重组酿酒酵母发酵生产瓦伦西亚烯及其衍生物

重组酿酒酵母发酵生产瓦伦西亚烯及其衍生物

论文摘要

以酿酒酵母为宿主菌株,重构其体内代谢途径,生物合成瓦伦西亚烯及其衍生物。该研究在酿酒酵母菌株中引入来源于纯天仙子的细胞色素P450单加氧酶(cytochrome P450 monooxygenase,HPO)、来源于黄扁柏的瓦伦西亚烯氧化酶(valencene oxidase,Cn VO),并构建了它们对应的4个突变体HPOM、Cn VO-3、Cn VO-4、Cn VO-34,与来源于拟南芥的细胞色素还原酶(cytochrome P450 reductase,At CPR)组合表达,通过静息细胞试验,筛选得到表达HPO和HPOM的菌株催化瓦伦西亚烯的效果最优,选取HPOM作为后续试验的基础。进一步引入来自黄扁柏的瓦伦西亚烯合成酶(valencene synthase,Cn VS),过表达醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase,ADH1),截短的3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(truncated 3-hydroxy-3-methylglutaryl-coenzyme A reductase,t HMG1)。最终获得1株原位生产瓦伦西亚烯及其衍生物的重组酵母菌株PK2-24,进行3 L发酵罐的发酵试验,158 h后总萜产量达310. 94 mg/L,较原始菌株提高了111倍。该研究为利用酵母规模化生产瓦伦西亚烯及其衍生物奠定了重要基础。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与试剂
  •     1.1.1 质粒和菌种
  •     1.1.2 主要试剂
  •     1.1.3 培养基
  •     1.1.4 仪器与设备
  •   1.2 试验方法
  •     1.2.1 目的基因扩增
  •     1.2.2 表达载体的构建
  •     1.2.3 培养方法
  •     1.2.4 GC-FID及GC-MS检测分析产物
  • 2 结果与分析
  •   2.1 酿酒酵母重组载体的构建
  •     2.1.1 单基因表达载体的构建
  •     2.1.2 多基因串联表达载体的构建
  •   2.2 CYP450的筛选
  •   2.3 重组酵母菌株产物产量分析
  •   2.4 重组酵母菌株3L发酵罐发酵生产瓦伦西亚烯及其衍生物
  • 3 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 欧阳小丹,李文,察亚平,朱晁谊,李爽

    关键词: 酿酒酵母,瓦伦西亚烯,倍半萜,代谢工程

    来源: 食品与发酵工业 2019年20期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

    专业: 生物学,化学,一般化学工业

    单位: 华南理工大学生物科学与工程学院

    基金: 国家自然科学基金项目(21878104),广东省科技计划项目(2017A010105019)

    分类号: TQ920.1;O629.61

    DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.021558

    页码: 7-15

    总页数: 9

    文件大小: 1341K

    下载量: 143

    相关论文文献

    • [1].独特的牙科之旅 瓦伦西亚某牙科诊所[J]. 室内设计与装修 2020(03)
    • [2].日光下的明珠 瓦伦西亚会议业速览[J]. 中国会展(中国会议) 2018(08)
    • [3].食用蜂蜜并非绝对安全[J]. 家庭中医药 2017(04)
    • [4].会议信息[J]. 城市规划学刊 2019(06)
    • [5].瓦伦西亚的“中国味儿”[J]. 小康 2018(09)
    • [6].笔墨染不尽你[J]. 风景名胜 2020(04)
    • [7].瓦伦西亚制造[J]. 网球俱乐部 2012(02)
    • [8].瓦伦西亚,地中海厨房[J]. 商务旅行 2010(11)
    • [9].烟花三月瓦伦西亚[J]. 音乐爱好者 2008(01)
    • [10].停泊瓦伦西亚[J]. 流行色 2009(12)
    • [11].2008赛季收官之战 Moto GP 2008赛季第18站 西班牙瓦伦西亚赛道[J]. 摩托车 2009(02)
    • [12].产瓦伦西亚烯酿酒酵母的表达载体适配及发酵碳氮源优化[J]. 生物技术通报 2020(01)
    • [13].瓦伦西亚 橘香浸润的艺术之城[J]. 风景名胜 2009(06)
    • [14].F1欧洲站 街道赛有乐趣?[J]. 汽车与运动 2008(10)
    • [15].西班牙研发新款内燃机,可有效降低排放[J]. 汽车与新动力 2020(05)
    • [16].西班牙瓦伦西亚的乡村旅游开发[J]. 中国乡镇企业 2012(07)
    • [17].瓦伦西亚Nozomi寿司吧[J]. 现代装饰 2015(09)
    • [18].生物酶法催化瓦伦西亚烯生成圆柚酮[J]. 生物技术通报 2012(08)
    • [19].“在瓦伦西亚55天”中国当代艺术展[J]. 艺术与投资 2008(07)
    • [20].和风无限 西班牙瓦伦西亚Nozomi寿司店[J]. 室内设计与装修 2015(04)
    • [21].西班牙处罚“手机噪音”[J]. 共产党员 2019(07)
    • [22].地中海海运市场喜迎“晴雨表” 瓦伦西亚港首发集装箱运价指数[J]. 中国远洋海运 2018(08)
    • [23].MotoGP出国观战指南 瓦伦西亚篇[J]. 摩托车 2016(02)
    • [24].Spain's National Dish,Paella[J]. 第二课堂(A) 2016(07)
    • [25].家,J次方[J]. 缤纷 2011(08)
    • [26].复辟之路[J]. 当代体育 2008(43)
    • [27].晶科能源品牌推广战略及新品发布[J]. 太阳能 2012(10)
    • [28].现代与古典“绿色”的完美融合——访西班牙驻华大使瓦伦西亚先生[J]. 中华建设 2013(10)
    • [29].新格局,新面貌 2016赛季MotoGP简评[J]. 摩托车 2016(12)
    • [30].2009瓦伦西亚时装周[J]. 流行色 2009(03)

    标签:;  ;  ;  ;  

    重组酿酒酵母发酵生产瓦伦西亚烯及其衍生物
    下载Doc文档

    猜你喜欢