孟庆勇[1]2004年在《己酮可可碱对大鼠脊髓损伤的影响》文中研究指明脊髓损伤(spinal cord injury，SCI)是一种严重的神经损伤，可致终生残疾。目前其治疗手段仍十分有限，神经损伤恢复程度仍令人失望。近年研究显示SCI早期免疫炎性反应十分活跃，肿瘤坏死因子(TNF)-α在SCI早期过度表达，提示TNF-α参与了继发性脊髓损伤病理过程。抑制早期的炎性反应可能是治疗SCI的一条新途径。己酮可可碱(pentoxifylline，PTX)是一种非选择性磷酸二酯酶抑制剂，被广泛用于治疗血管性疾病。近年研究表明其具有抑制TNF-α合成，改善微循环等作用。目前，该药对SCI早期TNF-α的影响及神经保护作用尚未见报道。本实验采用WD法建立大鼠脊髓损伤模型，探讨PTX对SCI早期免疫炎性反应的影响及可能机制。 目的： 观察大鼠脊髓损伤后肿瘤坏死因子(TNF)-α及一氧化氮(NO)的变化，及己酮可可碱(PTX)对肿瘤坏死因子(TNF)-α及一氧化氮(NO)的抑制作用，探讨PTX治疗脊髓损伤的机制，为PTX临床治疗脊髓损伤提供依据。 方法： 本实验采用WD法建立大鼠脊髓损伤模型。实验选用体重220-280克成年健康雄性SD大鼠146只(河南省实验动物中心提供)。动物随机分为四组：假手术组(sham operated group，SO组)，17只：损伤组(injured group，IN组)，41郑州大学2004届硕士毕业论文(论文部分)己酮可可碱对大鼠脊髓损伤的影响只;损伤+己酮可可碱治疗组(injured and treated二ith pentoxifylline，PTX组)44只;损伤+甲强龙治疗组(injured and treated，ithmethylprednis01one，MP组)，44只。按z，8，24，4sh将损伤组，治疗组分为4个时间点，每个时间点取8只动物检测TNF一a，各组8h，24h取8只测NO，各组24h取8只测Ca2+，M广，HZO，48h行组织学检查者10只。给药方法和剂量:己酮可可碱组术后给予30 mg/kg体重腹腔注射，每日2次。甲强龙组术后立即给予30 mg/kg体重腹腔注射。指标检测.___ (1)伤段脊髓TNF一a含量测定采用放免法测定 (2)伤段脊髓N0含量测定采用硝酸还原酶法测定 (3)伤段育髓含水量，钙，镁测定采用原子吸收火焰光谱分析法测定，含水量采用干湿重法测定。 (4)病理学常规行HE染色，光镜下观察。 统计数据用，又土s表示，在统计软件SPSS10.O下进行处理，所有数据先行正态性和方查齐性检验，对多组均数的比较采用单因素方查分析，组间两两比较采用LSD检验。a二0.05为检验水准。结果: 1.伤段脊髓组织TNF一Q含量测定 工N组大鼠损伤后各时间点TNF一Q含量均显着高于S0组(P<0.05)，PTX组，MP组均显着低于IN组(P(0.05)，PTX组显着低于MP组(P(0.05)，说明PTX抑制TNF一Q作用优于MP。伤段脊髓组织N0含量测定 IN组与50组相比，8，24h伤段脊髓组织NO含量显着升高(P(0.05)，PTX组MP组均显着低于1N组(P<0.05)，PTX组与MP组相比无显着性差异(P>.05)，说明PTX可以抑制N0，其效果与MP相当。3.伤段脊髓组织内含水量，钙，镁含量测定 含水量:IN组与S0组相比，24h伤段脊髓组织内含水量显着升高(P<0.05)，PTX组MP组均显着低于IN组(P<0.05)，PTX组与MP组相比无显着性差异(P>.05)，说明PTX可以减轻水肿，其效果与MP相当。 钙含量测定:IN组与50组相比，24h伤段脊髓组织钙含量显着升高(P<0.05)，郑州大学20()4届硕士毕业论文(论文部分)己酮可可碱对大鼠脊髓损伤的影响尸TX组MP组均显着低于IN组(P(0.05)，明MP抑制钙内流作用优于PTX。 镁含量测定:IN组与S0组相比，MP组显着低于PTX组(P(0.05)，说24h伤段脊髓组织镁含量显着降低 (P(0.05)，PTX组MP组均显着高于IN组(P(0.05)，MP组显着高于PTX组 (P(0.05)，说明MP升高镁离子作用优于PTX。 4.病理学观察 肉眼见脊髓损伤段肿胀，脊膜下出血，与对照组正常脊髓切片相比，低倍 镜下见灰质及白质间的水肿及出血，出血成点状或片状，高倍镜下见大量红细 胞出现于脊髓损伤组织中，呈急性出血表现。治疗组水肿及出血明显减轻。 结论:1.动物模型的建立 WD法建立动物模型具有以下优点:(1)其病理变化的内容、顺序和时间 与腹侧致伤表现相似，与人类脊髓损伤的性质相似;(2)可以通过手术限度、 撞击力造成不同程度损伤的模型;(3)硬脊膜完整，可防止结缔组织.、组织间 液或其他外源性成分侵入脊髓损伤区。2.损伤后24小时内脊髓组织TNF一Q含量明显升高，表明TNF一a与脊髓损伤有关。3.脊髓损伤后24小时内脊髓组织N0含量明显升高，表明NO参与脊髓损伤病理 过程。4. PTX与MP明显抑制TNF一Q及NO的产生，表明PTX与MP对脊髓损伤有保护作 用。
张词侠[2]2008年在《复方己酮可可碱制剂对运动大鼠的血液流变性及抗氧化能力影响的研究》文中指出目的:研究表明,血液流变性改变和体内自由基的大量堆积,是导致运动性疲劳发生的重要原因之一。己酮可可碱(PTX)是一种从可可豆中提取的生物碱,其对生物体作用广泛,现已被广泛应用于医疗等领域,但在运动医学领域未见报道。本论文通过对大鼠血液流变性和抗氧化能力指标的测定和分析,探讨了复方PTX制剂的抗疲劳作用,以期为其运动补剂的研发及应用提供实验及理论依据。材料与方法:(1)建立运动训练模型:小动物跑台。选用32只健康雄性SD大鼠,分笼饲养6天,依体重层次随机分为A:安静对照组(8),B:运动对照组(8),C:服用复方牛磺酸制剂+运动训练组(8),D:服用复方已酮可可碱制剂+运动训练组(8)。实验时间为30天,从第二周开始C及D组灌服药剂溶液,B组灌服同剂量生理盐水,除A组外其余叁组进行叁周递增负荷的运动。(2)疲劳模型:力竭性游泳实验。3周运动服药后,对大鼠进行力竭性游泳实验,力竭运动后即刻处死,并抽取血样和组织样本,处理后保存用以指标测定。(3)组织学观察:大鼠主动脉内皮细胞株传代培养,经传4代后分(A)组:空白对照组;(B)组:自由基损伤组;(C)组:1μg/mLPTX给药组+氧自由基损伤剂;(D)组:10μg/mLPTX给药组+氧自由基损伤剂;(E)组:100μg/mLPTX给药组+氧自由基损伤剂,温育24h及48h后,即刻观察细胞形态学变化和分离上清液测定指标。结果表明:(1)复方己酮可可碱制剂对实验动物的体重未见有不良影响,运动能明显抑制大鼠体重的增加,服用药物对大鼠的生长发育及健康状况没有影响。(2)复方PTX制剂可以明显提高大鼠游泳运动至力竭的时间,可以降低力竭运动时全血粘度和血浆粘度增高的程度、增加红细胞的变形能力、改变血液流变性。(3)复方PTX制剂可以明显提高大鼠血清SOD活性,降低MDA含量,可明显提高大鼠心肌组织、脑组织SOD活性并降低MDA含量。(4)复方PTX制剂可以使自由基损伤组的内皮细胞组织形态学明显好转,并提高其内皮细胞的SOD活性,降低MDA含量的增加程度。结论:复方PTX制剂能够改变血液流变性,增加机体抗氧化系统的能力,减少自由基对机体的损伤,延缓运动性疲劳的发生及发展,提高大鼠的运动能力。同时PTX能明显改善自由基损伤组内皮细胞的形态学指标、增强其抗氧化能力、减轻自由基对细胞的损伤程度,对内皮细胞起保护作用。
刘健, 朱娟, 管忍, 朱四海, 李伟彦[3]2009年在《己酮可可碱能减轻神经病理性疼痛大鼠痛觉过敏的发展》文中认为目的:观察预防性腹腔给予己酮可可碱对大鼠腰5脊神经切断后机械痛觉过敏的作用,以及相应脊髓节段胶质细胞活化、炎症及细胞因子表达的影响。方法:雄性SD大鼠48只,随机均分为6组,每组8只。Ⅰ组为假手术组;Ⅱ组为等渗盐水对照组;Ⅲ组为12.5mg/kg己酮可可碱治疗组;Ⅳ组为25 mg/kg己酮可可碱治疗组;Ⅴ组为50mg/kg己酮可可碱治疗组;Ⅵ组为100mg/kg己酮可可碱治疗组。采用大鼠腰5脊神经切断神经病理性疼痛模型,术前1 h,Ⅰ和Ⅱ组腹腔注射等渗盐水,Ⅲ~Ⅵ组腹腔注射相应剂量的己酮可可碱。术后第1~6 d每天16时,各组大鼠腹腔注射相应剂量药物。计数手术前、术后第1、4、7 d各组大鼠2 g和12 g范氟雷丝刺激手术同侧后爪后跟撤腿次数。术后第7 d行为学检测完毕,处死大鼠,取腰5脊髓,测定肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素1β(IL-1β)以及白细胞介素6(IL-6)浓度,胶质细胞表面标记物Toll样受体-4(TLR-4)、白细胞分化抗原11b(CD11b),胶质纤维酸性蛋白(GFAP)mRNA的表达水平。结果:腰5神经切断后,与Ⅰ组相比各手术组对2 g和12 g刺激均有明显增多的撤腿反应,但与Ⅱ组相比,Ⅴ组和Ⅵ组对2 g和12 g刺激的撤腿次数明显减少,Ⅲ组和Ⅳ组则差异无统计学意义(P>0.05)。术后第7 d,与Ⅰ组相比各手术组腰5脊髓TNFα、IL-1β、IL-6及胶质细胞表面标记物TLR-4、CD11b、GFAP的mRNA表达水平明显增高(P<0.05)。但与Ⅱ组相比,Ⅴ组和Ⅵ组TNFα、IL-1β、IL-6及TLR-4、CD11b、GFAP的mRNA表达水平明显低(P<0.05),Ⅲ组和Ⅳ组差异则无统计学意义(P>0.05)。结论:己酮可可碱能够剂量依赖的缓解神经病理性疼痛大鼠痛觉过敏的发展,这与它能减轻脊髓胶质细胞活化、炎症因子表达的效应相关。
司海超[4]2010年在《己酮可可碱对大鼠神经病理性疼痛及海马TNF-α、IL-6的影响》文中研究指明目的:观察己酮可可碱对神经病理性疼痛大鼠机械和热痛域的影响,探讨己酮可可碱对大鼠海马中相关细胞因子表达的影响及其与神经病理性疼痛的关系。方法:成年雄性SD大鼠64只,随机分为四组:Ⅰ组,假手术+NS组;Ⅱ组,坐骨神经慢性压迫损伤(CCI)+NS组;Ⅲ组,CCI+50mg/kg己酮可可碱组;Ⅳ组,CCI+100mg/kg己酮可可碱组(n=16)。于术前一天开始至取材点每天腹腔内注射己酮可可碱或生理盐水。于术前1d,术后1d、3d、7d测定各组大鼠机械性缩足反射阈值(MWT)、热缩足反射潜伏期(TWL)。术后7d测定MWT和TWL后取大鼠右侧海马,分别用荧光定量PCR方法和免疫组化方法测定各组海马中TNF-α、IL-6mRNA的表达及TNF-α、IL-6免疫活性的表达(n=8)。结果:(1)Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组的MWT较术前一天均明显降低(P<0.05);与Ⅰ组相比,Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组术后1d,Ⅱ组和Ⅳ组术后3d,Ⅱ组和Ⅲ组术后7d的MWT明显降低(P<0.05);与Ⅱ组相比,Ⅲ、Ⅳ组术后1d和7d的MWT明显升高(P<0.05);与Ⅲ组相比,Ⅳ组术后第7d MWT明显升高(P<0.05)。Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组的TWL较术前一天均明显降低(P<0.05)。与Ⅰ组相比,Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组术后1d的TWL明显降低(P<0.05),Ⅱ、Ⅲ组术后3d、7d的TWL明显降低(P<0.05)。Ⅲ、Ⅳ组术后3d、7d的TWL比术后1d明显升高(P<0.05)。与Ⅱ组相比,Ⅲ、Ⅳ组术后3d、7d的TWL明显升高(P<0.05)(2)术后7d,Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组大鼠海马中TNF-α、IL-6 mRNA表达水平显着高于Ⅰ组(P<0.05);与Ⅱ组相比,Ⅲ,Ⅳ组大鼠海马中TNF-α、IL-6 mRNA表达水平显着降低(P<0.05);Ⅳ组大鼠海马中TNF-α、IL-6 mRNA表达水平较Ⅲ组低(P<0.05)。(3)术后7d,Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组大鼠右侧海马中TNF-α、IL-6免疫活性明显升高,表现为TNF-α、IL-6阳性细胞数和平均光密度值明显高于Ⅰ组(P<0.05);Ⅲ、Ⅳ组与Ⅱ组相比TNF-α、IL-6阳性细胞数和平均光密度值明显降低(P<0.05);Ⅳ组与的Ⅲ组相比TNF-α、IL-6阳性细胞数和平均光密度值明显降低(P<0.05)。结论:(1)大鼠腹腔内给予PTX可以明显的抑制大鼠的机械性痛觉过敏和热痛觉过敏。(2)大鼠腹腔内给予PTX可以明显抑制大鼠海马中TNF-α、IL-6mRNA的表达及TNF-α、IL-6免疫活性的表达,且具有剂量依赖性。
参考文献：
[1]. 己酮可可碱对大鼠脊髓损伤的影响[D]. 孟庆勇. 郑州大学. 2004
[2]. 复方己酮可可碱制剂对运动大鼠的血液流变性及抗氧化能力影响的研究[D]. 张词侠. 江西师范大学. 2008
[3]. 己酮可可碱能减轻神经病理性疼痛大鼠痛觉过敏的发展[J]. 刘健, 朱娟, 管忍, 朱四海, 李伟彦. 医学研究生学报. 2009
[4]. 己酮可可碱对大鼠神经病理性疼痛及海马TNF-α、IL-6的影响[D]. 司海超. 福建医科大学. 2010