基于DNA折纸的单个链霉亲和素分子的原子力显微术高分辨成像

基于DNA折纸的单个链霉亲和素分子的原子力显微术高分辨成像

论文摘要

链霉亲和素(Streptavidin,STV)和生物素(Biotin)之间的非共价相互作用很强,已被运用到包括分子生物学、免疫学以及生物技术领域。STV与Biotin间优异的结合能力与其结构密切相关,晶体解析结果证明STV是一个四聚体蛋白。原子力显微镜技术(Atomic Force Microscopy,AFM)可以在液体环境下获得生物单分子的形貌信息,对结构和功能的研究具有非常重要的作用。然而,由于STV分子小而柔软,获得高分辨的AFM图像极其困难。本研究利用DNA折纸可寻址的特点,将Biotin定位修饰在折纸上,选择性地将STV固定在折纸设定的位置上,实现了对单个STV分子的高分辨成像,观察到了单个STV呈"沙漏形"结构,与其晶体结构符合性较好。同时,我们注意到STV形貌易受成像力的影响,可能与STV分子的柔性相关。这种基于DNA折纸的高分辨成像方法,简单、方便,为研究生物分子形貌和功能提供了新思路。

论文目录

  • 1 实验部分
  •   1.1 仪器和试剂
  •   1.2 实验方法
  •     1.2.1 DNA折纸上Biotin位点的设计
  •     1.2.2 DNA折纸的自组装与纯化
  •     1.2.3 STV与Biotin反应
  •     1.2.4 AFM样品制备
  •     1.2.5 AFM成像和分析
  • 2 结果和讨论
  •   2.1 修饰Biotin的DNA折纸的AFM检测
  •   2.2 STV的AFM高分辨成像
  • 3 结语
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 孙彤,刘文静,张萍,李琳,李宾

    关键词: 原子力显微术,单分子,高分辨成像,链霉亲和素,折纸

    来源: 核技术 2019年04期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅱ辑,工程科技Ⅰ辑

    专业: 化学

    单位: 中国科学院上海应用物理研究所,中国科学院大学,宁波大学理学院

    基金: 国家自然科学基金(No.31670871,No.11674344,No.U1632125,No.21675167),国家重点研发项目(No.2016YFA0201200),中国科学院前沿科学重点研究项目(No.QYZDJ-SSW-SLH019,No.QYZDJ-SSW-SLH031)资助~~

    分类号: O629.73;O657

    页码: 65-71

    总页数: 7

    文件大小: 5837K

    下载量: 83

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