTL。PCR扩增得到了绿色荧光蛋白(GFP)基因gfp,β-葡萄糖苷酸酶(GUS)基因gus,人淀粉样前体蛋白(APPsw)基因APPsw和粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)脂肪酶基因lipa,并分别插入pTL的多克隆位点构建了重组质粒,转化B. subtilis WB800,获得了工程菌WB800-gfp、WB800-gus、WB800-APPsw和WB800-lipa。荧光显微镜下可以观察到WB800-gfp菌体发出绿色荧光,表明GFP成功表达,用荧光分光光度法确定了检测GFP的最佳激发波长为390nm,发射波长为507nm;以gfp为报告基因,利用荧光分光光度法经初步优化得到GFP在WB800-gfp中诱导表达条件为:在37℃、200rpm条件下,以终浓度1%的D-木糖诱导8h,GFP表达水平最高;上述条件下诱导gus、APPsw、lipa基因表达,WB800-gus菌体呈现蓝色阳性反应,Western Blot试验结果表明WB800-APPsw菌体裂解液样品在85kDa处有明显的阳性蛋白杂交条带,Rashid N p-NPP比色法检测WB800-lipa菌体裂解液样品,结果显示脂肪酶活力为72.73±0.25U/mg,较未经木糖诱导的对照提高近210倍,表明叁种基因都得到很好地表达;在无抗生素选择压力的条件下,质粒pTL经连续传10代后仍表现出98.5%的高稳定性。上述结果证明pTL是一个遗传操作方便、稳定性强、表达效率高的E. coli-B. subtilis穿梭表达载体,可以表达融合有T7肽的外源融合蛋白,不影响蛋白性质,同时可为后续回收纯化操作提供便利。2.在B. subtilis的穿梭表达载体pDG148-stuI的基础上,经遗传改造构建了一个含有Pspac启动子的E. coli-B. subtilis穿梭载体pDG150,将克隆的gfp,gus,APPsw和lipa插入pDG150构建重组质粒,分别转化B. subtilis168,获得了重组工程菌B168-gfp,B168-gus,B168-APPsw和B168-lipa。荧光显微镜观察和荧光分光光度计检测结果表明GFP在B168-gfp中获得表达,以gfp为报告基因,利用荧光分光光度法证明用IPTG诱导B168-gfp中GFP表达的最优条件为:在37℃、200rpm转速下,终浓度1mM的IPTG诱导4h,可使GFP表达量最高。在此培养条件下,GUS显色法证明B168-gus中GUS表达为阳性;Western Blot实验显示B168-APPsw菌体裂解液样品在78kDa处有阳性蛋白杂交条带,表明APPsw得到表达;Rashid N p-NPP比色法证明B168-lipa脂肪酶也获得高效表达,IPTG诱导后的脂肪酶活力为20.52±0.12U/mg,较未经诱导的对照提高近50倍;质粒传代稳定性实验表明:经连续传10代后质粒稳定性高达95.5%。3.将芽孢衣壳蛋白CotG的启动子序列和蛋白编码序列(不含终止密码子)与质粒pDG150重组构建了表面展示载体pDG150-cotg,将gfp,gus,APPsw和lipa插入pDG150-cotg构建重组质粒,分别转化B. subtilis168,得到重组工程菌G168,U168,A168和L168。37℃、200rpm条件下在DSM培养基中培养40h收获重组工程菌的芽孢。荧光显微镜观察结果证明GFP在G168芽孢上得到成功展示;U168的芽孢加入GUS显色液后呈蓝色,表明GUS已经表达;Western Blot试验表明A168的芽孢提取液在102kDa处有阳性蛋白杂交带,说明APPsw蛋白得到成功展示,为APPsw抗体制备打下了基础;利用Rashid N p-NPP比色法检测L168的芽孢,表明脂肪酶活力为28±1.32U/g。(本文来源于《河北农业大学》期刊2014-06-01)

郭衍冰,胡静涛,于丹,曹岩峰,王一鸣[5](2013)在《重组NDV HN基因乳酸菌穿梭表达载体的构建及在大肠杆菌中的表达》一文中研究指出为构建新城疫病毒乳酸菌穿梭表达载体,采用RT-PCR方法从新城疫病毒中扩增了HN基因,将其克隆到pMD18-T Simple Vector中。经测序鉴定正确后,定向克隆至乳酸菌表达载体pW425et中,并转化入表达宿主菌BL21(DE3),利用IPTG诱导表达。采用SDS-PAGE和Western blotting检测重组菌在大肠杆菌中的表达情况。结果表明:NDVHN基因与表达载体pW425et正确重组,且该重组菌传50代次以上,重组质粒依然稳定。SDS-PAGE显示表达出约63 kD的条带,与已知表达的HN蛋白大小相符。Western blotting进一步证实该蛋白能被NDV阳性抗体所识别,具有反应原性。表明构建了重组NDVHN基因乳酸菌穿梭表达载体。(本文来源于《吉林农业大学学报》期刊2013年02期)

于德水,高娃,沙长青,张淑梅,高继国[6](2011)在《含黄绿荧光蛋白基因的穿梭质粒表达载体的构建》一文中研究指出质粒pHPS9为大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭质粒表达载体,本项研究采用基因重组技术将黄绿荧光蛋白基因EYFP重组到大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭质粒表达载体pHPS9上,转化到感受态大肠杆菌中,获得含有pHPS9-EYFP质粒的阳性重组子。经双酶切和琼脂糖凝胶电泳验证,成功构建了能在枯草芽孢杆菌中表达的含有EYFP基因的大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭质粒表达载体,为生防菌株的基因标记提供了必要的材料。(本文来源于《黑龙江科学》期刊2011年05期)

刘颖[7](2011)在《重组厌氧芽胞梭菌eglA p-Her2/neu-IL12融合基因穿梭表达载体的构建》一文中研究指出目的:构建重组厌氧芽胞梭菌saccharobutylicumβ-1,4葡聚糖内切酶启动子及信号肽(eglAp)-人表皮生长因子受体2胞外区(hHer2/neu ECD)-人白细胞介素12(rhIL12)融合基因穿梭表达载体(pIMPleglAp-hHer2/neu ECD-rhIL12),为进一步制备eglAp-hHer2/neu-rhIL 12融合基因修饰的重组厌氧芽胞梭菌,进行Her2/neu阳性实体肿瘤基因治疗的研究奠定基础。方法:①以含有全长hHer2/neu序列的真核表达质粒(pcDNA3.1 hHer2/neu)为模板,采用PCR方法,扩增hHer2/neu ECD基因片段(1896bp),通过酶切连接的方法,将其插入重组rhIL12真核表达质粒pcDNA6 rhIL12 (p1)中的rhIL12基因上游,获得pcDNA6 hHer2/neu ECD-rhIL 12 (p2)真核表达质粒。②设计合成eglAp基因中一段55bp序列作为模板,通过连续PCR的方法,扩增eglAp基因片段(335bp),并构建T-eglAp(p3)亚克隆质粒。③通过酶切连接的方法,将eglAp片段插入p2质粒中的hHer2/neu ECD基因上游,构建pcDNA6 eglAp-hHer2/neu ECD-rhIL12 (p4)真核表达质粒。④以p4真核表达质粒为模板,扩增eglAp-hHer2/neu ECD-rhIL 12融合基因片段(4.0kb),通过in-fusion技术,将其插入pIMP1穿梭表达质粒,构建重组pIMP1 eglAp-hHer2/neu ECD-rhIL12 (p5)穿梭表达载体,并进行菌液PCR、酶切及测序鉴定。结果:①获得hHer2/neu ECD基因片段和pcDNA6 hHer2/neu ECD-rhIL 12真核表达质粒。②获得eglAp基因片段和T-eglAp亚克隆质粒。③获得pcDNA6 eglAp-hHer2/neu ECD-rhIL 12真核表达质粒。④获得eglAp-hHer2/neu ECD-rhIL 12融合基因片段及重组pIMP1 eglAp-hHer2/neu ECD-rhIL 12穿梭表达载体,其PCR产物和酶切片段与预期一致,测序结果证实融合基因各序列与GenBank中序列一致。结论:成功地构建了重组大肠杆菌-厌氧芽胞梭菌融合基因穿梭表达载体(pIMP1 eglAp-hHer2/neu ECD-rhIL 12),为进一步制备eglAp-hHer2/neu-rhIL 12融合基因修饰的厌氧芽胞梭菌,进行Her2/neu阳性实体肿瘤基因治疗的研究奠定了实验基础。(本文来源于《青岛大学》期刊2011-04-25)

梁晓梅[8](2011)在《大肠杆菌—枯草芽孢杆菌穿梭表达载体pBE2R的构建及应用》一文中研究指出本文构建了一个可以在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌中稳定复制,并可以在枯草芽孢杆菌中表达外源蛋白的穿梭表达载体pBE2R。该穿梭表达载体是以pBE2为基本骨架,引入来自pWB980质粒的P43强启动子,并在其下游引入嗜碱芽孢杆菌碱性蛋白酶信号肽和前肽构建而成。质粒拷贝数测定结果显示,pBE2R在大肠杆菌、枯草芽孢杆菌每个细胞中大约含有1个拷贝。质粒稳定性实验结果显示:该质粒在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌中各传30代而不发生丢失,说明该质粒在本实验条件下,可以在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌中稳定存在。利用pBE2R可以实现碱性蛋白酶在枯草芽孢杆菌中的表达。以嗜碱芽孢杆菌碱性蛋白酶基因组为模板,据GeneBank报道的碱性蛋白酶基因序列,设计引物,采用PCR技术扩增碱性蛋白酶成熟肽编码基因。连接成熟肽基因与pBE2R,连接产物转化大肠杆菌,提取阳性转化子中质粒转化枯草芽孢杆菌WB600。实验结果显示:嗜碱芽孢杆菌碱性蛋白酶可以成功地在枯草芽孢杆菌中进行分泌、表达。pBE2R含有来自枯草芽孢杆菌的P43重迭启动子,可以有效提高外源蛋白的表达量。启动子下游连接有碱性蛋白酶信号肽和前肽编码基因,实验结果表明,信号肽部分可以有效地引导翻译后的外源蛋白完成跨膜分泌;前肽部分作为分子内伴侣,它的存在及其在胞外的正确切除对外源蛋白的折迭,稳定性及功能的发挥起着重要的作用。实验发现,碱性蛋白酶前肽3’末端的一段氨基酸序列‘'TTMA'(从第108位到第111位氨基酸)及其排列顺序对前肽的正确切除起着至关重要的作用,保持TTMA"序列的完整性是前肽正确切除必要条件之一。这一发现为胞外蛋白前肽切除机制的研究奠定了一定的理论基础。pBE2R不仅可以使外源蛋白在枯草芽孢杆菌进行分泌表达,而且也为碱性蛋白酶定向改造提供了高通量筛选平台。将经易错PCR和DNA Shuffling技术获得的碱性蛋白酶成熟肽突变基因与pBE2R连接,连接产物转化大肠杆菌,获得大量克隆,提取其中质粒转化枯草芽孢杆菌,采用酪蛋白平板进行初筛,结合液体发酵液的分光光度法(96孔板)进行复筛,如此重复,经多轮改组和高通量的筛选,最终获得理想的碱性蛋白酶突变基因。据中温α-淀粉酶(来自枯草芽孢杆菌BF7658)利用pBE2R在枯草芽孢杆菌WB600中表达的实验结果推断,碱性蛋白酶长前肽在指导短前肽类蛋白形成功能蛋白方面存在一定的局限性。(本文来源于《天津科技大学》期刊2011-01-01)

满丹丹[9](2011)在《日本血吸虫重组pBCG-Sj14-Sj26原核穿梭双表达载体的构建及其在耻垢分枝杆菌中的表达》一文中研究指出本实验主要是采用聚合酶链式反应的方法构建含日本血吸虫Sj14(FABP )基因和Sj26(GST)基因的重组质粒pBCG-Sj14-Sj26(这是个原核穿梭双表达重组质粒),然后检测它在耻垢分枝杆菌中的表达情况。主要是以实验室构建完成的pMD-Sj14, pMD-Sj26为模板,扩增得到Sj14(FABP )和Sj26(GST)这两个基因。随后将这两个基因克隆到原核穿梭表达载体pBCG-SP中,即得到重组质粒pBCG-SP- Sj14和pBCG-SP- Sj26。接着分别以pBCG-SP- Sj14和pBCG-SP- Sj26质粒为模板,采用聚合酶链式反应技术扩增出含SD序列和原核信号肽编码序列在内的Sj14和Sj26修饰基因SP- Sj14和SP- Sj26。将上述两个基因一起克隆到pBCG2100中,最终得到重组质粒pBCG- Sj14 - Sj26,最后利用电穿孔的方法将该质粒转入耻垢分枝杆菌中,经热诱导后,利用SDS-PAGE和Western-blot来检验Sj14和Sj26的表达和生物学活性。最后的结果通过PCR鉴定和证酶切鉴定,来确定pBCG-SP- Sj14、pBCG-SP- Sj26以及pBCG-Sj14-Sj26质粒构建成功。并且重组质粒pBCG-Sj14-Sj26成功的转入耻垢分枝杆菌中。通过SDS-PAGE检验出Sj14和Sj26的表达,并且利用Western-blot可检测出表达产物能与Sj26抗体发生特异性的结合。最终得出结论成功构建了日本血吸虫原核穿梭表达质粒pBCG-Sj14-Sj26,该质粒经电转入耻垢分枝杆菌后可高效表达Sj14和Sj26蛋白,并且表达的Sj26蛋白具有生物学活性。为下一步日本血吸虫重组BCG疫苗的研制奠定了基础。(本文来源于《华中科技大学》期刊2011-01-01)

全梅芳,余凯,夏立秋,丁学知,曾凡军[10](2010)在《大肠杆菌-链霉菌穿梭表达载体pMF的构建及其应用》一文中研究指出【目的】构建能定点整合到链霉菌(Streptomyces)染色体上的高效表达载体。【方法】以链霉菌自杀型表达载体pLSB2为基础,通过插入链霉菌噬菌体ΦC31整合酶基因int和attP位点(Phage attachment site),构建了能在大肠杆菌和链霉菌之间进行接合转移并定点整合到链霉菌染色体上的表达载体pMF。将pMF转化大肠杆菌ET12567(pUZ8002),并分别接合转移天蓝色链霉菌(Streptomyces coelicolorM145)、变铅青链霉菌(Streptomyces lividansTK24)和红色糖多孢菌(Saccharopolyspora erythraea2338),挑取接合子进行PCR和Southern杂交检测。将来自刺糖多孢菌S08-4的S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因(SAM-s)克隆到载体pMF的启动子下游,接合转移到天蓝色链霉菌中。【结果】表明pMF成功整入链霉菌染色体,并且检测到目的蛋白的表达。【结论】构建的pMF载体可作为外源基因定点整合表达的有效工具,为后续的基因功能研究以及链霉菌的遗传改造奠定了基础。(本文来源于《微生物学报》期刊2010年09期)

穿梭表达载体论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

为了获取大肠杆菌不耐热肠毒素LTB基因,试验以产肠毒素大肠杆菌的大质粒为模板,采用PCR技术扩增大肠杆菌不耐热肠毒素LTB基因,并将PCR产物克隆至p MD18-T载体中构建克隆质粒p MD18T-LTB;通过酶切、纯化将LTB基因与大肠杆菌-乳酸菌穿梭表达载体p W425et连接构建成重组质粒p W425et-LTB,将p W425et-LTB转化至thy A基因缺陷型大肠杆菌X13感受态细胞中,再进行SDS-PAGE、Western-blot检测。结果表明:重组大肠杆菌表达出LTB蛋白,且表达的融合蛋白能被LTB特异性抗体识别。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

穿梭表达载体论文参考文献

[1].刘燕,张宏福,孙哲,杨琳,王瑞军.康宁木霉AS3.2774纤维素酶CBHⅡ基因与乳酸菌非抗性穿梭表达载体的重组及在大肠杆菌中的表达[J].饲料工业.2017

[2].刘琼,王春凤,尚晓敏,李桂玲,李皓.大肠杆菌不耐热肠毒素LTB大肠杆菌-乳酸菌穿梭表达载体的构建及表达[J].黑龙江畜牧兽医.2015

[3].张莹莹.产TGase菌株的筛选、分泌型穿梭表达载体的构建及tgl的克隆表达[D].河北农业大学.2015

[4].李志辉.枯草芽孢杆菌穿梭表达载体和表面展示载体的构建[D].河北农业大学.2014

[5].郭衍冰,胡静涛,于丹,曹岩峰,王一鸣.重组NDVHN基因乳酸菌穿梭表达载体的构建及在大肠杆菌中的表达[J].吉林农业大学学报.2013

[6].于德水,高娃,沙长青,张淑梅,高继国.含黄绿荧光蛋白基因的穿梭质粒表达载体的构建[J].黑龙江科学.2011

[7].刘颖.重组厌氧芽胞梭菌eglAp-Her2/neu-IL12融合基因穿梭表达载体的构建[D].青岛大学.2011

[8].梁晓梅.大肠杆菌—枯草芽孢杆菌穿梭表达载体pBE2R的构建及应用[D].天津科技大学.2011

[9].满丹丹.日本血吸虫重组pBCG-Sj14-Sj26原核穿梭双表达载体的构建及其在耻垢分枝杆菌中的表达[D].华中科技大学.2011

[10].全梅芳,余凯,夏立秋,丁学知,曾凡军.大肠杆菌-链霉菌穿梭表达载体pMF的构建及其应用[J].微生物学报.2010

论文知识图

过表达突变体单菌落在荧光显微镜下发出...) 绿色荧光蛋白标记穿梭表达载体...一2穿梭表达载体pHY300一FlgfP的...以及酶切验证穿梭表达载体的...2 穿梭表达载体的构建一3E.c口挤祛刃勿ri穿梭表达载体...

标签:;  ;  ;  ;  ;  ;  ;  

穿梭表达载体论文_刘燕,张宏福,孙哲,杨琳,王瑞军
下载Doc文档

猜你喜欢