张盼盼[1]2013年在《在线及离线富集技术在痕量毒性成分分析中的研究与应用》文中指出药物中的某些毒性成分，在一定剂量下呈现毒性，但在较低剂量下还具有一定的生理活性，这类成分又可称为毒效成分。其中，乌头类生物碱是典型的毒效成分，中毒剂量为0.2mg.kg~(-1)，致死量为2.5mg；但在较低剂量下又具有显着的生理活性，广泛应用于临床治疗中。因此，对于含有乌头属植物的中药制剂，乌头碱的分析测定对保证用药安全有效具有重要意义。附子理中丸是一种传统的中药制剂，处方中，附子作为君药，有效成分为乌头类生物碱。课题建立了毛细管电泳场放大在线富集技术(FASS-CE)快速检测附子理中丸中的乌头碱类毒性成分的方法。根据乌头碱类的碱性性质，加酸以除去脂溶性杂质，之后碱化，乙醚萃取除去水溶性杂质。运行缓冲溶液为50mmol·L~(-1)磷酸盐缓冲溶液(pH=8.5)-乙腈(60:40)；在进样之前预进水柱5s，采用电迁移进样，进样电压12kV，进样时间15s；运行电压10kV；紫外检测波长为235nm；结果表明，乌头碱和次乌头碱分别在15.6～1.0×10~3μg·L~(-1)，31.25～2.0×10~3μg·L~(-1)线性关系良好，回收率分别为98.7%和97.1%，RSD分别为3.1%及2.1%。所建方法大大提高了乌头碱类生物碱的专属性和灵敏度，使检测灵敏度提高了400倍。为含有乌头类生物碱的限量检测提供了一种新型、可靠、方便实用的分析手段。参附注射液源于古方“参附汤”，是以红参、附子为主要成分的中药注射液，具有回阳救逆，益气固脱的作用。在其生产过程中，除对附子药材的炮制处理有严格的要求外，还需通过特有的水解转化等工艺降低其毒性。制剂中的乌头类生物碱含量极低，由于常规分析仪器灵敏度的限制，通常仅进行限量检查，以确保用药安全，但是往往忽略了附子作为中药方剂中君药的药学学地位，为正确评价附子的君药药效学作用，迫切需要建立高灵敏度的检测方法对其进行定量检测。课题采用具有纯化富集能力的HF-LPME法，结合UPLC-MS/MS，建立了参附注射液中叁种痕量附子指标成分的含量测定方法。样品首先经HF-LPME进行纯化富集，采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(50mm×2.1mm，1.7μm)，乙腈-10mmol·L~(-1)NH_4HCO_3溶液(pH=10)为流动相，流速为0.45mL·min~(-1)，梯度洗脱。电喷雾电离(ESI)、多反应监测(MRM)方式进行含量测定。结果表明，乌头碱、次乌头碱和新乌头碱在0.1~-100ng·L~(-1)线性关系良好，r＞0.999，检测限分别为0.0~3，0.0~3，0.02ng·L~(-1)，平均加样回收率分别为100.1%，97.4%，97.5%；RSD分别为1.2%，1.1%，1.5%。本方法能够定量分析制剂中3种痕量乌头类生物碱的含量，不仅保证了参附注射液的用药安全，同时体现了方中附子的君药药效学作用，为含有附子的中药制剂的质量控制提供了可靠方便而实用的检测手段。乌头类生物碱植物种类较多，民间使用广泛，但其毒性较强，引发的中毒事件屡有发生。但由于其在体内代谢迅速，取证困难，用药史难以追溯，寻求更高灵敏度的乌头类生物碱检测方法对乌头类生物碱中毒的取证与用药史追溯具有重要的意义。本文采用HF-LPME-UPLC-MS/MS建立了尿样中痕量的乌头碱、次乌头碱、新乌头碱和滇乌头碱等4种生物碱的检测方法。首先采用HF-LPME对尿样进行提取、纯化和富集，富集倍数分别为102，137，301和119倍。方法显着提高了尿样中乌头类生物碱的检测灵敏度，4种乌头类生物碱的定量限均达到0.01-0.1ng·L~(-1)，提取回收率为80.2%~109%，RSD小于4.6%。大大延长中毒患者尿样中乌头类生物碱的检测时间窗，特别适用于乌头类生物碱中毒案件的取证调查，也为涉及乌头类生物碱的案例提供了可追溯其用药历史可行的方法。苯丙胺(又称安非他明)类中枢神经兴奋类毒品的滥用已成为当今世界严重的社会问题。灵敏的检测方法不仅对发现侦破遏制毒品犯罪具有积极的意义，同时高灵敏的生物样本中毒品的检测方法，对涉毒人员用药史追溯、取证具有重要意义。课题采用了HF-LPME纯化富集方法结合FASS-CE建立了尿中痕量苯丙胺类毒品检测方法，其对甲基苯丙胺(MA)和3,4-亚甲基二氧基甲基苯丙胺(MDMA)的富集倍数高达20万倍。方法首先采用HF-LPME对尿样进行提取、纯化和富集后，采用FASS-CE进行分析测定，运行缓冲溶液为30mmol·L~(-1)磷酸二氢钠(pH4)-乙腈(80:20)；预进水柱5s后，电迁移进样20s，电压12kVs；运行电压15kV；检测波长为214nm；结果表明，MA和MDMA分别在0.05~20μg·L~(-1)，0.1~20μg·L~(-1)线性关系良好，LOD分别为0.01和0.02μg·L~(-1)，平均回收率分别为101.5%，98.8%。所建方法大大提高了定量分析中的专属性和灵敏度，显着提高了检测灵敏度，且基质效应干扰较小，回收率较高，对涉毒人员用药史追溯、取证具有重要意义。
尹晓芳[2]2011年在《毛细管电泳富集新技术在农药残留及药物分析中的应用》文中指出毛细管电泳(Capillary Electrophoresis, CE)以其分离效率高、分析时间短、样品需要量少、操作费用低等优点,日益成为一种高效的分离分析方法。但由于其进样体积小和检测光程短,对常用的紫外检测器而言,CE的一个主要缺陷是灵敏度较低,解决此问题的一个有效途径是采用离线或在线样品富集的方法。在线富集技术具有简单经济,无需对商品仪器进行改造的优点。样品在线富集方法如推扫、阴阳离子耗尽进样一推扫、场放大样品堆积、pH调制酸(碱)堆积、pH梯度一推扫、胶束解离样品堆积、胶束有机溶剂堆积等己经成功应用于各种样品的分析中。在系统查阅有关文献资料的基础上,进行了以下研究工作:1.建立了分散液液微萃取与胶束毛细管电动色谱在线推扫(DLLME-sweeping- MEKC)测水样中的叁嗪类除草剂残留的快速、灵敏检测方法。并对影响萃取和推扫效果的参数,例如萃取剂和分散剂的种类及用量、萃取时间、加盐量、水溶液pH值、缓冲溶液pH、浓度进行了优化。在最优条件下,五类除草剂的富集倍率高达17540~28 800。此方法的线性获得范围0.15~20 ng/mL,线性相关系数范围为0.9994~0.9997,检出限为0.05~0.10 ng/mL。日内相对标准偏差为1.5%~5.1% (n=5)和2.9%~5.6%(n =15)。在河水、井水和地表水水样中五类除草剂相对回收率在0.5 ng/mL和20.0 ng/mL的混合水平上分别为94.9%~112.0%和80.7%~100.6%。该方法已成功地应用于分析实际水样中的叁嗪类除草剂残留。2.建立了分散液液微萃取与胶束毛细管电动色谱在线推扫测定黄瓜中的烟碱类杀虫剂(噻虫啉、啶虫脒、氯噻啉和吡虫啉)残留的快速、灵敏的新方法。并对影响萃取和推扫效果的因素、萃取剂和分散剂的种类及用量、萃取时间、盐浓度、样品基质和缓冲溶液浓度等进行了优化。在最优条件下,此方法的富集倍率达到4320~9957倍(峰面积),检出限为0.7~1.2 ng/g,定量限(信噪比为10:1)3~5 ng/g,线性范围噻虫嗪,啶虫脒和吡虫啉为4.0~200 ng/g,氯噻啉为5.0~200 ng/g。日内和日间相对标准偏差范围分别是3.8%~4.4%(n=5)和6.5%~8.5%(n=15)。在黄瓜中加标浓度为10 ng/g和50 ng/g的相对回收率在83.0%~98.6%之间,相对标准偏差低于6.3%。该方法已成功地应用于分析黄瓜样品中的烟碱类杀虫剂。3.建立了胶束溶剂堆积毛细管区带电泳法(MSS-CZE)测定马钱子制剂中的士宁和马钱子碱的含量。选择pH 4.0 30 mmol/L磷酸盐(含20%乙腈)为缓冲液,样品基质:8 mmol/L磷酸盐,5 mmol /LSDS为样品基质;分离电压20 kV,进样0.5 psi 150s,DAD检测波203 nm。士的宁和马钱子碱的浓度在0.2~15.0μg/mL内线性良好,线性相关系数分别为0. 9984和0. 9976,在中药制剂样品中加标回收率均在94.1%~114.4%之间,检测限分别0.02和0.05μg/mL。相对标准偏差在2.21%~4.56%之间MSS-CZE可有效地分离、测定马钱子中药制剂中的士的宁和马钱子碱的含量,方法简便、快速、准确、可靠。可作为药材中有效成分质量控制的方法。4.建立了胶束解离样品富集胶束毛细管电动色谱方法(AFMC-MEKC)测定苦参及其制剂中的氧化苦参碱和苦参碱的方法。选择20 mmol/LpH 9.5硼砂和30 mmol/L SDS(含30%甲醇)为缓冲液,6 mmol/LSDS,30 mmol/L硼砂为样品基质,未涂层熔融石英毛细管柱(内径75μm,总长50 cm,有效长度40 cm)分离电压20 kV,进样0.5 psi,120 s,紫外检测波长205 nm,温度25℃的条件下进行测定。氧化苦参碱,苦参碱的浓度在1.0~100.0μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系,线性相关系数分别为0.9954和0.9996,检出限分别为0.3,0.02μg/mL。该方法已用于苦参及其苦参片制剂药品中氧化苦参碱和苦参碱含量的测定,其样品平均回收率在96.3%~107.2 %之间,取得了满意的结果。
李保会[3]2002年在《在线富集技术在药物中的应用及假峰现象的研究》文中研究指明自从毛细管电泳(CE)问世以来，就以它的快速高效得到了广大分析工作者的青睐。但长期以来，检测灵敏度不够高成为困扰毛细管电泳进一步扩展其应用范围的主要问题，在线富集技术在一定程度上解决了这个难题。全文共分五章，分别介绍了CE和在线富集技术的发展概况、CE和在线富集技术在药物分析中应用以及在线富集技术中的假峰现象。 第一章：介绍了毛细管电泳(CE)的基础理论和毛细管电泳在线富集技术的发展状况以及富集过程中的假峰现象。 第二章：建立了碱性条件下利用在线富集Sweeping技术测定盐酸丁咯地尔中的痕量杂质的分析方法。结果表明痕量组分富集和检测的最佳缓冲溶液组成为14mmol／L NaH_2PO_4+15mmol／L Na_2B_4O_7+50mmol／LSDS(十二烷基磺酸钠)(pH=9.05)，进样时间为120s，电压18kV，紫外检测214nm。此方法用于富集和检测盐酸丁咯地尔中的痕量杂质具有检测灵敏度高、定量准确的特点。 第叁章：建立了胶束毛细管电泳(MEKC)在线富集和拆分痕量手性药物扑尔敏的分析方法。并分别考察了不同因素对拆分效果的影响和检测限的影响。试验证明扑尔敏的最佳富集拆分条件为50mmol／LSDS+50mmol／Lβ-CD+100mmol／L SDC(脱氧胆酸钠)+30mmol／L Na_2B_4O_7。在此条件下，扑尔敏的检测限降低到4.1mg／L。同时这种方法也适用于其它痕量手性药物的拆分富集。 第四章：调查了在线样品Sweeping富集技术中假峰出现的原因。在不同样品的情况下考察了进样时间、SDS浓度、缓冲液pH值、pH值梯度等因素对假峰的影响。试验结果表明pH值梯度是影响假峰出现的一个重要原因。在实验过程中为避免假峰的出现，应尽量使阴极和阳极的pH值保持一致。 第五章：建立了毛细管电泳手性拆分药物氨氯地平及其中间体的方法。考察了不同手性拆分试剂、pH值、环糊精的浓度以及电压对手性选择性的影响。试验证明拆分的最佳条件为缓冲液：50mol／L CM-β-CD+30mmol／L磷酸盐，缓冲液pH=6.12，电压12kV．在此条件下，氨氯地平及其中间体都能得到满意的分离度。
韩丹丹[4]2008年在《毛细管电泳在几种药物分析中的应用》文中研究表明毛细管电泳(Capillary Electrophoresis，CE)以其分离效率高，分析时间短、样品需要量少、操作费用低等优点，日益成为一种高效分离分析方法。但由于其进样体积小和检测光程短，对常用的紫外检测器而言，CE的一个主要缺陷是灵敏度较低，解决此问题的一个有效途径是采用离线或在线样品富集的方法。在线富集技术具有简单经济的特点，无需对商品仪器进行改造。样品在线富集方法如推扫、阴阳离子耗尽进样-推扫、场放大样品堆积、pH调制酸(碱)堆积、pH梯度-推扫等已经成功应用于各种样品的分析中。在系统查阅有关文献资料的基础上，进行了以下研究工作：(1)建立了毛细管区带电泳法测定阿魏酸、绿原酸、咖啡酸等有机酸的方法。以pH=8．7的150mmol／L硼酸为缓冲溶液，在0．5psi进样8s，分离电压23kV，检测波长320nm，温度25℃的条件下进行测定。阿魏酸、绿原酸、咖啡酸的浓度在0．01～0．2mg／mL范围内与峰面积呈良好的线性关系，线性相关系数分别为0．999，0．997和0．999，检出限分别为0．2，0．4，0．2μg／mL。该方法已用于金银花、蒲公英、蜂胶、感冒止咳颗粒等实际样品中阿魏酸、绿原酸、咖啡酸含量的测定，其样品平均回收率在96．0％～100．4％之间，取得了满意的结果。(2)建立了在线推扫富集毛细管电泳紫外检测测定药物和人血清中尼莫地平浓度的方法。以pH=1．45的50mmol／LH_3PO_4，20％乙腈和100mmol／LSDS为分离缓冲溶液，在0．5psi下进样270s，检测波长235nm，分离电压为-20kV的条件下进行测定。尼莫地平的浓度在0．2～15μg／mL范围内与其峰面积呈良好的线性关系，线性相关系数为0．998，检出限为0．1μg／mL(信噪比S／N=3：1)。(3)建立了场放大富集毛细管电泳测定中草药草乌、川乌样品中的乌头生物碱的方法。以pH=8．0的60mmol／L硼砂，20％乙腈为分离缓冲溶液，在10kV下进样20s，分离温度20℃，检测波长200nm，分离电压10kV的条件下进行测定。乌头碱、次乌头碱和新乌头碱浓度在0．5～10μg／mL范围内与峰面积呈良好线性关系，线性相关系数分别为0．992，0．985和0．993，检出限分别为0．10，0．13和0．20μg／mL(信噪比S／N=3：1)。
江峥[5]2009年在《在线富集技术在体内药物分析中的研究与应用》文中研究指明高效毛细管电泳技术(HPCE)和液相色谱质谱联用技术(LC-MS)是当前分离分析科学中应用最为广泛,研究最为活跃的领域之一。但由于检测灵敏度低或分析通量有限,使两者在体内药物分析中的应用受到较大制约。样品在线富集技术是一种提高方法灵敏度的方法,由于其操作简便、成本低、自动化程度高、易于实现等优点,得到了越来越广泛的应用。研究分别基于高效毛细管电泳技术和液相色谱质谱联用技术的样品在线富集方法,对进一步拓展两者在药物体内研究和临床应用范围具有重要意义。本课题对基于高效毛细管电泳技术的在线样品富集技术以及基于液相色谱质谱联用的在线固相萃取技术在体内药物分析中的应用进行了研究。选择不同的模型药物,建立在线富集方法,并进行优化和验证,为药代动力学研究或临床治疗药物监测(TDM)提供可靠、有效且经济的定量手段。具体工作归纳如下:1.建立了场放大进样-反向迁移胶束(FESI-RMM)胶束电动毛细管色谱法(MEKC)在线富集、分离并检测人血浆中的伊曲康唑及其主要活性代谢物羟基伊曲康唑。以液液萃取法对血浆样品进行纯化,去除大部分的蛋白和盐,并离线富集待测组分。最佳富集条件下,方法灵敏度可提高2个数量级,最低检测限在0.05μg/mL。该方法富集能力强,对仪器设备无特殊要求,易于实现,且重现性好、灵敏度高、成本低廉,已应用于隐球菌性脑膜炎患者血药浓度测定,为临床用药提供参考。2.建立了自动化在线固相萃取-液相色谱质谱联用方法,纯化、富集、分离并检测人血清中的烯丙雌醇。在原有的液相色谱系统基础上进行简单改造,建立在线固相萃取系统,并使用正冲模式洗脱模式。血清样品经乙酸乙酯提取后直接进样。在优化后的条件下,方法的最低定量限为0.01μg/mL。该方法快速、简便、灵敏、可靠,简化了前处理方法,提高了分析通量,可用于常规的临床治疗药物监测和体内药代动力学研究。
李琴[6]2011年在《毛细管电泳及其质谱联用技术在违禁药物检测中的研究与应用》文中进行了进一步梳理毛细管电泳（CE）是八十年代初发展起来的一种现代分离新技术，它具有分离效率高、样品消耗少、分析速度快等优点，受到人们的广泛关注。但是，紫外检测器由于检测光程短，检测灵敏度低，限制了CE的发展。毛细管电泳-质谱（CE-ESI-MS）联用，尤其是串联质谱（MS/MS）联用技术大大提高了CE分析生物样品的能力。此外，样品在线富集技术是提高CE检测灵敏度另一个简单、有效的方法。因此，本论文分别采用微乳液毛细管电动色谱（MEEKC）结合在线富集技术、CE-ESI-MS联用技术及CE-ESI-MS结合在线富集技术应用于违禁药物检测。本论文共分四章，分述如下：在论文的第一章中，分别对MEEKC，CE-ESI-MS联用技术，在线富集技术和违禁药物的研究现状做了简要介绍，并介绍了本论文的主要研究内容及意义。在论文的第二章中，主要研究了微乳液毛细管电动色谱法结合场放大富集法同时测定九种麻醉剂，该法快速、灵敏、重现性好。九种被分析物在15min内达到基线分离，检测限（S/N=3）低至0.3-8.0ng/mL，模拟尿样回收率在79.4-119.9%之间。该方法可用于美沙酮大鼠体外代谢产物的测定，结果令人满意。在论文的第叁章中，建立了一种简单、快速、灵敏的CE-MS联用技术同时测定七种刺激剂和麻醉剂。在最佳实验条件下，七种待测物质在4.6min内达到基线分离，检测限（S/N=3）为0.4-1.0ng/mL。模拟尿样样品回收率在84.1到108.0%之间，RSDs低于7.5%。该方法被成功用于美沙酮、哌替啶、可待因体外代谢产物的分析。在论文的第四章中，采用CE-MS联用技术测定四种抗胆碱药，并进一步运用场放大在线富集技术以提高检测灵敏度。在最佳富集条件下，四种抗胆碱药的检测限（S/N=3）低至0.02-0.05ng/mL。最后，该方法成功应用于测定含有山莨菪碱药物的实际尿样中。
孙艳[7]2015年在《毛细管电泳富集技术在食品中几类药物残留分析中的应用》文中进行了进一步梳理人用及兽用药物的药物残留已经成为食品安全领域备受关注的热点问题,由于其在日常中使用普遍,用量较大,在使用中存在操作不当的问题,导致其在环境中、食品中残留,这些残留的药物可通过食物链或者其它方式进行累积,从而对人体的健康造成威胁,因此,需要研究者开发建立灵敏、快速、高效的分析检测方法来测定食品中的药物残留。目前,高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS)作为药物残留的主要检测方法,具有诸多优点,极强的定性定量特性使其在药物残留的检测中广泛应用,但该方法分析成本较高,在一般的分析实验室中难以得到普遍的应用。毛细管电泳(CE)作为一种具有分离效率高、分析速度快、分析成本低、样品及溶剂量用量少等优点的分析方法,在药物残留分析方面具有很大的潜力。但CE的灵敏度较低,必须建立有效的柱前／柱上富集技术,才能发挥其优势,实现其在药物残留分析方面的广泛应用。基于此,本论文以水体(饮用水、池塘水、废水)中的药物及个人护理品(PPCPs)、食品(鸡肉、蜂蜜)中的磺胺类药物及沙星类药物为研究对象,建立了毛细管富集技术(包括柱前富集技术和柱上富集技术)对其进行了分离测定,探讨了扫集法及场放大样品堆积在线富集技术的原理、影响分离富集的重要因素等,并对所建立的分析方法的进行了应用,具体如下：1、近年来,PPCPs是水体中较为普遍的一类残留药物,已经引起国内外的广泛关注,本章选择四种常见的PPCPs包括沙丁胺醇硫酸盐、西咪替丁、卡马西平及布洛芬,许多发表的文献都在水体中检测到了这四种药物的存在,而且四种目标物极性范围较广(logP:0.4-3.97),很难在HPLC中用常规的ODS柱进行分离。基于此,本部分实验采用固相萃取技术(SPE)为柱前富集技术,联合毛细管区带电泳建立了饮用水、池塘水、废水中四种PPCPs的检测方法。优化的电泳条件是运行缓冲液的组成为20mmol/L K2HPO4, pH6.70,样品溶剂为含20%甲醇的10mmol/L K2HPO4。该方法在3.0-20.0mg/L之间呈现良好的线性关系,方法的检出限为1.3-2.9μg/L, RSD<5%,样品回收率在89.7-108%,结果满意。利用建立的方法测定了四种水体,结果显示水样中均检测到卡马西平的存在。2、在上一章的的基础上进行延伸,研究了上一章中四种PPCPs的毛细管电泳在线富集技术,建立了四种带电性不同的PPCPs即沙丁胺醇硫酸盐、西咪替丁、卡马西平及布洛芬的扫集法在线富集技术,探讨了扫集法富集的原理,并对富集条件进行优化。最优的电泳条件为：以20mmol/L硼酸-50mmol/L十二烷基硫酸钠(SDS)为缓冲液,pH8.35,添加浓度为2mmol/L的离子对试剂1,2-环已二胺提高富集效果,分离电压为10kV,35mbar压力下进样40s。结果表明：所建立的扫集法富集技术可作为PPCPs的一种在线富集技术,富集倍数约为20-30倍,虽然还需要结合柱前富集技术SPE,但扫集法在线富集技术可减少SPE的上样量,提高效率。3、磺胺类药物和沙星类药物是广谱性的抗菌药,用于猪、鸡、蜜蜂等养殖过程中抵抗病原微生物,由于养殖中存在大量使用、未遵守休药期等问题,从而导致其在动物性食品中残留。本章内容以人们日常生活中常食用的鸡肉和蜂蜜为对象,采用场放大样品堆积柱上富集技术,建立了鸡肉和蜂蜜中四种磺胺类药物及两种沙星类药物的毛细管电泳检测方法。电泳缓冲液为30mmol/L K2HPO4,0.3mmol/L十六烷基叁甲基溴化铵(CTAB),添加5%甲醇,pH7.5,并优化了样品溶剂(0.1mmol/L NaOH)和电动进样的时间(-8kV下进样20s)。鸡肉样品经液液萃取处理,蜂蜜样品稀释后过SPE柱后进CE分析,结果表明：鸡肉样品中未知杂质峰干扰氧氟沙星、磺胺吡啶的测定。蜂蜜样品中,由于其杂质峰较多,放大后与目标峰相连,难以定量,故采用固相萃取结合毛细管区带电泳测定蜂蜜中的目标物残留,该方法的检出限满足限定要求。
闫宏远[8]2004年在《在线富集技术在药物分析中的应用》文中认为自从毛细管电泳(CE)问世以来，就以它的快速高效得到了广大分析工作者的青睐。但是所有的毛细管电泳形式都不同程度受检测器，检测光程和进样量的限制，浓度响应灵敏度不是很高，使得该技术在应用于痕量分析时受到一定限制。检测灵敏度不够低成为了困扰毛细管电泳技术进一步发展的主要问题。在线富集技术在一定程度上解决了这个难题。全文共分五章，分别介绍了CE和在线富集技术的发展概况及CE和在线富集技术在环境监测和药物分析中的应用。 第一章：介绍了毛细管电泳(CE)的基础理论和毛细管电泳在线富集技术的发展状况。 第二章：采用在线富集技术建立了胶束电动色谱法同时测定工业废水中痕量苯酚、邻硝基苯酚、间硝基苯酚的方法。结果表明，在最佳分离条件下，间硝基苯酚的最大富集倍数可达1000倍。本方法不需复杂的样品预处理，操作简单，快速，成本低，在快速分离和连续监测方面有很好的应用前景。 第叁章：建立了胶束毛细管电泳(MEKC)在线富集技术测定国家二类新药那格列奈和第叁代喹诺酮类广谱抗菌药环丙沙星中痕量杂质的方法。分别考察了缓冲溶液pH值、SDS浓度、运行电压以及进样时间对富集效果的影响。结果表明，那格列奈和环丙沙星中的痕量组分富集和检测的最佳缓冲溶液组成分别为16mmol／L NaH_2PO_1+6 mmol／L Na_2B_4O_7+60mmol／LSDS(pH=7.14)和20 mmol／L NaH_2PO_4+12 mmol／L Na_2B_4O_7+60mmol／LSDS(pH=8.32)。在最佳条件下对那格列奈和环丙沙星进行了痕量杂质测定，其杂质总含量分别为0.56％和0.26％。此方法具有检测灵敏度高、定量准确的特点。本方法可用于药物的质量控制。 第四、五章：对在线推扫富集技术在测定生物体内药物中的应用进行了初步的研究。建立了胶束毛细管电泳法测定血液中痕量环丙沙星和那格列奈的方法。考察了背景溶液pH值、SDS浓度、进样时间、血样预处理方法等对乳酸环丙沙星和那格列奈富集效果的影响。在最佳测定条件下，环丙沙星的最大富集倍数可达600倍。本方法弥补了毛细管电泳在测定血液中痕量组分方面的不足，为毛细管电泳的体内药物分析及药代动力学研究、临床痕量治疗药物监测提出了新的途径。
李乐[9]2014年在《配位作用及样品前处理—场放大进样在毛细管电泳在线富集中的应用研究》文中提出毛细管电泳（capillary electrophoresis，CE）是一种基于电泳和色谱原理的分析技术。虽然该技术在药物分析领域工作中颇受欢迎，但是检测灵敏度低仍然成为影响其在痕量样品分析中的一个重要制约因素，目前已经报道了多种方法用来改善CE的检测限。扫集技术是CE在线富集技术中常用的一种方法，该方法在与质谱等检测器联用方面存在很大的缺陷，限制了CE在线富集的广泛推广。同时，对脂溶性药物的CE在线富集方面研究也相对较少。因此本文在原有富集方法的基础上，对富集体系做出进一步研究，并提出了新型的配位毛细管电泳-扫集（CICE-sweeping）在线富集技术以及样品前处理-FASS在线富集联用技术，这两种方法对扩大CE适用范围具有重要的意义。本论文的的具体工作内容如下：1.以氟喹诺酮类抗生素帕珠沙星、依诺沙星和环丙沙星为分析对象，建立了新型CICE-sweeping在线富集技术。在原有的CICE-sweeping在线富集体系的基础上，引入了EDTA区段和碱性高导区段，利用EDTA与金属药物配合物之间的配位置换作用，在毛细管内构建移动络合边界（moving chelation boundary，MCB）。通过对实验条件进行优化和富集体系验证，结果表明建立的新型CE在线富集技术具有良好的富集效果，较传统的CICE-sweeping法富集倍数可提高5-6倍，叁种药物的检测限在0.08-0.20μg/mL之间。实验最终将该方法应用到对兔血清中添加的痕量氟喹诺酮类抗生素进行定量检测，得到的回收率在89-94%之间。2.在上述建立的新型CICE-sweeping在线富集技术的基础上，对四环素类抗生素土霉素、金霉素以及多西环素进行了在线富集和检测。对体系的分离和富集条件进行了优化，最终计算得到的叁种药物的富集倍数在146-295之间。这种方法被应用于人血清中痕量土霉素和多西环素的测定中。3.本节实验以脂溶性维生素A、D3、K1为分析对象，对样品前处理-FASS在线富集技术进行了改进。实验采用十六烷基叁甲基溴化铵（CTAB）和十二烷基聚乙二醇醚（Brij-35）混合胶束为样品基质，在电泳前预先将样品溶解在胶束溶液基质中，进样前首先在毛细管中引入高导硼砂缓冲液和水塞，通过电迁移进样使样品随正电荷胶束大量迁移至毛细管中，随后以CTAB溶液为运行电解质的MEKC模式对样品进行分离和检测。在优化的实验条件下，得到的样品峰峰形良好，富集倍数在167-435之间。该方法简便、灵敏、可靠，极大地简化了样品的前处理过程，提高了分析的效率和检测的灵敏度，实现了对脂溶性药物的在线富集。
陈武娟[10]2017年在《毛细管电泳在线富集方法的研究与应用》文中研究表明毛细管电泳(Capillary Electrophoresis,CE),是在毛细管(分离通道)中,分析物在电场下中依据各个组成之间的淌度差异或分配行为完成分离检测。由于其具有效率高、成本低、小剂量等特点,因此,这些年在分析分离领域越来越受到科研工作者的重视与青睐,另外,不同检测器成功与毛细管电泳技术联用,给CE检测技术的应用范围带来更大的空间,经过科研工作者的不懈努力下,毛细管电泳相关技术已经在食品、药物、环境、生化等领域蓬勃发展和广泛应用。然而,由于进样量小和检测器等的限制,CE的检测灵敏度达不到生物体系中痕量组分检测的需求,为了解决这一问题,除了改进和完善各类检测器外,科研工作者们还致力于研究各种在线富集技术并与CE联用,期待能够进一步提高灵敏度,并且更好地完成对复杂样品的检测。本文将毛细管电泳分别与非接触式电导检测器(C4D)和激光诱导荧光检测器(LIF)联用,通过探索并建立不同的在线富集体系,进一步研究在线富集技术,并且应用于不同的实际样品中,主要内容如下:第一章为绪论,绪论包括CE的发展综述、分离模式和进样方法、检测技术、在线富集技术及应用,并介绍了本论文的研究目的和意义。第二章将场放大进样与毛细管电泳-非接触式电导检测联用(FESI-CE-C4D),实现了五种人工添加剂(亚硝酸盐、异抗坏血酸盐、山梨酸盐硝酸盐、硫酸盐)的在线富集和分离检测。在最佳条件下,五种物质的检测限为0.05-1mgL-1(S/N=3)。为了评估该模型的应用潜力,把该模型运用到火腿肠中人工添加剂的检测当中,样品处理操作简单,且回收率结果良好(91.9%-106.2%)。第叁章将毛细管电泳(CE)-激光诱导荧光(LIF)联用,结合动态pH界面和瞬时捕获两种在线富集技术,成功地实现了谷胱甘肽的有效富集和分离检测。实验对在线富集和分离检测的各种参数进行了探究,在动态pH界面下,分析物会被压缩成一个狭窄的区域,同时被SDS胶束在样品区带和胶束相边界捕获,最后被分离。最优条件下,还原型谷胱甘肽,甘氨酸,氧化型谷胱甘肽,半胱氨酸,谷氨酸的检测限分别为0.01,0.01,0.5,0.7和O.1nM(S/N=3)。对比经典的CZE模式,本实验采用瞬时捕获结合动态pH连接在线富集模型的富集倍数为87-430。此外,该方法已成功地应用于细菌(大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌和金黄色葡萄球菌)和HaCaT细胞中还原型谷胱甘肽的定量测定。第四章将毛细管电泳(CE)-激光诱导荧光(LIF)技术,联合胶束扫集-动态pH界面两种在线富集技术,对八种氨基酸进行了分离检测和在线富集。经过对分离和富集的各种参数的探究,最佳条件下,精氨酸,赖氨酸,色氨酸,组氨酸,缬氨酸,酪氨酸,丝氨酸,丙氨酸的检测限分别为0.07,0.35,0.15,0.20,0.20,0.15,0.33,0.10nM(S/N=3),富集倍数达到44-67之间。另外,将该方法应用于人体唾液中检测氨基酸,获得令人满意的回收率。
参考文献：
[1]. 在线及离线富集技术在痕量毒性成分分析中的研究与应用[D]. 张盼盼. 河北医科大学. 2013
[2]. 毛细管电泳富集新技术在农药残留及药物分析中的应用[D]. 尹晓芳. 河北农业大学. 2011
[3]. 在线富集技术在药物中的应用及假峰现象的研究[D]. 李保会. 河北大学. 2002
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[5]. 在线富集技术在体内药物分析中的研究与应用[D]. 江峥. 复旦大学. 2009
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[7]. 毛细管电泳富集技术在食品中几类药物残留分析中的应用[D]. 孙艳. 浙江工商大学. 2015
[8]. 在线富集技术在药物分析中的应用[D]. 闫宏远. 河北大学. 2004
[9]. 配位作用及样品前处理—场放大进样在毛细管电泳在线富集中的应用研究[D]. 李乐. 重庆大学. 2014
[10]. 毛细管电泳在线富集方法的研究与应用[D]. 陈武娟. 华东师范大学. 2017