崔宇[1]2003年在《遗传性视网膜色素变性大鼠之感光细胞凋亡与Bax和FasL蛋白表达的关系》文中认为目的 探讨遗传性视网膜色素变性中凋亡的感光细胞(photoreceptor，PRC)组织结构变化规律及其可能的分子调控机制。 方法 对出生后9、17、22、27、30、35、40、60天的RCS(Royal College of Surgeon)大鼠各4只及同龄Wistar大鼠各2只的视网膜组织结构行光镜及电镜观察，应用免疫组织化学方法检测Bax、FasL两种促凋亡蛋白在视网膜中的表达及分布。 结果 (1)HE染色：与同龄Wistar大鼠相比，RCS大鼠视网膜于22天时感光细胞外节开始出现排列紊乱及明显的空泡现象，少数感光细胞核开始深染；于27天时细胞核数量开始减少，大量感光细胞核深染，少数核皱缩甚至固缩，之后感光细胞迅速减少；出生后60天仅存在极少量感光细胞，内节几乎完全消失。 (2)透射电镜观察：RCS大鼠出生后9天即已出现紊乱的外节，异常的外节呈卷曲样；17天时，异常外节继续增多，聚积于色素上皮细胞与感光细胞内节之间，并出现空泡。色素上皮细胞与外节紧密接触，胞浆内可见吞噬颗粒及未降解的外节，但密度及数量明显少于对照组；22天时，有散在的感光细胞核染色质发生浓集，细胞皱缩。生后27天大量感光细胞核固缩，内节卷曲并消失；生后30天至60天，感光细胞持续退变并消失，内节变短以至消失，残留的外节呈巨大同心涡轮状。双极细胞及节细胞在RCS大鼠出生后的以上时间内，除线粒体肿胀外，均未出现其他明显的异常变化。 (3)Bax蛋白免疫组织化学检测：RCS大鼠视网膜外核层22～40天可见阳性细胞，阳性颗粒主要分布在感光细胞胞浆和内节。27天时阳性细胞大量增多，30天时阳性染色达到高峰(P＜0.05)。60天外核层无阳性染色，其他各层未见阳性细胞。对照组各时间点均无阳性染色。 (4)FasL蛋白免疫组织化学检测：RCS大鼠视网膜外核层22天出现散在的阳性细胞，30天时染色最强(P＜0.05)，几乎所有的感光细胞均呈阳性染色，且阳性颗粒主要分布在胞膜；40天时几乎见不到阳性细胞。视网膜其它各层及对照组视网膜各层以上各时间点均无阳性染色。 中文摘要 结论遗传性视网膜色素变性中感光细胞变性具有细胞凋亡的形态特 -征;RCs大琴攀早于出生后”天感光细胞外节即发生异常，““天呈现出凋亡的形态学变化，提示光照并非导致外节异常膜盘大量堆积的关键，而膜盘的堆积则可能是促使感光细胞变性的诱因;双极细胞及节细胞出现跨神经元变性，但早期其整体形态特征未受影响;RcS大鼠感光细胞中Bax蛋白和FasL蛋白两种促凋亡因子可能协同调控感光细胞的凋亡。
佚名[2]2004年在《眼底病专题》文中提出S1-01脉络膜新生血管膜治疗新进展严密四川大学附属华西医院眼科S1-02年龄相关性黄斑变性发病机制的研究进展Shikun He(何世坤)Department of Pathology and Ophthalmology,Keek School of Medicine at the University of Southern California,Doheny Eye Institute,Los Angeles
乔淑红[3]2005年在《促红细胞生成素对视网膜缺血及视网膜变性的防治作用》文中认为目的 观察促红细胞生成素(EPO)对视网膜缺血的防治作用,探讨其对视网膜缺血神经元保护的可能机制。 方法 应用前房加压法制作大鼠视网膜缺血模型,36只雄性Wistar大鼠随机分为正常组4只,其余32只分为生理盐水组和EPO组。EPO组及生理盐水组于模型制作前24h腹腔分别注射rhEPO(5,000U/kg)及等量生理盐水,再根据灌注时间的不同,又分为再灌注后12、24、48、72h组。EPO检测观察EPO在大鼠视网膜的表达。苏木精-伊红(HE)染色和TUNEL法检测观察EPO组及生理盐水组视网膜神经元的存留。应用免疫组织化学方法检测Caspase-2、Bcl-2、Fas、FasL蛋白的表达。 结果 (1)EPO检测:缺血组大鼠和正常组大鼠视网膜皆可见EPO的表达,且其表达主要见于大鼠视网膜内层。缺血再灌注24h后,大鼠视网膜EPO的阳性染色减少。缺血再灌注48h,大鼠视网膜EPO的阳性染色急剧减少到正常组大鼠的50%。 (2)HE染色:生理盐水组大鼠视网膜缺血再灌注12h后,内核层(inner nuclear layer,INL)轻度变薄,细胞数目减少。24h后,视网膜主要表现为节细胞数目减少,细胞变性,INL排列紊乱,细胞数目减少,外核层(outer nuclear layer,ONL)变化不明显。48h后,视网膜内层继续变薄,INL细胞数目明显减少。72h后,视网膜内层明显变薄。与生理盐水组相比,缺血再灌注后不同时间EPO组大鼠视网膜从内核层到内界膜的厚度均超过生理盐水组(P<0.01),INL细胞数目和神经节细胞数目多于生理盐水组,且排列较规整。 (3)TUNEL检测:正常组大鼠视网膜TUNEL染色阴性。生理盐水组大鼠视
倪同上[4]2013年在《枸杞子提取物在病理模型中的探索性研究》文中指出构杞子是茄科植物宁夏枸杞的成熟干燥果实,为我国常用中药。枸杞成分复杂,本实验采用化学成分明确的枸杞子提取液LBA及枸杞多糖LBP,在常见临床病理模型：视网膜缺血、视网膜神经变性RCS大鼠及糖尿病胃瘫模型中,探索其药理学作用,为枸杞的临床应用提供理论基础和新药思路。第一部分枸杞子提取液在视网膜缺血模型中的研究目的：观察枸杞子提取液(LBA)对视网膜缺血的防治作用并探索其与细胞凋亡的相关联系。材料与方法：建立前房加压诱导的大鼠视网膜缺血模型,将36只雄性Wistar大鼠随机分组,正常组4只,生理盐水组(NS组)16只,LBA组16只。LBA组及NS组于模型制作前28天分别连续经口喂食LBA (1mg/kg)及等量生理盐水(NS),LBA组及NS组根据灌注时间的不同,再分为灌注后12h、24h、48h及72h四组。采用HE染色和TUNEL法检测,观察LBA组及NS组视网膜中各层神经元的变化,应用免疫组织化学方法检测Fas/FasL蛋白的表达探索其与细胞凋亡的联系。结果：(1)HE染色：NS组大鼠内核层缺血再灌注12小时之后厚度轻微变薄,细胞数略微减少,此时内网层、外网层及外核层变化不大。24小时后,外网层变薄,外核层变化轻微,内核层结构层次紊乱,视网膜以节细胞数减少最为显着。48小时后,各层厚度变薄程度逐渐更加明显,以内核层最为显着,细胞数大量减少。72小时后,各层细胞进一步变薄。与NS组相比,不同时间点LBA组大鼠内核层至内界膜厚度,均超过NS组(P<0.01),内核层细胞数和节细胞数比NS组多,细胞形态及排列也比较规整。(2) TUNEL检测：正常鼠无细胞凋亡表现,TUNEL染色呈阴性反应。12小时后生理盐水组内核层与视网膜节细胞层均可观察到TUNEL阳性细胞,到24hTUNEL阳性细胞明显增多,内核层最为明显,而外核层无明显的细胞凋亡征象。24h开始TUNEL阳性细胞逐渐减少,到72h时凋亡细胞只有3-6个/100μm。LBA组TUNEL阳性细胞表达规律与盐水对照组类似,TUNEL阳性细胞在12、24、48h比生理盐水组有显着减少。(3) Fas/FasL染色：正常鼠不表达Fas/FasL阳性细胞。12小时后生理盐水组内核层与视网膜节细胞层均可观察到Fas的少量表达；到24h后Fas阳性细胞明显增多,内核层最为明显。到72h后Fas阳性细数明显减少。LBA组Fas阳性细胞表达规律与盐水对照组类似,Fas阳性细胞细胞在各个时间段比生理盐水组均有显着减少。FasL的表达表达规律早期与Fas及TUNEL染色表达规律均相似,12小时后生理盐水组内核层与视网膜节细胞层均可观察到FasL的少量表达,24h后FasL阳性细胞明显增多,达到高峰,以后逐渐下降但72h后仍维持高表达。LBA组FasL阳性细胞数在各个时间段比生理盐水组均有显着减少。结论：(1)视网膜缺血模型前28天连续经口喂食LBA1mg/kg,可以有效保护大鼠视网膜,内核层变薄程度显着降低,各层细胞数比对照组也显着增加。(2)细胞凋亡是导致视网膜缺血再灌注损伤原因之一,大鼠经口喂食LBA可以显着降低此类凋亡。(3) Fas/FasL凋亡信号系统的参与是造成视网膜神经元损伤的机理之一,LBA通过有效降低Fas/FasL阳性细胞数,达到保护视网膜缺血损伤的作用。第二部分：枸杞子提取液对RCS大鼠视网膜的探索性研究目的：观察枸杞子提取液(LBA)对RCS大鼠视网膜色素变性的治疗作用。方法：RCS大鼠60只,随机分为给药组和对照组各30只。给药组大鼠出生后第10天开始喂食LBA(1mg/kg),对照组大鼠喂食等量生理盐水。两组大鼠分别在生后25、35、50d处死,取出眼球,制备组织切片,HE染色和TUNEL检测视网膜感光细胞的数量,Caspase-2染色检测LBA对细胞凋亡的作用。结果：给药组大鼠出生25d时,感光细胞数目比对照组细胞数目多；35d时,感光细胞数目较25d时有所下降；50d时感光细胞数目与对照组比较无明显差异。LBA组在第25天阳性感光细胞明显多于对照组。RCS大鼠给药组25d时TUNEL检测阳性细胞数目与对照组相比明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。RCS大鼠LBA组在25天和35天时Caspase-2阳性细胞主要分布于内核层及节细胞层,实验组第25天阳性细胞数为7.14±1.86,明显低于对照组(P<0.05),之后两组差别逐渐变小,到第50天,两组的阳性细胞数差别不大。结论：在RCS大鼠视网膜变性的早期,LBA可以使感光细胞得到更多存留,对早期变性的神经元发挥保护作用。LBA对凋亡的抑制作用可能与抑制Caspase-2蛋白表达有关。第叁部分：LBP对大鼠糖尿病胃瘫模型血糖及胃动力研究目的：本实验采用枸杞多糖(LBP)对糖尿病大鼠模型并发症胃瘫进行探索性研究,希冀为糖尿病胃瘫的临床治疗提供依据和新的治疗方法。材料与方法：本实验中,LBP的口服剂量分为叁组,每天100,200and400mg/kg,实验前提前连续喂食28天后,建立链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠病理模型,测量血液中葡萄糖、胰岛素含量及胰岛素抵抗指数(IRI)、Ghrelin、Ghrelin mRNA、胃排空率、凋亡指数(AI)及Bcl-2/Bax比值,并进行相应的分析。结果：LBP显着降低葡萄糖、胰岛素及IRI水平(P<0.05)。Ghrelin在LBP给药后显着升高,呈剂量依赖性(P<0.05)。糖尿病大鼠Ghrelin mRNA在胃粘膜表达增加,但在LBP给药后显着降低(P<0.05)。糖尿病LBP给药组胃动力及胃排空率比对照组显着增高(P<0.05)。Bcl-2/Bax比值糖尿病LBP给药组比对照组显着增高(P<0.05),凋亡指数显着降低(P<0.05)。结论：实验中我们发现LBP通过降低血糖及IRI水平,增加胃粘膜Ghrelin的表达及降低胃细胞凋亡,能显着改善糖尿病胃瘫的胃动力状况。
乔淑红[5]2002年在《遗传性视网膜变性中感光细胞凋亡与Fas和Bcl-2蛋白的表达》文中认为目的 探讨遗传性视网膜变性中感光细胞凋亡及其可能的基因调控机制。 方法对出生后9，15，20，25，30，35，40，60天RCS(RoyalCollege of Surgeon)大鼠及同龄SD(Sprague-Dawley)大鼠各4只的视网膜组织结构进行HE染色光镜观察、TUNEL(TdT-mediated dUTPnick-end labeling)细胞凋亡检测、Fas，bcl-2蛋白免疫组织化学检测。 结果 (1)HE染色：与同龄SD大鼠相比，RCS大鼠15天组视网膜的感光细胞视杆层增厚，靠近色素上皮细胞(PRE)的视杆层出现空泡，排列紊乱。视杆层的厚度在25天达到高峰。感光细胞的数目在20天时有所下降，到出生后60天，仅少许感光细胞保留，30～40天是感光细胞消失的高峰期。内核层细胞、神经节细胞形态和数目基本正常。 (2)TUNEL检测：出生后25～40天，RCS大鼠视网膜可见TUNEL呈阳性的感光细胞，TUNEL阳性细胞数35天达高峰。阳性产物的平均光密度值35天最大。 (3)Fas蛋白免疫组织化学检测：RCS大鼠视网膜内核层15～40天可见Fas免疫阳性颗粒，Fas阳性细胞数25天最多，阳性颗粒的平均光密度值25天最大。外核层25天可见Fas免疫阳性表达，一直持续到40天。节细胞层15～40天可见Fas免疫阳性表达。 (4)Bcl-2蛋白免疫组织化学检测：25～40天节细胞层可见少许Bcl-2免疫阳性表达。内核层25～40天可见免疫阳性表达，免疫阳性细胞数35天最多，外核层一直未见明显阳性表达。 中文摘要 结论RCS大鼠视网膜变性过程中，感光细胞发生了凋亡。Fas蛋白高表达可能与感光细胞的凋亡有关，Bcl．2蛋白低表达或不表达可能与感光细胞的凋亡无明显关系。
参考文献：
[1]. 遗传性视网膜色素变性大鼠之感光细胞凋亡与Bax和FasL蛋白表达的关系[D]. 崔宇. 青岛大学. 2003
[2]. 眼底病专题[C]. 佚名. 中华医学会第九届全国眼科学术大会论文汇编. 2004
[3]. 促红细胞生成素对视网膜缺血及视网膜变性的防治作用[D]. 乔淑红. 青岛大学. 2005
[4]. 枸杞子提取物在病理模型中的探索性研究[D]. 倪同上. 山东大学. 2013
[5]. 遗传性视网膜变性中感光细胞凋亡与Fas和Bcl-2蛋白的表达[D]. 乔淑红. 青岛大学. 2002
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