肝细胞培养论文_顾融融,阿基业,殷晓芹

导读:本文包含了肝细胞培养论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:细胞,肝细胞,内酯,干细胞,糖醛酸,戊酸,吸虫。

肝细胞培养论文文献综述

顾融融,阿基业,殷晓芹[1](2019)在《白藜芦醇对高糖及低糖培养的人肝肿瘤细胞株和人肝细胞株代谢组学的影响》一文中研究指出目的考察高/低糖培养浓度下,白藜芦醇对人肝肿瘤细胞株HepG2和人肝细胞株L-O2细胞内生化代谢小分子的影响,寻找肿瘤细胞Ⅱ相代谢功能减弱的相关生化标记物。方法收集2种糖浓度培养条件下给以白藜芦醇后的HepG2和L-O2细胞,以GC-MS法检测2种细胞株细胞内外生化小分子等代谢组的变化。结果基础水平下,HepG2中内源性小分子的水平显着高于L-O2,包括乳酸、氨基酸、胆固醇和脂肪酸等。HepG2中变化最显着的是十二烷酸、十六碳烯酸、十七碳烯酸和油酸等中长链脂肪酸。L-O2中高糖培养环境下小分子改变更显着,尤其是氨基酸的水平更高,尿素、肌酸酐、嘌呤和嘧啶等核酸类物质以及泛酸和磷酸等小分子也增加。L-O2中叁羧酸循环的中间产物2-羟基戊二酸、苹果酸的含量上升,以及戊糖磷酸通路(PPP通路)中的果糖-6-磷酸、甘油酸水平的上升。结论低糖及高糖浓度培养条件会影响白藜芦醇在L-O2和HepG2细胞株中代谢组学。一方面,白藜芦醇抑制L-O2胞内PPP通路和糖原合成,促进叁羧酸循环和氨基酸的生成,这与白藜芦醇的抗癌机制有关;另一方面,肝肿瘤细胞内源性脂类的生化代谢过程增多与UGTs代谢外源药物功能的减弱有相关性。(本文来源于《中国临床药学杂志》期刊2019年06期)

蒋卉,胡志强[2](2019)在《人肝细胞培养液中卡维地洛对映体柱前衍生化RP-HPLC法测定》一文中研究指出本文建立柱前衍生化高效液相色谱法测定卡维地洛浓度。采用GITC为柱前衍生化试剂,反相高效液相色谱法检测卡维地洛衍生物浓度,选用Hypersil BDS C_(18)柱(4. 6 mm×150 mm,5μm),以乙腈-0.02 mol/L磷酸氢二钠(25∶75),以分析纯磷酸调pH值至4.3为流动相,流速:1.0 mL/min,进样量:5μL。荧光检测激发波长:285 nm,发射波长:340 nm。结果右旋体和左旋体的保留时间分别为3.63 min和4.77 min,分离度为3.1,标准曲线线性范围4.2~20 mg/L,人肝细胞培养液中最低检测限为0.066 mg/L。该法操作简单,可用于卡维地洛对映体的分离和含量测定。(本文来源于《山东化工》期刊2019年19期)

陈世钻,俞富祥,陈俊予,唐银河[3](2019)在《肝细胞、肝窦内皮细胞分离培养及肝细胞支架的制备》一文中研究指出目的:探究大鼠肝细胞、肝窦内皮细胞的分离培养方法及肝去细胞支架的制备方法。方法:用胶原酶IV消化肝脏组织后经洗涤、过滤、离心等步骤分离出大鼠肝细胞,然后置于培养基内进行纯化、培养后行细胞免疫组织化学检测;通过Percoll密度梯度离心法分离出肝窦内皮细胞置于培养基内纯化、培养后行免疫荧光检测;肝组织经循环灌注去细胞处理制备成大鼠肝细胞去细胞支架后经扫描电镜证实。结果:分离出的大鼠肝细胞在显微镜下呈光亮圆形,饱满,胞核清晰。肝细胞细胞角蛋白18免疫组织化学染色后见胞浆内存在棕黄色颗粒。肝窦内皮细胞呈梭形,细胞核位于中央。内皮素-1免疫荧光染色后细胞表面呈红色信号。制备成的大鼠肝脏去细胞支架在扫描电镜下显示细胞外基质保留,无细胞核及细胞质成分。结论:成功分离出了肝细胞和肝窦内皮细胞并成功制备了肝去细胞支架。(本文来源于《温州医科大学学报》期刊2019年09期)

潘小平,高宏,侯晓丽,江夏薇,叶卫江[4](2019)在《微囊化肝星状细胞共培养对肝细胞代谢功能的影响》一文中研究指出目的:微囊可以提供叁维支撑、基质相互作用和细胞外信号的结合,为体外肝细胞培养创造一个最佳的微环境。然而,微囊化肝细胞在生物人工肝中的转化和代谢功能尚不能满足临床试验的需要。本研究采用海藻酸钠-壳聚糖微球中共培养Huh7肝细胞与人肝星状细胞(hhscs),探讨微囊化肝星状细胞共培养对肝细胞代谢功能的促进作用。方法:采用微囊化叁维培养方法:,将Huh7肝细胞与hhscs肝星状细胞在不同的微球中共培养。测定单培养组、微囊化肝星状共培养组的Huh7肝细胞的肝脏特异性基因表达、白蛋白分泌、尿素合成及细胞色素P450活性。结果:与单培养组相比,微囊化肝星状细胞共培养体系中Huh7肝细胞的白蛋白、cyp3a5、cyp2e1和ugt2b7的转录水平明显升高,以及微囊化共培养组Huh7细胞的白蛋白分泌水平显着增高。与单独培养组相比较,微囊化共培养组的Huh7细胞的尿素合成和cyp1a2酶活性显着增强。结论:我们的研究结果:表明,在海藻酸钠-壳聚糖微球中进行肝星状细胞与肝细胞共培养,可显着提高肝细胞的代谢功能,获得功能更佳的肝细胞。将有助于生物型人工肝的临床前研究和药物筛选。(本文来源于《第二十八次全国中西医结合肝病学术会议暨2019年全国中西医结合肝病研究进展继续教育学习班论文汇编》期刊2019-09-20)

潘丽娟,王荣丽[5](2019)在《白细胞介素1β联合肝细胞生长因子体外培养骨髓间充质干细胞向肝细胞样细胞的分化》一文中研究指出背景:骨髓间充质干细胞具有多系分化潜能,能够分化为多种细胞谱系,目前认为骨髓间充质干细胞是治疗包括肝衰竭在内的各种终末期肝病最有前景的种子细胞。如何对其进行诱导分化是研究的焦点。目的:探讨肝细胞生长因子联合白细胞介素1β诱导骨髓间充质干细胞分化为肝细胞样细胞的能力,寻找适宜的诱导分化方法。方法:将第3代骨髓间充质干细胞分为5组,分别为空白对照组、肝细胞生长因子组、肝细胞生长因子+白细胞介素1β低、中、高质量浓度组,其中肝细胞生长因子质量浓度为20μg/L,白细胞介素1β质量浓度为5,10,20μg/L。在倒置显微镜下观察细胞形态学变化,采用免疫组化方法于诱导第7,14,21天检测细胞角蛋白18和白蛋白的表达。结果与结论:(1)空白对照组细胞无形态学改变,其他4组细胞形态由梭形、棱形逐渐向多角形、类圆形发展,与肝细胞相似;(2)空白对照组始终未见白蛋白和细胞角蛋白18表达,其他4组均有白蛋白、细胞角蛋白18阳性表达,随着诱导时间延长逐渐增加(P均<0.05);同一时间点随着白细胞介素1β质量浓度的增加白蛋白及细胞角蛋白18表达增加(P均<0.05);(3)白细胞介素1β联合肝细胞生长因子的诱导效果强于单一肝细胞生长因子。在0-20μg/L范围内,随着白细胞介素1β质量浓度增加,诱导能力加强。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2019年33期)

刘蕾,杨玉洁,王凌,蒋学华[6](2019)在《在“叁明治”培养大鼠原代肝细胞中研究利福平及联用丹参酮ⅡA对普伐他汀经BSEP转运的影响》一文中研究指出目的以普伐他汀为BSEP底物,在"叁明治"培养大鼠原代肝细胞模型上(sandwich-cultured rat hepatocytes,SCRH),研究利福平及联用丹参酮ⅡA对BSEP转运能力的影响。方法构建SCRH模型,利用MTT筛选给药剂量;建立普伐他汀的HPLC-MS/MS检测方法并进行方法学验证;考察利福平及联用丹参酮ⅡA对胆管内普伐他汀浓度的影响,并计算胆管外排指数(biliary excretion index,BEI)。结果成功构建了SCRH模型,并确定了利福平、丹参酮ⅡA、格列本脲及普伐他汀的合适给药剂量;建立了稳定可靠的普伐他汀HPLC-MS/MS检测方法;与空白组相比,利福平能够降低胆管内普伐他汀的浓度和普伐他汀的BEI,高浓度利福平的降低效果最明显(P <0. 01);与利福平高浓度组相比,联用丹参酮ⅡA后,胆管中普伐他汀的浓度以及普伐他汀的BEI增大,高浓度丹参酮ⅡA的增加效果最明显(P <0. 01)。结论在SCRH中,利福平能够抑制BSEP的转运能力,丹参酮ⅡA可以逆转利福平对BSEP转运能力的抑制作用。(本文来源于《中国药理学通报》期刊2019年07期)

周苗苗,张咪,周燕,肖艳[7](2019)在《贯通多孔聚酯基PolyHIPE支架在肝细胞培养中的应用》一文中研究指出以生物相容性好且可降解的端基双键化的聚(ε-己内酯)(PCL)或聚(4-甲基-ε-己内酯)(PMCL)为基体,通过乳化剂Hypermer T96制备高内相乳液(HIPE)。该乳液在紫外光引发下,通过后加入的季戊四醇四-3-巯基丙酸酯(PETMP)与碳碳双键化的PCL(PCL-AC)或者PMCL(PMCL-AC)发生巯基-烯点击反应而交联成聚高内相乳液(PolyHIPE),经冷冻干燥得到PolyHIPE叁维多孔支架。采用扫描电子显微镜、差示扫描量热仪、万能材料试验仪对支架的微观形貌、热力学以及力学性能进行了表征。通过体外细胞毒性实验以及肝细胞培养实验对支架的生物学性能进行了评估。力学性能测试结果表明:在乳液制备过程中,去离子水温度对支架的力学性能影响更为显着。体外细胞毒性以及肝细胞培养结果表明:支架无细胞毒性,且支架的刚性越小越有利于肝细胞的增殖和功能表达。(本文来源于《功能高分子学报》期刊2019年01期)

赵文苹,梅雪芳,施维,朱彬,侯林静[8](2018)在《大片形吸虫排泄分泌产物对体外培养LO2人肝细胞的影响》一文中研究指出目的初步探讨大片形吸虫排泄分泌产物(FgESP)对体外培养LO2人肝细胞的增殖及对肝细胞损伤相关的生化指标的影响。方法将LO2人肝细胞分为5个密度组(1 000、 3 000、 5 000、 7 000、 10 000个/孔),铺于96孔板中,空白对照组只加入培养基,根据LO2细胞生长曲线选择最适细胞铺板密度。在96孔板中,以最适细胞密度铺板,分为0.02、 0.10、 0.20、 0.40、 1.00 mg/ml FgESP等5组,每组设4个重复,以PBS作为阴性对照组,在培养箱中孵育4、 8、 12、 24、 48和72 h后进行MTT细胞活性检测,测吸光度(A_(490)值)。在24孔板中,分为0.02、 0.10、 0.20、 0.40、 1.00 mg/ml FgESP等5组,每组设3个重复,以PBS作为阴性对照组,分别在培养4、 8、 12、 24、 48和72 h后,收集LO2细胞上清,测定碱性磷酸酶(ALP)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、白蛋白(ALB)的含量。采用GraphPad Prism 6.0软件进行统计学分析。结果根据LO2人肝细胞生长曲线,筛选出5 000个/孔为96孔板最佳铺板密度。FgESP作用72 h后, MTT细胞活性检测结果显示, 0.02、 0.10、 0.20、 0.40、 1.00 mg/ml FgESP等5组的A_(490)值分别为1.29±0.01、 1.28±0.06、1.13±0.08、 0.97±0.06、 0.25±0.01,均低于对照组(1.45±0.05)(P <0.01)。生化指标检测结果显示, 0.40、1.00 mg/ml FgESP作用细胞LO2人肝72 h后, ALT含量分别为2.00±0.00、 3.67±0.58, AST含量分别为5.33±0.58、7.67±0.58,均高于对照组的(P <0.01);作用48 h后, 1.00 mg/ml FgESP组ALT、 AST含量分别为2.00±0.00、7.00±0.00,高于对照组的0.33±0.58、 3.67±0.58 (P <0.01);在12~72 h内, 0.10、 0.20、 0.40、 1.00 mg/ml FgESP作用后ALP含量升高(P <0.01),而0.02 mg/ml FgESP仅在作用72 h后ALP含量升高(P <0.01);各实验组ALB含量与阴性对照组差异无统计学意义(P> 0.05)。结论 FgESP体外作用可抑制LO2人肝细胞增殖能力,且细胞增殖的抑制及损伤程度与FgESP的浓度相关。(本文来源于《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》期刊2018年06期)

宰翔,于啸洋,于孔森,李明皓,张国庆[9](2018)在《NEFA BHBA对体外培养牛肝细胞的HP和SAA mRNA表达的影响》一文中研究指出为了验证奶牛酮病发病过程中机体会产生大量的NEFA(非酯化脂肪酸)、BHBA(β-羟丁酸)可能是脂类代谢关键的调节因素。本试验通过对培养的牛肝细胞添加NEFA和BHBA研究NEFA以及BHBA对牛肝细胞的结合珠蛋白(hap-toglobin,HP)和血清淀粉样蛋白A (serum amyloid A protein,SAA) mRNA表达的影响。根据荧光定量PCR法测定NEFA、BHBA对体外培养牛肝细胞的HP和SAA mRNA表达的影响,以及NEFA、BHBA等代谢产物对急性期反应蛋白HP、SAA表达影响的结果,得出结论,中等浓度的NEFA对于体外新生犊牛肝细胞中的HP、SAA基因的表达具有促进作用,高浓度的NEFA对HP、SAA基因的表达影响较小;中等浓度的BHBA体外新生犊牛肝细胞中的HP、SAA基因的表达具有一定的抑制作用,中高浓度抑制作用不明显,对于SAA基因,只有BHBA在1. 2 mmol/L浓度下抑制作用明显,高浓度的BHBA对HP、SAA基因的表达影响很小。(本文来源于《中国兽医杂志》期刊2018年10期)

李嘉晋,王荣丽,李婷婷,何东,石伟[10](2018)在《3D培养体系下人来源诱导性多能干细胞向肝细胞的转化》一文中研究指出背景:生物型人工肝的构建有望成为治疗急性肝衰竭的有效方法,但构建人工肝的种子细胞来源、培养模式、营养获取等方面仍存在较多难题,制约血液净化-人工肝的发展与临床应用。目的:探讨在不添加外源血清等异种来源物质的条件下将人诱导性多能干细胞诱导分化为肝细胞样细胞的可行性。方法:应用含Transwell小室的6孔板构建3D培养体系,外源添加丙戊酸和尼克酰胺对人诱导性多能干细胞进行诱导分化,并将分化的肝细胞样细胞与生物补片共培养。实验分为5组:人诱导性多能干细胞为A组、正常肝细胞为B组、不添加尼克酰胺诱导分化的肝细胞样细胞为C组、添加尼克酰胺诱导分化的肝细胞样细胞为D组、在生物外科补片上培养的肝细胞样细胞为E组。倒置相差显微镜下观察D组肝细胞样细胞的形态;免疫荧光检测D组细胞中肝细胞核因子4α和甲胎蛋白的表达;荧光实时定量PCR和Western blot检测A、B、C、D组细胞中甲胎蛋白与白蛋白的mRNA和蛋白表达;流式细胞术检测A、C、D组细胞的分化效率;免疫细胞化学检测B组和E组细胞中胆盐输出泵蛋白的表达;ELISA检测D组和E组上清液中乳酸脱氢酶活性、白蛋白和尿素氮含量。结果与结论:(1)D组细胞由梭形逐渐转变成多边形;(2)D组细胞中肝细胞核因子4α和甲胎蛋白呈阳性表达;(3)D组细胞中甲胎蛋白、白蛋白的基因和蛋白表达明显高于A组和C组(P<0.01);(4)B组和E组细胞中胆盐输出泵蛋白呈明显阳性表达;(5)E组细胞乳酸脱氢酶活性、白蛋白和尿素氮的含量明显高于D组(P<0.01);(6)结果表明,外源添加小分子化合物的叁维培养体系和生物外科补片联合应用有助于促进诱导性多能干细胞在体外诱导分化为功能性肝细胞样细胞。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2018年29期)

肝细胞培养论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

本文建立柱前衍生化高效液相色谱法测定卡维地洛浓度。采用GITC为柱前衍生化试剂,反相高效液相色谱法检测卡维地洛衍生物浓度,选用Hypersil BDS C_(18)柱(4. 6 mm×150 mm,5μm),以乙腈-0.02 mol/L磷酸氢二钠(25∶75),以分析纯磷酸调pH值至4.3为流动相,流速:1.0 mL/min,进样量:5μL。荧光检测激发波长:285 nm,发射波长:340 nm。结果右旋体和左旋体的保留时间分别为3.63 min和4.77 min,分离度为3.1,标准曲线线性范围4.2~20 mg/L,人肝细胞培养液中最低检测限为0.066 mg/L。该法操作简单,可用于卡维地洛对映体的分离和含量测定。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

肝细胞培养论文参考文献

[1].顾融融,阿基业,殷晓芹.白藜芦醇对高糖及低糖培养的人肝肿瘤细胞株和人肝细胞株代谢组学的影响[J].中国临床药学杂志.2019

[2].蒋卉,胡志强.人肝细胞培养液中卡维地洛对映体柱前衍生化RP-HPLC法测定[J].山东化工.2019

[3].陈世钻,俞富祥,陈俊予,唐银河.肝细胞、肝窦内皮细胞分离培养及肝细胞支架的制备[J].温州医科大学学报.2019

[4].潘小平,高宏,侯晓丽,江夏薇,叶卫江.微囊化肝星状细胞共培养对肝细胞代谢功能的影响[C].第二十八次全国中西医结合肝病学术会议暨2019年全国中西医结合肝病研究进展继续教育学习班论文汇编.2019

[5].潘丽娟,王荣丽.白细胞介素1β联合肝细胞生长因子体外培养骨髓间充质干细胞向肝细胞样细胞的分化[J].中国组织工程研究.2019

[6].刘蕾,杨玉洁,王凌,蒋学华.在“叁明治”培养大鼠原代肝细胞中研究利福平及联用丹参酮ⅡA对普伐他汀经BSEP转运的影响[J].中国药理学通报.2019

[7].周苗苗,张咪,周燕,肖艳.贯通多孔聚酯基PolyHIPE支架在肝细胞培养中的应用[J].功能高分子学报.2019

[8].赵文苹,梅雪芳,施维,朱彬,侯林静.大片形吸虫排泄分泌产物对体外培养LO2人肝细胞的影响[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志.2018

[9].宰翔,于啸洋,于孔森,李明皓,张国庆.NEFABHBA对体外培养牛肝细胞的HP和SAAmRNA表达的影响[J].中国兽医杂志.2018

[10].李嘉晋,王荣丽,李婷婷,何东,石伟.3D培养体系下人来源诱导性多能干细胞向肝细胞的转化[J].中国组织工程研究.2018

论文知识图

奶牛脂肪组织总RNA电泳Fig.5.2Theele...奶牛肝细胞分离培养Fig.5.3livercell...文蛤肝胰脏细胞原代培养情况测序结果质粒pShuttle-IRES-hrGFP-1结构示意图作用于四株细胞后的激光共...

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