KIFC1在精子顶体形成过程中的时空表达特征及其功能研究

KIFC1在精子顶体形成过程中的时空表达特征及其功能研究

论文摘要

目的:探讨C末端驱动蛋白1(KIFC1)在精子顶体形成过程中的时空表达特征及其功能。方法:利用流式分选及免疫荧光技术,分析KIFC1在精子顶体形成过程中的表达和定位。运用体外GC2-spd细胞系筛选出具有高干扰效率的KIFC1的小干扰RNA(RNAi1),将混有0.5%台盼蓝的KIFC1 RNAi1,显微注射至3周龄Balb/c小鼠的睾丸生精小管内,同一只对侧睾丸注射阴性Con-RNAi;在注射后3周后,取附睾尾部精子进行形态学分析。结果:精子变形早期,KIFC1蛋白主要表达于精子细胞的细胞质中;变形中期,KIFC1蛋白表达于顶体泡及顶体;变形晚期,KIFC1蛋白主要表达于残余体内;成熟期,KIFC1蛋白在精子表达消失。RNAi1组的精子头部畸形率明显高于对照[(32.12±0.25)%vs(7.06±1.25)%,P<0.01]。结论:KIFC1在精子顶体形成过程中可能发挥重要作用,主要影响精子顶体的形成。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 人睾丸组织样本
  •     1.1.2 细胞系及实验动物
  •     1.1.3 试剂与仪器
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 流式细胞仪分选人精原细胞、精母细胞及单倍体精子细胞
  •     1.2.2 免疫荧光染色
  •     1.2.3 脂质体介导包被的RNAi-KIFC 1 瞬时转染 GC-2 spd 细胞
  •     1.2.4 Balb/c小鼠睾丸网显微注射及小鼠精子畸形率的检测
  •     1.2.5 Balb/c小鼠附睾精子透射电镜制样与观察
  •   1.3 统计学分析
  • 2 结果
  •   2.1 流式细胞仪分选人精原细胞、精母细胞及单倍体精子细胞
  •   2.2 KIFC1在人睾丸中的表达和定位
  •   2.3 KIFC1在人精子顶体形成过程中的时空表达
  •   2.4 Balb/c小鼠睾丸生精小管微注射Kifc1 RNAi1
  •   2.5 KIFC1在小鼠精子变形中的功能
  •   2.6 小鼠附睾精子透射电镜结果
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 智二磊,李朋,姚晨成,汪小波,洪燕,李铮

    关键词: 末端驱动蛋白,顶体形成,小干扰,睾丸显微注射

    来源: 中华男科学杂志 2019年12期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 基础医学

    单位: 上海交通大学附属第一人民医院男科

    基金: 国家自然科学基金(81701524)~~

    分类号: R321.1

    DOI: 10.13263/j.cnki.nja.2019.12.001

    页码: 1059-1065

    总页数: 7

    文件大小: 2154K

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