导读:本文包含了时空表达模式论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:基因,时空,家蝇,蛋白,花青素,卵泡,罗非鱼。
时空表达模式论文文献综述
张丹,胡晓莹,张莉,马海龙,王超[1]（2019）在《沙蒿AQP基因结构预测及干旱胁迫下的时空表达模式研究》一文中研究指出为探究水通道蛋白(AQP)在沙蒿响应干旱胁迫中的作用机制,该研究以青海省柴达木盆地沙蒿为试验材料,采用RACE技术对其AQP基因进行扩增,获得沙蒿AQP全长克隆并对AQP蛋白进行结构预测和分析;采用qRT-PCR对沙蒿AQP基因在不同程度干旱胁迫以及不同组织部位的表达模式进行分析。结果表明:(1)成功克隆获得沙蒿AQP基因长746 bp的片段1和长534 bp的片段2,经拼接后得到全长cDNA序列,沙蒿AQP基因总长为864 bp。(2)亚细胞定位表明沙蒿AQP基因定位于细胞膜上;同源比对显示沙蒿与向日葵、莴苣、橡胶树等植物的AQP基因具有较高的相似性;结构预测表明AQP蛋白含6个跨膜螺旋结构且亲水性较弱,α螺旋和无规则卷曲为AQP蛋白二级结构的主要构成元件。(3)qRT-PCR分析表明,沙蒿AQP基因随着干旱胁迫的加重呈现有规律的变化,根、茎、叶中表达均上调,且叶中AQP基因表达量上调幅度最大。研究表明沙蒿AQP基因结构特征及其表达模式都是沙蒿对干旱胁迫的一种适应。(本文来源于《西北植物学报》期刊2019年09期）
常振策[2]（2019）在《家蝇Clip-Msp和Mdctl基因克隆表达及白假丝酵母菌刺激下Clip-Msp时空表达模式的研究》一文中研究指出目的:克隆表达家蝇的Clip-丝氨酸蛋白酶基因(Clip-serine protease gene of Musca domestica,Clip-Msp)和C型凝集素基因(C-type lectin gene of Musca domestica,Mdctl),并对Clip-Msp在白假丝酵母菌感染后的时空表达模式进行研究。方法:从课题组前期构建的微生物感染后免疫相关基因文库中筛选得到高表达基因Clip-Msp(GeneID:LOC101901626)和Mdctl(GeneID:LOC101890789),然后依据NCBI网站上的预测序列设计引物,以家蝇叁龄幼虫cDNA为模板,PCR扩增目的片段。使用生物信息学软件对它们的序列及编码蛋白作分析和预测。通过基因工程的方法,构建pET-28a/Clip-Msp和pET-28a/Mdctl重组质粒,随后导入到大肠杆菌BL21-DE3中诱导表达。表达产物和Ni-IDA Agarose纯化蛋白用SDS-PAGE和Western-Blot分析鉴定。以GAPDH作为内参,运用实时荧光定量PCR方法检测Clip-Msp在家蝇叁龄幼虫感染白假丝酵母菌后3h、12h、24h以及48h不同组织(体壁、脂肪体、血淋巴、唾液腺、肠道、马氏管和气管)中的表达情况。结果:家蝇Clip-Msp基因开放阅读框(ORF)长度为1524 bp,编码蛋白长度507个氨基酸,其理论分子量约为56320.1 Da,等电点约为8.52。蛋白质在溶液中性质不稳定;总体疏水性较高,无信号肽,属于非经典分泌型蛋白。Clip-Msp蛋白的N端存在一个Clip结构域,C端有一个Tryp_SPc催化结构域,属于单催化结构域Clip-丝氨酸蛋白酶超家族。Mdctl基因ORF长度为333 bp,其蛋白包含110个氨基酸残基,分子量为13131.42 Da,等电点为4.49,信号肽范围为1-22位氨基酸,是分泌型蛋白。Mdctl蛋白中存在Clect结构域,属于C型凝集素超家族。成功构建pET-28a/Clip-Msp和pET-28a/Mdctl表达质粒,经IPTG诱导后两种重组蛋白均在大肠杆菌中主要以包涵体的形式表达,其分子量与理论值相一致。实时荧光定量PCR结果显示:白假丝酵母菌感染家蝇叁龄幼虫后,Clip-Msp基因在所有检测组织中表达均上调,不同时间点、不同组织中表达有极显着差异(P<0.05)。3h时以血淋巴中表达量增加最高;12h时以脂肪体、气管、唾液腺和肠道中表达量增加为主,其中脂肪体内的相对表达量最高;24h时主要在肠道中表达增加最明显,脂肪体次之;48h时血淋巴中表达量高于其它所有组织。结果分析得出:Clip-Msp基因主要分布在血淋巴、脂肪体和肠道中。结论:家蝇Clip-Msp由507个氨基酸组成,无信号肽,为Clip-SP家族新成员。家蝇叁龄幼虫在白假丝酵母菌感染后,虫体组织中Clip-Msp基因的表达随时间的推移呈现先升高后降低的趋势,其中以血淋巴、脂肪体和肠道的表达量增加最为明显。Mdctl基因编码家蝇新凝集素,属于C型凝集素超家族。本研究成功建立pET-28a/Clip-Msp和pET-28a/Mdctl原核表达体系,获得了它们的重组蛋白。结果提示Clip-Msp和Mdctl可能参与了家蝇真菌感染的免疫反应,也为进一步对家蝇Clip-Msp和Mdctl的研究提供了基础。(本文来源于《贵州医科大学》期刊2019-05-29）
王瑶瑶[3]（2019）在《高温处理的尼罗罗非鱼性腺分化过程及性别决定相关基因时空表达模式研究》一文中研究指出鱼类属于低等脊椎动物,其性别决定机制包括基因型性别决定(GSD)、环境依赖型性别决定(ESD)和基因-环境依赖型性别决定(GSD+ESD)。环境因素包括温度、光照、p H值、含氧量、种群密度、外源性类固醇类激素等,研究发现,温度是鱼类性别决定中影响作用较大且最关键的一类环境因素,被称为温度依赖型性别决定(TSD)。有些鱼类的性别决定受遗传和温度的双重控制,且具有性染色体,被称为遗传性别决定和温度依赖型性别决定的混合型(GSD+TSD),如尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)就是一种GSD+TSD鱼类。尼罗罗非鱼雄鱼生长速度比雌鱼快30%多,发展高雄或全雄尼罗罗非鱼的养殖可有效提高经济效益。在尼罗罗非鱼性别分化关键期进行高温处理,可使雄鱼比例显着提高,即一部分遗传型雌鱼性逆转为生理型雄鱼。本研究以尼罗罗非鱼为研究对象,以正常养殖温度(28℃)和高温处理温度(36℃)进行养殖,通过分析各组生殖细胞类型和出现时序的差异、性别分化相关基因表达水平以及表达位置的差异,揭示高温处理的雌鱼与正常雌、雄鱼性腺发育过程的异同点。研究结果如下:1、本研究通过HE染色和Vasa免疫组化对性腺组织进行分析,发现在21dpf,高温处理组与对照雌鱼组性腺发育形态相似,结果表明此时的性腺为卵巢样;在39dpf,观察到对照雌鱼组已经明显分化出卵原细胞,在对照雄鱼组性腺的外周分化出精原细胞,排列规则,而高温处理组的性腺未明显分化,且性腺中央出现了一个大大的空洞,但性腺细胞分化的趋势趋于对照雄鱼组,结果表明此时的性腺为精巢样的;99dpf,高温处理组与对照雄鱼组发育状况一致,分化出了精原细胞、初级精母细胞和少量精子,结果表明性腺已经转化为完全的精巢,但在高温处理组性腺周边区域出现大量的蜂巢状结构,可能影响性腺的功能。这些结果表明,高温处理推迟了性腺内生殖细胞的分化,并且影响性腺结构发育的完整性,但最终性腺发育形成的生殖细胞类型与对照雄鱼组一致。2、本试验研究通过免疫组化技术,检测了叁组鱼性腺Cyp19a1a蛋白在不同发育阶段的表达水平和表达位置的差异。在21dpf,高温处理组性腺内Cyp19a1a的表达量和表达位置与对照雌鱼组相似,都定位在性腺的间质细胞,对照雄鱼组未表达;在39dpf,Cyp19a1a仅在对照雌鱼组中检测到,高温处理组和对照雄鱼组都未检测到,可定性的推测高温处理会导致Cyp19a1a蛋白表达显着下调,与对照雄鱼组趋于一致。在99dpf,叁组鱼的性腺已经明显分化,性腺细胞类型能够明显的区分开,Cyp19a1a在对照雌鱼组性腺中的颗粒细胞和间质细胞中表达,高温处理组和对照雄鱼组结果一致,未表达Cyp19a1a。3、通过免疫组化技术检测叁组尼罗罗非鱼的雄性性别分化相关基因Dmrt1和Gsdf蛋白在不同阶段的表达情况。在21dpf,高温处理组、对照雌鱼组、对照雄鱼组Dmrt1和Gsdf蛋白表达没有明显的差异;在39dpf,对照雌鱼组几乎观察不到Dmrt1和Gsdf的表达,高温处理组和对照雄鱼组都高表达Dmrt1和Gsdf,表明高温处理组趋向于发育成雄性,结合此时期的Vasa免疫组化结果表明高温处理后发生性逆转的尼罗罗非鱼性别决定基因的表达差异要早于性腺细胞的分化。在性腺发育到99dpf,能清楚的观察到高温处理组和对照雄鱼组的性腺细胞类型一致,明显的区分出精原细胞、精母细胞和精子,Dmrt1蛋白表达都定位在性腺的精原细胞和精母细胞,Gsdf蛋白表达定位主要在支持细胞中,结果进一步证明高温处理组的性腺已经转化为完全的精巢。综上所述,在高温处理下,尼罗罗非鱼雌鱼经历了由雌到雄的性逆转,在这一过程中,一是性别分化相关基因表达模式发生变化,由与对照雌鱼表达模式相似,逐渐转变为与对照雄鱼相似;二是性腺中的细胞类型发生变化,也是由与对照雌鱼基本一致,逐渐转变为与对照雄鱼一致。但性腺中的细胞类型具体的转变过程还需要进一步研究。(本文来源于《山东农业大学》期刊2019-03-27）
陈晓霞[4]（2019）在《CDKN1A、CDKN1B基因在蛋鸡等级前卵泡组织中的时空表达模式研究》一文中研究指出为了探讨CDKN1A、CDKN1B在蛋鸡卵泡中的表达规律和模式,采用半定量RT-PCR和免疫组织化学的方法分别检测CDKN1A、CDKN1B mRNA及其蛋白在蛋鸡卵泡中的表达模式分析。结果表明:CDKN1A、CDKN1B基因在等级前卵泡中mRNA整体表达水平显着高于等级卵泡表达水平。CDKN1A、CDKN1B蛋白主要在等级前卵泡的颗粒细胞和卵母细胞中表达。研究结果揭示了CDKN1A和CDKN1B基因有可能参与蛋鸡卵泡的发育调控过程。(本文来源于《中国家禽》期刊2019年04期）
苗红霞,孙佩光,刘菊华,金志强,徐碧玉[5]（2019）在《香蕉果实可溶性淀粉合成酶基因MaSSⅢ-1的分子特征与时空表达模式》一文中研究指出为弄清香蕉果实可溶性淀粉合成酶基因(MaSSⅢ-1)的分子特征及时空表达模式,以‘巴西蕉’果肉为试材,采用PCR法进行MaSSⅢ-1基因克隆,通过Quantitative real-time PCR (qPCR)和Western blot技术对MaSSⅢ-1基因及其蛋白表达模式进行分析。结果显示:MaSSⅢ-1基因cDNA全长为2397 bp,编码798个氨基酸,包括4个典型的结构域,GenBank登录号为KU757067。MaSSⅢ-1基因在香蕉根、球茎、花和苞片中表达量较低,在叶、果皮和果肉中表达量较高;随着香蕉果实发育,MaSSⅢ-1基因表达量逐渐上升,在抽蕾后50～60天达到最大;随着果实采后成熟,MaSSⅢ-1表达量在采后5天达到最大,随后逐渐下降。在香蕉果实不同发育及采后成熟阶段,MaSSⅢ-1蛋白呈现出与mRNA水平相一致的表达趋势。证明MaSSⅢ-1基因的表达不仅涉及到香蕉果实支链淀粉合成代谢,可能还涉及采后早期果实成熟或者支链淀粉降解。(本文来源于《中国农学通报》期刊2019年01期）
宋苗苗,李文庆,王文彦,刘世萱,王晓燕[6]（2018）在《面向分布式共享的海洋监测时空数据表达与传输模式研究》一文中研究指出针对海洋时空监测数据分布式共享中的网络传输性能瓶颈问题,提出了一种基于共享式编码与实时压缩的时空数据表达与传输模式,建立了面向服务的海洋时空数据分布式共享框架,采用GML、KML、Geo JSON实现了海洋监测数据的编码式表达,采用压缩算法实现了数据实时高效传输。基于阿里云计算平台,设计和部署了面向海洋应用的分布式GIS系统作为实验平台,实验结果表明,采用Geo JSON和Deflate-6/GZIP建立海洋监测时空数据表达与传输模式,在分布式共享与集成系统中表现出较好的适用性和较突出的性能优势。(本文来源于《山东科学》期刊2018年03期）
白书锋[7]（2018）在《Cav-1基因敲除小鼠下颌第一磨牙牙胚Shh信号通路的时空表达模式研究》一文中研究指出胞膜窖(Caveolae)是细胞质膜表面特异性内陷微区,主要由脂类和蛋白质组成。窖蛋白(Caveolins)是Caveolae的表面标记蛋白,是构成Caveolae的完整膜蛋白。窖蛋白至少有3种亚型,其中Caveolin-1(Cav-1)是Caveolae最重要的表面功能蛋白。胞膜窖和窖蛋白在多种细胞生物学功能中起关键作用。已有的研究表明Cav-1参与牙胚发育过程。Shh是高度保守的信号通路,参与多个器官的发育过程。在牙胚发育中Shh信号持续存在,调控牙源性上皮区域的确定,牙尖的发育和牙根的形成,并在确定牙齿数目中有重要作用。研究表明Cav-1可协助Shh从胞内运输至细胞表面。虽然Cav-1和Shh都参与牙胚发育,两者又有功能上的联系,但牙胚发育过程中Cav-1与Shh信号通路间是否存在调控关系尚不明确。目的通过对比观察Cav-1基因敲除小鼠与野生型小鼠下颌第一磨牙牙胚早期发育过程中Shh信号通路的表达,探讨Cav-1与Shh信号通路时空表达模式的关系,为深入研究Cav-1在牙齿发育中的作用提供参考。方法收集胚胎发育13.5,14.5,15.5,16.5,17.5及18.5天的Cav-1基因敲除小鼠(KO)和同源野生型小鼠(WT)的下颌第一磨牙牙胚,经聚合酶链式反应(PCR)及免疫组织化学技术鉴定基因型。免疫组织化学技术检测Shh、Ptc-1、Ptc-2、Gli-1、Gli-2在不同发育时期牙胚组织中的表达,并行统计学分析。结果Shh、Ptc-1、Ptc-2、Gli-1、Gli-2在E13.5-E18.5,WT和KO胎鼠的下颌第一磨牙牙胚中均有表达,并呈现出不同的表达模式。Shh蛋白在上皮芽的顶端可见阳性表达,帽状期特异性地表达于釉结部位,钟状期表达于成釉细胞层。Ptc-1在E13.5表达于上皮芽及周围间充质中,E14.5-E17.5天表达于外釉上皮、内釉上皮、星网状层、中间层及邻近内釉上皮的牙乳头细胞中,E18.5天,外釉上皮、成釉细胞、中间层仍可见Ptc-1表达,但牙乳头中未检测到Ptc-1表达。Ptc-2在成釉器中的表达模式类似于Ptc-1,但在牙乳头中未能检测到Ptc-2的表达。Gli-1,Gli-2表达模式相似,E13.5表达于上皮芽及周围间充质中,E14.5-E18.5天,表达于成釉器的各层细胞和牙乳头细胞。而同时期的WT和KO两者之间Shh信号通路的蛋白表达水平无显着性差异。结论Cav-1基因敲除对小鼠下颌第一磨牙牙胚早期发育中Shh信号通路的时空表达模式无显着性影响。(本文来源于《郑州大学》期刊2018-05-01）
纪祥龙,战一迪,李佩玲,刘勇[8]（2017）在《萝卜蚜反-β-法尼烯结合蛋白基因的时空表达模式分析（英文）》一文中研究指出【目的】气味结合蛋白(odorant binding proteins,OBPs)有助于提高昆虫嗅觉系统的敏感性,并且在蚜虫报警信息素反-β-法尼烯[(E)-β-farnesene EBF]的通信过程中起重要作用。萝卜蚜Lipaphis erysimi是十字花科作物的主要害虫,为了减少蔬菜田间的农药使用,EBF对蚜虫防治具有很大的潜力。然而,目前萝卜蚜对EBF反应的研究甚少。【方法】本研究利用PCR和RACE技术克隆并鉴定了2种公认的在萝卜蚜中对EBF具有高度亲和力的气味结合蛋白的基因LeryOBP3和LeryOBP7;利用RT-qPCR检测了它们在萝卜蚜不同发育阶段和无翅成蚜不同组织中的表达谱。【结果】克隆获得的萝卜蚜2个基因序列LeryOBP3(Gen Bank登录号:KJ703012)和LeryOBP7(Gen Bank登录号:KJ703013)分别与豌豆蚜Acyrthosiphum pisum ApisO BP3和ApisO BP7序列对比有较高的氨基酸序列一致性(分别为94%和88%),基因序列符合气味结合蛋白基因的典型特征。LeryOBP3和LeryOBP7开放阅读框全长分别为357和468 bp,分别编码118和155个氨基酸。发育表达谱表明,LeryOBP3和LeryOBP7的表达量高峰出现于成虫期;组织表达谱表明,LeryOBP3在成蚜足中表达量较高,而LeryOBP7主要表达于成蚜触角组织中。【结论】在萝卜蚜成虫触角中的LeryOBP7结合蛋白可能与其对EBF的响应有关。(本文来源于《昆虫学报》期刊2017年12期）
王睿,周梦杰,王一恒,刘耀林[9]（2017）在《东北地区空气质量时空模式的可视化制图表达》一文中研究指出我国的工业化发展严重依赖于煤炭、钢铁、电力、交通等传统污染性产业,这类产业高能耗、高污染的特性造成了严重的环境污染问题。东北地区是我国重要的重化工产业基地及主要粮食产业产区,其生态环境,特别是空气质量备受关注。本文利用点格图对2015年中国东北地区的空气质量时空分布情况进行了可视化表达。在利用日历视图可视化表达空气质量指数级别及首要污染物信息的基础上,还加入了地理参考信息。空气质量点格图为理解和分析东北地区的空气质量现状及其时空分布模式提供了面向大众的、直观有效的方法。利用该方法对空气质量进行分析,有助于辨别空气污染的主要问题、提高公众的环境保护意识,以及制定切实有效的遏制空气污染的政策法规。(本文来源于《测绘通报》期刊2017年08期）
陈叶清[10]（2017）在《荷花花青素苷合成关键结构基因的克隆及其时空表达模式研究》一文中研究指出荷花(Nelumbo nucifera Gaertn.)是莲科莲属水生植物,为中国十大传统名花之一,荷花花姿优雅,花色美丽,观赏价值极高,且全株多个组织或器官可入药或食用,具有很高的经济价值。目前荷花虽已有红、粉、白、黄、复色等多种花色的品种,但大多数品种为深浅不一的粉色系列,色调相对单一。迄今,有关荷花花色形成分子调控机制方面的研究较少,荷花花青素苷合成途径相关的调控机制尚不明了,阻碍了荷花花色分子育种工作的进一步推进。有鉴于此,本研究以红、粉、白、黄四个花色品种为研究对象,首先进行了不同品种花瓣的花色表观分析、色素含量测定,然后克隆了荷花花青素苷合成途径中的7个关键结构基因,并分析了这些基因在不同品种不同花发育时期(蕾期、初花期、盛花期、末花期)的花瓣,同一品种不同组织(花瓣、叶、叶柄、雄蕊、心皮)中的表达差异,探讨了花青素苷合成途径关键结构基因对荷花花色形成的调控机制,为进行荷花花色改良及创新的分子育种奠定了重要的理论基础。1不同品种不同花发育时期花瓣的花色表型分析和色素含量测定通过分析不同品种不同花发育时期花瓣的色差值、总类黄酮含量、总花青素含量变化,可知,红色及粉色品种表观花色的变化与总花青素含量的变化基本一致,但白色及黄色品种各花发育时期花瓣总花青素含量几乎为0;黄色品种不同花发育时期总类黄酮的含量高于其它品种。由此可推测红、粉色荷花花色的形成主要受花青素积累的影响,黄色荷花花色形成与黄酮醇等积累有关。2花青素苷合成途径中的关键结构基因的克隆及序列分析采用基因克隆的方式从荷花中分离出花青素苷合成途径中的7个关键结构基因。经测序比对,这7个关键结构基因分别为NnCHS、NnCHI、NnF3H、NnF3'H、NnF3'5'H、NnDFR、NnANS MiCHS开放性阅读框(ORF)为1170bp,编码389个氨基酸；NnCHI的ORF长度为630 bp,编码209个氨基酸;NnF3H的ORF为996 bp,编码331个氨基酸；NnF3'H的 ORF 为 1542bp,编码 513 个氨基酸;NnF3'5'的 ORF 为 1524bp,编码507个氨基酸;NnDFR的ORF为1029 bp,编码342个氨基酸;NnANS的ORF为1080 bp,编码389个氨基酸。在氨基酸序列的同源性比对分析中,荷花F3H及DFR与其他物种的同源性较低,荷花CHS、CHI、F3'H、F3'5'H、ANS与其他物种相关基因编码的氨基酸序列的同源性较高;系统发育树分析结果表明,荷花F3H、ANS与其他物种相关蛋白的亲缘性较远。对7个基因编码的蛋白质的基本结构进行预测,结果显示,荷花F3'H可能为亲水性蛋白；荷花CHS、CHI、F3H、DFR、ANS为酸性蛋白;荷花CHS、CHI、F3'H、DFR为稳定性蛋白;蛋白质的基本二级结构由a螺旋、延伸链、β转角、随机卷曲组成;7个蛋白质均具有相应的蛋白结构域。3荷花花青素苷合成途径中关键结构基因的表达模式首先,通过对8个看家基因的稳定性进行评价,发现荷花不同花色品种及不同花发育时期qPCR基因表达研究中最适的内参基因为EFla和ACT。在确定合适内参基因的基础上,我们对荷花花青素苷合成途径中7个结构基因的时空表达进行了检测。结果发现,在红色荷花品种中,7个关键结构基因的表达量随着花发育期呈现先增加后减少的趋势,在盛花期表达量较高;粉色荷花品种中,F3'H在不同花发育期的表达量几乎为0,其它基因则随着花发育期表达量逐渐减少;白色荷花品种不同花发育期,DFR及ANS的表达量几乎为0;黄色荷花品种不同花发育期的花瓣中几乎检测不到DFR的表达,但CHI在蕾期出现高量表达。在不同组织间,7个基因在花瓣中的表达量均显着高于其它组织。综上,在荷花花青素合成途径中,CHI、F3'H、DFR、ANS的表达量可能对花青素的合成及积累起着重要的调控作用,从而影响荷花花色的形成。(本文来源于《南京农业大学》期刊2017-06-01）
时空表达模式论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:克隆表达家蝇的Clip-丝氨酸蛋白酶基因(Clip-serine protease gene of Musca domestica,Clip-Msp)和C型凝集素基因(C-type lectin gene of Musca domestica,Mdctl),并对Clip-Msp在白假丝酵母菌感染后的时空表达模式进行研究。方法:从课题组前期构建的微生物感染后免疫相关基因文库中筛选得到高表达基因Clip-Msp(GeneID:LOC101901626)和Mdctl(GeneID:LOC101890789),然后依据NCBI网站上的预测序列设计引物,以家蝇叁龄幼虫cDNA为模板,PCR扩增目的片段。使用生物信息学软件对它们的序列及编码蛋白作分析和预测。通过基因工程的方法,构建pET-28a/Clip-Msp和pET-28a/Mdctl重组质粒,随后导入到大肠杆菌BL21-DE3中诱导表达。表达产物和Ni-IDA Agarose纯化蛋白用SDS-PAGE和Western-Blot分析鉴定。以GAPDH作为内参,运用实时荧光定量PCR方法检测Clip-Msp在家蝇叁龄幼虫感染白假丝酵母菌后3h、12h、24h以及48h不同组织(体壁、脂肪体、血淋巴、唾液腺、肠道、马氏管和气管)中的表达情况。结果:家蝇Clip-Msp基因开放阅读框(ORF)长度为1524 bp,编码蛋白长度507个氨基酸,其理论分子量约为56320.1 Da,等电点约为8.52。蛋白质在溶液中性质不稳定;总体疏水性较高,无信号肽,属于非经典分泌型蛋白。Clip-Msp蛋白的N端存在一个Clip结构域,C端有一个Tryp_SPc催化结构域,属于单催化结构域Clip-丝氨酸蛋白酶超家族。Mdctl基因ORF长度为333 bp,其蛋白包含110个氨基酸残基,分子量为13131.42 Da,等电点为4.49,信号肽范围为1-22位氨基酸,是分泌型蛋白。Mdctl蛋白中存在Clect结构域,属于C型凝集素超家族。成功构建pET-28a/Clip-Msp和pET-28a/Mdctl表达质粒,经IPTG诱导后两种重组蛋白均在大肠杆菌中主要以包涵体的形式表达,其分子量与理论值相一致。实时荧光定量PCR结果显示:白假丝酵母菌感染家蝇叁龄幼虫后,Clip-Msp基因在所有检测组织中表达均上调,不同时间点、不同组织中表达有极显着差异(P<0.05)。3h时以血淋巴中表达量增加最高;12h时以脂肪体、气管、唾液腺和肠道中表达量增加为主,其中脂肪体内的相对表达量最高;24h时主要在肠道中表达增加最明显,脂肪体次之;48h时血淋巴中表达量高于其它所有组织。结果分析得出:Clip-Msp基因主要分布在血淋巴、脂肪体和肠道中。结论:家蝇Clip-Msp由507个氨基酸组成,无信号肽,为Clip-SP家族新成员。家蝇叁龄幼虫在白假丝酵母菌感染后,虫体组织中Clip-Msp基因的表达随时间的推移呈现先升高后降低的趋势,其中以血淋巴、脂肪体和肠道的表达量增加最为明显。Mdctl基因编码家蝇新凝集素,属于C型凝集素超家族。本研究成功建立pET-28a/Clip-Msp和pET-28a/Mdctl原核表达体系,获得了它们的重组蛋白。结果提示Clip-Msp和Mdctl可能参与了家蝇真菌感染的免疫反应,也为进一步对家蝇Clip-Msp和Mdctl的研究提供了基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
时空表达模式论文参考文献
[1].张丹,胡晓莹,张莉,马海龙,王超.沙蒿AQP基因结构预测及干旱胁迫下的时空表达模式研究[J].西北植物学报.2019
[2].常振策.家蝇Clip-Msp和Mdctl基因克隆表达及白假丝酵母菌刺激下Clip-Msp时空表达模式的研究[D].贵州医科大学.2019
[3].王瑶瑶.高温处理的尼罗罗非鱼性腺分化过程及性别决定相关基因时空表达模式研究[D].山东农业大学.2019
[4].陈晓霞.CDKN1A、CDKN1B基因在蛋鸡等级前卵泡组织中的时空表达模式研究[J].中国家禽.2019
[5].苗红霞,孙佩光,刘菊华,金志强,徐碧玉.香蕉果实可溶性淀粉合成酶基因MaSSⅢ-1的分子特征与时空表达模式[J].中国农学通报.2019
[6].宋苗苗,李文庆,王文彦,刘世萱,王晓燕.面向分布式共享的海洋监测时空数据表达与传输模式研究[J].山东科学.2018
[7].白书锋.Cav-1基因敲除小鼠下颌第一磨牙牙胚Shh信号通路的时空表达模式研究[D].郑州大学.2018
[8].纪祥龙,战一迪,李佩玲,刘勇.萝卜蚜反-β-法尼烯结合蛋白基因的时空表达模式分析（英文）[J].昆虫学报.2017
[9].王睿,周梦杰,王一恒,刘耀林.东北地区空气质量时空模式的可视化制图表达[J].测绘通报.2017
[10].陈叶清.荷花花青素苷合成关键结构基因的克隆及其时空表达模式研究[D].南京农业大学.2017
论文知识图
