导读:本文包含了甲基特异性聚合酶链反应论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:甲状腺癌,基因,p16,甲基化,诊断
甲基特异性聚合酶链反应论文文献综述
李晓芳,金月玲,何钟磊,顾大坤[1]（2013）在《巢式甲基化特异性聚合酶链反应法检测甲状腺患者血浆p16基因启动子区域异常甲基化及其临床意义》一文中研究指出目的探讨甲状腺癌患者血浆p16基因启动子区域异常甲基化及其在甲状腺癌筛查及早期诊断中的价值,为甲状腺癌的早期诊断提供依据。方法利用巢式甲基化特异性聚合酶链反应(nested methylation specific PCR,nMSP)法检测50例甲状腺癌患者和32例结节性甲状腺肿患者组织和血浆中p16基因启动子区域的异常甲基化情况;分析p16基因异常甲基化与甲状腺癌临床特征的相关性及血浆p16基因异常甲基化与肿瘤组织检测结果之间的一致性。结果甲状腺癌患者组织中p16基因启动子区甲基化率为54%(27/50),血浆标本中p16基因启动子区甲基化率为52%(26/50),两者有很好的一致性(P>0.05);结节性甲状腺肿患者组织标本和血浆标本中均未见p16基因启动子区甲基化,与甲状腺癌患者相比,差异均有统计学意义(P<0.01);血浆标本p16基因甲基化检测敏感度为52%,特异度为100%。结论血浆中p16基因启动子区域异常甲基化的检测有望成为甲状腺癌筛查和早期诊断的有效指标。(本文来源于《中国慢性病预防与控制》期刊2013年01期）
林福安,叶宝国,沈建箴,周华蓉,傅海英[2]（2007）在《半巢式甲基化特异性聚合酶链反应对肿瘤细胞株p15基因甲基化或缺失状态的检测》一文中研究指出本研究分析多种恶性肿瘤细胞株的p15基因甲基化或缺失状态,阐明p15基因甲基化或缺失在肿瘤发生发展中的作用。运用半巢式甲基化特异性聚合酶链反应(hemi-nested methylation specific polymerase chain reaction,hn-MSP)分析20种恶性肿瘤细胞株和正常人单个核细胞或细胞株的p15基因甲基化及缺失状态,并评价该方法的敏感性和特异性。结果表明:在所有的细胞中,Molt-4、Raji、KG1、CA46、SW480、NCE、SMMC-7221、NCI-H446细胞为部分甲基化,hn-MSP检测p15基因甲基化敏感性可达到1×10-5。正常人单个核细胞、HL-60、HeLa、HepG2、293、SGC7901、U266、CEM细胞则为p15非甲基化,而K562、NB4、GMC、Jurkat似乎显现p15基因缺失或突变。结论:p15基因甲基化或缺失在多种肿瘤,特别在恶性血液病中有较高的发生率,且对疾病的进展及预后有密切的关系,hn-MSP具有较高的敏感性和特异性,值得在临床推广应用。(本文来源于《中国实验血液学杂志》期刊2007年02期）
王刚,刘利,陈杰,辛海明,蔡云[3]（2006）在《甲基化特异性聚合酶链反应关键步骤的质量评价与试验技巧》一文中研究指出随着表观遗传学研究的发展,DNA甲基化备受关注。目前研究甲基化的方法众多,Herman等[1]报道的甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)具灵敏、快速、简便等优点,应用最为广泛。但该方法针对特异位点判定结果时,易受诸多因素影响,因此试验条件要求极为严格;然而(本文来源于《中华检验医学杂志》期刊2006年10期）
沈佳尧,侯鹏,祭美菊,郭庆明,何农跃[4]（2004）在《半巢式甲基化特异性聚合酶链反应在胃癌p16基因甲基化检测中的应用》一文中研究指出目的 改进甲基化特异性聚合酶链反应 (MSP) ,采用半巢式MSP检测胃癌组织p16基因启动子区CpG岛的甲基化状态。方法 用亚硫酸氢盐修饰被测DNA后 ,采用半巢式MSP(引物分别为MS ,M1A和MS ,M2A) ,分析了 6 0例胃癌组织及相应正常组织中p16基因的甲基化状态。结果 单独用MSP ,胃癌组织中p16基因甲基化的发生率为 80 %。采用半巢式MSP ,甲基化发生率为86 7% ,比单独采用MSP提高了几个百分点 ,并提示胃癌病例的p16基因启动子区存在甲基化发生的不同模式。结论 半巢式MSP能够有效地提高灵敏度和减少假阳性。同时 ,免疫组化的结果也说明了p16基因异常甲基化与胃癌组织P16蛋白的表达密切相关。(本文来源于《中华检验医学杂志》期刊2004年02期）
姚群峰,康新江,宁勇,唐朝晖,周宜开[5]（2004）在《巢式甲基化特异性聚合酶链反应在p16基因启动子过甲基化检测中的应用》一文中研究指出目的 介绍巢式甲基化特异性聚合酶链反应 (nMSP)法 ,探讨了最佳PCR扩增条件 ,并用该法分析新鲜癌组织、石蜡包埋组织及肿瘤患者血清中p16基因启动子的甲基化状态。方法 将基因组DNA变性成为单链 ,用亚硫酸氢盐修饰单链DNA ,将所有未甲基化的胞嘧啶被转变为尿嘧啶 ,而甲基化的胞嘧啶则不变。设计针对甲基化和非甲基化等位基因特异引物 ,进行巢式聚合酶链反应扩增 ,最后经凝胶电泳检测目的片段。结果 在 3种类型的标本中都检测出了p16基因启动子甲基化。用甲基化特异性聚合酶链反应法 (MSP)和nMSP法分别检测 34例非小细胞肺癌 (NSCLC)患者血清 ,p16基因启动子甲基化阳性率分别为 5 3% (18/34)和 74 % (2 5 /34) ,nMSP法具有更高的灵敏度。结论 筑巢式甲基化特异性聚合酶链反应是一种灵敏度高、特异性强的甲基化检测方法 ,可广泛应用于不同类型标本基因启动子甲基化分析。(本文来源于《中华检验医学杂志》期刊2004年02期）
沈志坚,张君丽,俞康,江松福[6]（2002）在《应用甲基化特异性聚合酶链反应分析P15基因对成人急性白血病微小残留病灶的检测价值》一文中研究指出目的 :评价由甲基化特异性聚合酶链反应分析P15基因甲基化对成人急性白血病微小残留病灶的检测价值。方法 :运用甲基化特异性聚合酶链反应 ,分析了 38例各种类型的急性白血病在初诊时和缓解后的不同阶段P15基因的甲基化状态。结果 :①甲基化特异性聚合酶链反应检测P15基因甲基化的敏感性为 2 .0× 10 -4。② 38例急性白血病初诊时的P15基因甲基化的出现率为 6 8.4 % ,正常对照组无甲基化。③P15基因甲基化可能与疾病的预后有关。经治疗后P15基因甲基化消失的病人与P15基因甲基化持续存在的病人复发率之间的差异有显着性 (0 %比 6 8.8% ,P <0 .0 1)。结论 :P15基因甲基化状态在急性白血病中有较高的检出率 (达 6 8.4 % )。应用甲基化特异性聚合酶链反应分析急性白血病P15基因甲基化状态的特异性和敏感性高。该指标可监测急性白血病微小残留病灶相关的情况 ,值得在临床上推广。(本文来源于《温州医学院学报》期刊2002年04期）
张雨生,楼方定,于力[7]（1999）在《采用甲基化特异性聚合酶链反应研究急性白血病p15基因CpG岛甲基化》一文中研究指出目的 探讨ｐ１５ 基因ＣｐＧ岛甲基化作为各型急性白血病通用的基因标志物的可行性。方法 采用甲基化特异性聚合酶链反应（ＭＳＰ）法检测４０ 例初治或复发急性白血病、５ 例完全缓解期白血病及８ 例（ 份） 正常骨髓的ｐ１５ 基因ＣｐＧ岛甲基化，并对ＭＳＰ产物进行序列测定。结果 急性白血病患者ｐ１５ 基因ＣｐＧ岛甲基化阳性率为８０％ ，ＡＭＬ与ＡＬＬ的阳性率（分别为８３％ 和７３％） 差异无显着性；５ 例完全缓解期白血病患者中１ 例ｐ１５ ＣｐＧ岛甲基化阳性（该例患者不久白血病复发）；正常骨髓８ 例均为阴性，表明ｐ１５ ＣｐＧ岛甲基化为白血病细胞所特有；ＭＳＰ产物测序结果与理论结果相符合，ＭＳＰ敏感度可达１０ －３。结论 ｐ１５ ＣｐＧ岛甲基化在各型急性白血病中均有很高的发生率，可以作为各型急性白血病通用的微量残留病（ＭＲＤ） 指标；白血病完全缓解期ｐ１５ ＣｐＧ 岛甲基化仍为阳性可能预示着复发；ＭＳＰ法ＤＮＡ需要量极少，不需要有特异性酶切位点，无同位素污染，对标本要求不高，敏感度高，是甲基化研究的一个简便、敏感、特异的新手段。(本文来源于《中华血液学杂志》期刊1999年12期）
甲基特异性聚合酶链反应论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本研究分析多种恶性肿瘤细胞株的p15基因甲基化或缺失状态,阐明p15基因甲基化或缺失在肿瘤发生发展中的作用。运用半巢式甲基化特异性聚合酶链反应(hemi-nested methylation specific polymerase chain reaction,hn-MSP)分析20种恶性肿瘤细胞株和正常人单个核细胞或细胞株的p15基因甲基化及缺失状态,并评价该方法的敏感性和特异性。结果表明:在所有的细胞中,Molt-4、Raji、KG1、CA46、SW480、NCE、SMMC-7221、NCI-H446细胞为部分甲基化,hn-MSP检测p15基因甲基化敏感性可达到1×10-5。正常人单个核细胞、HL-60、HeLa、HepG2、293、SGC7901、U266、CEM细胞则为p15非甲基化,而K562、NB4、GMC、Jurkat似乎显现p15基因缺失或突变。结论:p15基因甲基化或缺失在多种肿瘤,特别在恶性血液病中有较高的发生率,且对疾病的进展及预后有密切的关系,hn-MSP具有较高的敏感性和特异性,值得在临床推广应用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
甲基特异性聚合酶链反应论文参考文献
[1].李晓芳,金月玲,何钟磊,顾大坤.巢式甲基化特异性聚合酶链反应法检测甲状腺患者血浆p16基因启动子区域异常甲基化及其临床意义[J].中国慢性病预防与控制.2013
[2].林福安,叶宝国,沈建箴,周华蓉,傅海英.半巢式甲基化特异性聚合酶链反应对肿瘤细胞株p15基因甲基化或缺失状态的检测[J].中国实验血液学杂志.2007
[3].王刚,刘利,陈杰,辛海明,蔡云.甲基化特异性聚合酶链反应关键步骤的质量评价与试验技巧[J].中华检验医学杂志.2006
[4].沈佳尧,侯鹏,祭美菊,郭庆明,何农跃.半巢式甲基化特异性聚合酶链反应在胃癌p16基因甲基化检测中的应用[J].中华检验医学杂志.2004
[5].姚群峰,康新江,宁勇,唐朝晖,周宜开.巢式甲基化特异性聚合酶链反应在p16基因启动子过甲基化检测中的应用[J].中华检验医学杂志.2004
[6].沈志坚,张君丽,俞康,江松福.应用甲基化特异性聚合酶链反应分析P15基因对成人急性白血病微小残留病灶的检测价值[J].温州医学院学报.2002
[7].张雨生,楼方定,于力.采用甲基化特异性聚合酶链反应研究急性白血病p15基因CpG岛甲基化[J].中华血液学杂志.1999