导读:本文包含了基因开关论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:血糖稳态,原儿茶酸,降血糖药物,基因表达,次级代谢物,Ⅱ型糖尿病,胰高血糖素,生物计算机,转录阻遏,定制化
基因开关论文文献综述
黄辛[1]（2019）在《“喝茶”可控制血糖稳态》一文中研究指出本报讯（黄辛）华东师范大学生命科学学院研究员叶海峰团队成功研发绿茶代谢物原儿茶酸（PCA）调控的基因表达控制系统，并将该系统应用于可控的表观遗传重塑、基因编辑、生物计算机及精准药物递送治疗糖尿病。10月24日，该成果以封面文章形式在线发表于《科学—转(本文来源于《中国科学报》期刊2019-10-24）
缪胜男,杨婷尧,崔文璟,周哲敏[2]（2019）在《茶碱激活型RNA分子开关的构建及在枯草芽胞杆菌中调节外源基因表达的性能》一文中研究指出枯草芽胞杆菌Bacillussubtilis在工业生物技术以及合成生物学领域作为一种重要的微生物可广泛用作代谢工程、重组蛋白表达以及新型基因电路的底盘。在B. subtilis中构建基于非编码RNA的高精准调节元件,能够实现不依赖蛋白质因子的基因表达调控,丰富B.subtilis基因表达通用工具。通过基因工程手段,设计了基于茶碱适体域的核糖开关E和适体核酶AZ调节元件,并与不同的B.subtilis内源组成型启动子适配,构建出茶碱激活型基因表达控制元件。测定这两种调节元件与6种组成型启动子组合匹配下报告基因GFP的荧光强度,鉴定并分析各调控元件的工作性能。并进一步以红色荧光蛋白mCherry和普鲁兰酶两种不同的异源蛋白验证核糖开关或适体核酶与启动子的最优组合。结果表明,同一种RNA调节元件与不同启动子组合呈现不同水平的调控效率。在核糖开关与启动子的组合中,启动子PsigW和核糖开关E组合(sigWE)对GFP表达的诱导率最高,达到16.8。在适体核酶与启动子的组合中,AZ与启动子P43、PrpoB组合(P43AZ和rpoBAZ)的诱导率最高,分别达到了6.1和6.2。进一步验证结果显示,sigWE调控mCherry的诱导率最高(9.2),而P43E调控普鲁兰酶的诱导率最高(32.8),产酶水平达到了81U/mL。核糖开关和适体核酶对GFP、mCherry、普鲁兰酶均能实现调控,但是不同元件组合的调控性能有所差异,对不同基因的调控效果也不尽相同。(本文来源于《生物工程学报》期刊2019年08期）
石兴露[3]（2019）在《基因开关系统在两系杂交稻上的效果验证和应用研究》一文中研究指出转基因粮食作物的食用安全性问题一直是公众争议的热点,也是转基因粮食作物迄今为止在全国乃至全球范围内尚未能得以商业化或广泛商业化种植的重要原因。2012-2016年期间,本课题组利用水稻绿色组织特异性表达启动子rbcS、位点特异性重组系统Cre/loxP、核定位信号krp2和终止子nosT等组件,致力开发了一种“基因开关”系统,使其控制的外源基因只在除种子外的绿色组织部位精确表达,为转基因作物食用安全性问题提供了全新和可行的解决途径。为了成功将“基因开关”系统由基础研究推向农业生产应用,本文以“基因开关”系统为核心,围绕胚乳零表达型两系抗虫及抗除草剂杂交水稻亲本种质创造及其组合选育工作展开研究,所获得的主要研究结果如下:一、“基因开关”系统在两系杂交水稻上的工作状况被证实是可行的:选用实验室已有的基因开关转化的两系亲本材料配制了 5个不同的抗虫杂交组合201S-K1/ZR6-LB2、201S-K4/ZR6-LB2、201S-K17/ZR6-LB2、201S-K17/551-LB6和604S-K5/ZR6-LB2,并分别于.水稻分蘖、抽穗和灌浆叁个时期检测其叶片、茎秆以及灌浆完熟期糙米和精米中Cry1Ab/1Ac蛋白的含量。结果显示,抗虫蛋白Cry1Ab/1Ac在所配5个杂交组合的叶片及茎秆中都能有效表达,其中,叶片中测得的含量落在270ng/g-1020ng/g之间,而茎秆中测得的含量分布于160ng/g-410ng/g之间,且所有杂交组合的糙米及精米中的Cry1Ab/1Ac蛋白含量均与野生型对照无显着差异。室内人工接虫及田间自然爆发抗性鉴定结果显示:各基因开关杂交组合的抗虫性良好,其室内叶片样本二化螟致死率为100%,极显着高于阴性对照的12.04%;田间卷叶螟危害率仅0.72%,极显着低于对照的62.81%;农艺性状考察结果显示:各性状指标与野生型对照相比均无不利改变。这些结果因此表明,“基因开关”系统在这些两系杂交组合中如所预期一样工作正常,同时该结果也证明应用基因开关系统培育胚乳零表达抗虫蛋白的抗虫两系杂交水稻完全可行。二、成功地应用“基因开关”系统创制了无标记的抗虫两系杂交水稻:分别以本实验室自育的优质不育系201S和恢复系551为受体,进行新一轮的遗传转化和种质创新,获得了一批新的201S-KEY(含Cre基因)和551-LB(含Cry1Ab/1Ac基因)独立转化体,并通过PCR阳性检测和Southern杂交拷贝数鉴定筛选出无标记的转化系201S-KEY9和KEY12和551-LB1、LB7、LB13和LB16,其中,551-LB7、LB16为单拷贝纯系,将它们相互配组共获得5个杂交组合:201S-K9/551-LB1、201S-K9/551-LB7、201S-K9/551-LB13、201S-K9/551-LB16、201S-K12/551-LB1。杂种F1代苗期叶片的ELISA分析结果显示:Cry1Ab/1Ac蛋白在所有这5个无标记的单拷贝杂交组合中均有效表达,而且有效范围的蛋白含量正处在130ng/g-630ng/g之间。叁、成功地应用“基因开关”系统创制了抗除草剂两系杂交水稻:以华中农业大学刘子铎教授提供的新型抗草铵膦除草剂基因RePAT为目的基因,以本课题组自育的优良恢复系112为受体进行农杆菌介导的遗传转化法,共获得数十份独立转化体,并通过PCR阳性检测和Southern杂交拷贝数分析,鉴定出一批无标记的单拷贝转化系。之后,选其部分转化系与前面获得部分的201S-KEY转化系配组,也配制出 5 个杂交组合:201S-K17/112-LR1、201S-K4/112-LR16、201S-K1/112-LR21、201S-K1/112-LR24、201S-K4/112-LR26。杂种F1 代qRT-PCR分析结果显示,在mRNA水平上,抗草铵膦基因RePAT在这5个杂交组合中均能正常表达;以在苗期及分蘖期叶片上涂抹草铵膦的方式进行的抗性鉴定结果显示,当草铵膦涂抹浓度在≤250mg/L时,转基因叶片完全不受影响,当草铵膦浓度达到350mg/L时,转基因叶片开始受轻微影响,达到500mg/L时才出现较严重的受害症状;而与之成鲜明对比的是,当草铵膦涂抹浓度在100mg/L时便开始对非转基因叶片产生影响,当达到150mg/L时便能使非转基因叶片呈现严重受害症状,以致变黄枯萎。这些结果说明基因开关控制的抗除草剂基因RePAT在两系杂交稻上也工作正常。(本文来源于《浙江大学》期刊2019-06-01）
刘霞[4]（2019）在《美日创建迄今最大DNA基因模型》一文中研究指出科技日报北京4月25日电 （刘霞）据物理学家组织网近日报道，美国和日本科学家携手，“征用”10亿个原子，创造了迄今最大的DNA基因模拟。最新研究将帮助科学家更好地了解癌症等疾病，开发相应的治疗方法。该研究负责人、美国洛斯阿拉莫斯国家实验室结(本文来源于《科技日报》期刊2019-04-26）
魏昭,刘青,邹民吉,李丽,陈瑶[5]（2018）在《不同核糖开关对下游靶基因调控效能的对比研究》一文中研究指出目的比对分属于激活和抑制型中的不同核糖开关的调控功效,为实现基因电路的精准调控奠定基础。方法构建不同核糖开关(add A与M6,TPP与btu B)调控的绿色荧光蛋白amcyan表达载体,通过荧光表达量、RTq PCR分析在不同配体物浓度调控下的amcyan表达,与未含核糖开关载体的表达量进行比较,进行动态调控效能分析。结果在add A与M6激活型核糖开关的调控下,随配体物浓度的增加,绿色荧光表达量增加,且相比M6核糖开关,add A核糖开关拥有更大的动态调控效能;相反,在TPP与btu B抑制型核糖开关的调控下,随配体物浓度的增加,绿色荧光表达量减少,但btu B核糖开关的动态调控效能略大于TPP核糖开关。结论相同作用机制的不同核糖开关调控功效存在差异,拥有动态调控效能优势的激活型开关add A与抑制型开关btu B更适合在大肠杆菌中用于代谢精确调控与靶基因精准表达。(本文来源于《军事医学》期刊2018年02期）
[6]（2017）在《T细胞带有抑制致癌基因“开关”》一文中研究指出《科技日报》电,许多电气设备中有保护开关,在设备过热之前会自动断开。德国慕尼黑工业大学一个研究小组最近发现,人体免疫细胞T细胞内也有类似开关,那些有基因缺陷的T细胞会被"紧急关闭",确保其不会疯狂生长成肿瘤细胞。这一成果发表在《自然》杂志上,有助于开发治疗淋巴瘤的新方法,或能治愈因免疫细胞缺损导致的T细胞非霍奇金淋巴瘤。正(本文来源于《广州医科大学学报》期刊2017年06期）
顾钢[7]（2017）在《T细胞带有抑制致癌基因“开关”》一文中研究指出科技日报柏林12月6日电 （顾钢）许多电气设备中有保护开关，在设备过热之前会自动断开。德国慕尼黑工业大学一个研究小组最近发现，人体免疫细胞T细胞内也有类似开关，那些有基因缺陷的T细胞会被“紧急关闭”，确保其不会疯狂生长成肿瘤细胞。这一成果发表在《自然(本文来源于《科技日报》期刊2017-12-08）
张媛媛[8]（2017）在《基于配体诱导的人工核酶开关对哺乳动物细胞基因表达调控的研究》一文中研究指出近些年合成生物学的研究建立了一系列的能够在细胞内调节基因表达的非编码RNA控制的体系,其中核糖开关,是一类广泛存在于各种生物体内并对小分子代谢物敏感的结构RNA。它们可以不依赖任何蛋白因子,直接结合小分子代谢物,形成选择性茎环结构或通过自我剪切功能,从转录或翻译水平来调控基因表达。据此,将体外筛选出的适体区序列和一些天然核酶的序列相融合构建人工核酶开关,可以利用配体和适体的结合导致的构象改变核酶自我剪切的活性,进而调控相关基因的表达,从而可被运用于包括哺乳动物细胞在内的各种生物机体中。近些年,核酶开关也被用于疾病治疗的研究中,但是将这种基于人工RNA的调节系统对于哺乳细胞内功能基因的作用在临床研究还面临诸多挑战。在肿瘤细胞基因治疗中,HSV-TK/GCV系统与RNA干扰是最为常用的治疗方法。本研究首先以肿瘤细胞为模型,构建了基于茶碱小分子激活的的锤头状核酶开关,建立了稳定转染该系统的HeLa细胞系,利用核酶开关与低毒性小分子配体的结合,调控核酶的剪切,实现对HSV-TK基因mRNA的顺式调节,建立了可逆的、长期的、稳定的低毒性基因调控系统。随后,我们构建了基于配体作用的HDV核酶开关调节系统,通过响应茶碱分子浓度变化调节剪切,精确释放靶基因的pri-miRNA,实现对肿瘤细胞抗凋亡基因Bcl-2的RNA干扰作用的实时有效调控,为今后RNA干扰在肿瘤细胞中的基因治疗更安全有效的运用提供理论基础与研究方法。此外,本研究通过核酶开关的构建,在真核动物细胞中建立了硫胺素焦磷酸(TPP)浓度响应的EGFP荧光传感器,可将其浓度的变化转化为报告基因表达的改变,发展出对哺乳活细胞内代谢物或因子的无标记、无损伤、可视、高效的检测方法。(本文来源于《中国科学技术大学》期刊2017-05-22）
龚咏晴[9]（2017）在《分子开关检测PTEN基因G389A、968delA突变与子宫内膜癌的相关性研究》一文中研究指出目的:探讨突变敏感性分子开关检测基因突变的技术平台在筛查临床上子宫内膜癌患者组织DNA中PTEN基因G389A、968delA两位点突变的应用,并分析两位点突变与子宫内膜癌发生、发展的相关性。方法:先提取96例正常人血液DNA为模板,设计2对有重迭互补区的引物对PTEN基因的exon 5和exon 8两片段分别进行扩增,再利用重迭PCR法对这两片段混合连接得到野生型PTEN基因融合片段,将此片段插入pMD19-T载体得到野生型pMD19-exon 5-exon 8融合重组载体;再以其为模板设计G389A和968delA两突变引物,依据重迭PCR定点突变原理,得到含突变型PTEN基因融合片段,与T载体相连接得到突变型重组质粒。两种质粒用菌液PCR或蓝白筛选进行阳性克隆筛选,DNA测序进行验证。以构建的重组质粒为模板分别设计检测G389A和968delA两位点的野生型特异性引物和突变型特异性引物,并在3’端进行硫化修饰,用高保真酶介导的分子开关技术检测两PTEN融合重组载体,并探索此技术检测的灵敏度和特异性。然后将成功建立的分子开关技术检测基因突变的平台应用于子宫内膜癌患者组织DNA中PTEN基因G389A和968delA两位点突变的筛查。最后统计分析PTEN基因两位点突变与国内子宫内膜癌之间是否有关。结果:运用菌液PCR和DNA测序验证了利用重迭PCR进行体外两片段延伸和定点突变成功建立的PTEN基因两位点的野生型及突变型质粒模板。成功利用分子开关技术对两质粒模板中PTEN基因的G389A、968delA两位点突变进行了检测,电泳结果显示,当(野生型/突变型)特异性检测引物与质粒模板完全匹配时,凝胶电泳会出现对应条带,即有PCR产物;反之,不完全匹配时,凝胶电泳则没有条带,即无PCR产物。并测得分子开关检测突变模板的灵敏度为10~(-3 )ng/μL。分子开关对62例子宫内膜癌组织DNA和21例正常子宫内膜组织DNA中的PTEN基因突变进行筛查发现,收集的EC样本中有1例PTEN基因的389位G>A的杂合突变,未检测到968delA的突变,并通过测序得到证实。EC组的GG基因型频率为0.984,GA(AA)基因型频率为0.016,高于正常对照组的GA(AA)基因型频率(P>0.05)。结论:成功建立分子开关技术检测PTEN基因G389A及968delA两位点突变的技术平台。成功将此技术运用到国内还未见报道的PTEN基因突变筛查中,并通过分析PTEN基因型频率发现,中国人群中子宫内膜癌的发病与PTEN基因G389A及968delA两位点突变可能无关,为国内临床上子宫内膜癌的诊断及治疗提供新的思路。(本文来源于《南华大学》期刊2017-05-01）
韩悌云,陈泉,刘海燕[10]（2017）在《基于T7 RNA聚合酶构建光诱导的基因开关》一文中研究指出本研究基于T7RNA聚合酶(T7RNAP)构建了一种可直接受外界信号控制的基因开关。构建这种基因开关采用的策略是:将T7RNAP在指定氨基酸位置拆分成两个片段,然后与可诱导结构域融合,促使T7RNAP拆分体系的重组装和活性恢复实现可诱导控制。本研究采用的可诱导结构域是VVD,该结构域是一种受光可激活结构域,利用VVD或其突变体(VVD_C71S或Magnets)与T7RNAP拆分体系的融合,使T7RNAP成为一类简单方便可靠的基因开关。该开关具有在黑暗条件下无活性,光照条件下恢复活性的特征。此外,T7RNAP拆分体系,研究发现该系统既可以采用光诱导的蛋白-蛋白相互作用方式恢复活性,也可以采用光诱导的别构效应恢复活性。而且,该拆分体系可实现模块化调控,即该拆分体系可与其它类型的化学可诱导结构域融合,以此实现化学因子诱导调控。总而言之,基于T7RNAP创建的光诱导控制的基因开关作为一类可靠适用的分子生物学工具,具有在不用环境条件下,不同时间和空间维度上实现对基因表达的精确调控,而且相较于先前报道的photo-cagedT7RNAP系统,该基因开关不涉及非天然氨基酸翻译系统,并采用可见光---蓝光作为诱导因子,可大幅降低对细胞的毒性。此外,本研究发现的T7RNAP高度可塑性和模块化等特征为其他相关同类型研究供了强大的参考价值。(本文来源于《中国生物工程学会第二届青年科技论坛暨首届青年工作委员会学术年会摘要集》期刊2017-04-08）
基因开关论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
枯草芽胞杆菌Bacillussubtilis在工业生物技术以及合成生物学领域作为一种重要的微生物可广泛用作代谢工程、重组蛋白表达以及新型基因电路的底盘。在B. subtilis中构建基于非编码RNA的高精准调节元件,能够实现不依赖蛋白质因子的基因表达调控,丰富B.subtilis基因表达通用工具。通过基因工程手段,设计了基于茶碱适体域的核糖开关E和适体核酶AZ调节元件,并与不同的B.subtilis内源组成型启动子适配,构建出茶碱激活型基因表达控制元件。测定这两种调节元件与6种组成型启动子组合匹配下报告基因GFP的荧光强度,鉴定并分析各调控元件的工作性能。并进一步以红色荧光蛋白mCherry和普鲁兰酶两种不同的异源蛋白验证核糖开关或适体核酶与启动子的最优组合。结果表明,同一种RNA调节元件与不同启动子组合呈现不同水平的调控效率。在核糖开关与启动子的组合中,启动子PsigW和核糖开关E组合(sigWE)对GFP表达的诱导率最高,达到16.8。在适体核酶与启动子的组合中,AZ与启动子P43、PrpoB组合(P43AZ和rpoBAZ)的诱导率最高,分别达到了6.1和6.2。进一步验证结果显示,sigWE调控mCherry的诱导率最高(9.2),而P43E调控普鲁兰酶的诱导率最高(32.8),产酶水平达到了81U/mL。核糖开关和适体核酶对GFP、mCherry、普鲁兰酶均能实现调控,但是不同元件组合的调控性能有所差异,对不同基因的调控效果也不尽相同。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
基因开关论文参考文献
[1].黄辛.“喝茶”可控制血糖稳态[N].中国科学报.2019
[2].缪胜男,杨婷尧,崔文璟,周哲敏.茶碱激活型RNA分子开关的构建及在枯草芽胞杆菌中调节外源基因表达的性能[J].生物工程学报.2019
[3].石兴露.基因开关系统在两系杂交稻上的效果验证和应用研究[D].浙江大学.2019
[4].刘霞.美日创建迄今最大DNA基因模型[N].科技日报.2019
[5].魏昭,刘青,邹民吉,李丽,陈瑶.不同核糖开关对下游靶基因调控效能的对比研究[J].军事医学.2018
[6]..T细胞带有抑制致癌基因“开关”[J].广州医科大学学报.2017
[7].顾钢.T细胞带有抑制致癌基因“开关”[N].科技日报.2017
[8].张媛媛.基于配体诱导的人工核酶开关对哺乳动物细胞基因表达调控的研究[D].中国科学技术大学.2017
[9].龚咏晴.分子开关检测PTEN基因G389A、968delA突变与子宫内膜癌的相关性研究[D].南华大学.2017
[10].韩悌云,陈泉,刘海燕.基于T7RNA聚合酶构建光诱导的基因开关[C].中国生物工程学会第二届青年科技论坛暨首届青年工作委员会学术年会摘要集.2017
标签：血糖稳态; 原儿茶酸; 降血糖药物; 基因表达; 次级代谢物; Ⅱ型糖尿病; 胰高血糖素; 生物计算机; 转录阻遏; 定制化;