酶联免疫法检测海洋贝类中的荧蒽

酶联免疫法检测海洋贝类中的荧蒽

论文摘要

分别以BSA和OVA为载体蛋白,利用活化酯法和混合酸酐法合成了荧蒽的免疫原和包被原,对新西兰大白兔进行免疫,制备出效价较高、特异性较好的荧蒽多克隆抗体。建立出一种检测贝类中荧蒽的间接竞争酶联免疫吸附方法(ic-ELISA),优化了包被原、一抗、二抗工作浓度,包被时间、抗原抗体反应时间及封闭液等实验检测条件。该方法特异性强,稳定性和灵敏度高,线性回归方程为y=19. 97x+15. 495 (R2=0. 99),线性范围为1~500 ng/mL,IC50为53 ng/mL,检出限为0. 94 ng/mL,回收率为81. 3%~102. 5%,RSD为2. 5%~8. 9%。将该法应用于实际贝类样品的检测,检测结果和HPLC相比,具有较好的相关性,该方法可用于实际样品中荧蒽的快速分析检测。

论文目录

  • 1 实验部分
  •   1.1 材料与试剂
  •   1.2 仪器与设备
  •   1.3 人工抗原的制备及鉴定
  •     1.3.1 人工抗原的制备
  •     1.3.2 人工抗原的鉴定、浓度和偶联比的计算
  •   1.4 多克隆抗体的制备
  •   1.5 间接竞争ELISA的建立
  •   1.6 ELISA工作条件的优化
  •   1.7 标准曲线的建立
  •   1.8 抗体特异性分析
  •   1.9 样品检测及回收率的测定
  • 2 结果与讨论
  •   2.1 人工抗原的表征
  •   2.2 多克隆抗体效价和浓度
  •   2.3 ic-ELISA工作条件的优化
  •   2.4 标准曲线的建立
  •   2.5 多克隆抗体的特异性
  •   2.6 样品检测结果
  •   2.7 回收率
  • 3 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 李冰莲,杨光昕,谷麟

    关键词: 荧蒽多克隆抗体,酶联免疫吸附法,贝类

    来源: 分析试验室 2019年02期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 化学,轻工业手工业

    单位: 上海理工大学环境与建筑学院,中国水产科学研究院东海水产研究所,农业部水产品质量安全控制重点实验室

    基金: 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金(中国水产科学研究院东海水产研究所)项目(1908-2017)资助

    分类号: O652;TS254.7

    DOI: 10.13595/j.cnki.issn1000-0720.2018.052502

    页码: 196-201

    总页数: 6

    文件大小: 141K

    下载量: 133

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