导读:本文包含了微米中药论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:中药,小鼠,胰腺,肿瘤,磷酸酶,家兔,功能。
微米中药论文文献综述
曾庆,黄国志,梁东辉,邓虹珠,易延逵[1]（2016）在《微米中药功能衬材:活血及促进骨折愈合的作用》一文中研究指出背景:课题组研制出一种新型医用骨科外固定材料——微米中药功能衬材,并证实该衬材具有促进碱性磷酸酶分泌,降低血钙,升高血磷和钙磷乘积,促进骨痂形成的作用。目的:进一步验证微米中药功能衬材促进骨折愈合的疗效。方法:取新西兰兔24只,造成右侧桡骨骨折模型后随机分组,微米组外敷微米中药功能衬材(微米叁七粉混合骨碎补、红花等药物的有效成分)后加石膏外固定,中药对照组外敷普通中药功能衬材(普通叁七粉)后加石膏外固定,衬材对照组外敷普通衬材(无菌脱脂棉)后加石膏外固定,模型对照组不予任何治疗。于造模前和造模后第2,4,6周行全血高切黏度、全血中切黏度、全血低切黏度和血浆黏度检测;造模后第6周末处死兔,取桡骨标本进行组织学观察。结果与结论:(1)血液流变学指标:微米组全血高切黏度、全血中切黏度、全血低切黏度和血浆黏度均低于同时期其余对照组,造模后第4,6周与模型对照组比较差异有显着性意义(P<0.05或0.01);(2)组织形态学观察:微米组可见大量成骨细胞,编织骨开始塑形,骨髓腔再通;中药对照组可见编织骨、软骨细胞和软骨内成骨共存,断端内、外骨痂相连,骨髓腔未再通;衬材对照组和模型对照组断端内、外骨痂大多尚未相连,骨髓腔未再通;(3)结果表明:微米中药功能衬材能够活血化瘀,改善微循环,促进成骨细胞增生,并进而促进骨折愈合。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2016年38期）
周钰[2]（2011）在《超声电导经皮透入微米中药的镇痛机理和应用基础研究》一文中研究指出[背景]疼痛的机理至今未能解释清楚,但疼痛却常常是病人到医院就诊的主要原因。疼痛通常可分为两类：一类是疾病的信号,即疼痛只是疾病的一种症状,如感冒发烧的头疼脑热等。只需把疾病治愈,作为疾病信号的疼痛就会消失。另一类疼痛本身就是疾病。如叁叉神经痛、带状疱疹后神经痛、癌症疼痛(癌症晚期已经治疗无效,但是还有半年到一年的生存期,但疼痛往往使病人可能只存活两叁个月)、患肢痛、顽固性腰腿痛等。总的说来,疼痛到难以控制,威胁到病人生命的时候,疼痛就从疾病的症状转变为疾病,需要针对疼痛进行镇痛治疗。疼痛医学在发达国家已受到极大的关注和重视,2000年,世界卫生组织给“疼痛”正式下了定义：慢性疼痛是一类疾病。并且,把疼痛列为继呼吸、脉搏、体温和血压之后的人类第5大生命指征。而我国目前慢性疼痛的治疗还处于起步阶段。存在治疗疼痛的手段单一,药物治疗为主导,包括各种麻醉、镇痛药物的口服和注射、麻醉药物神经阻滞(Nerven-blockade)疗法等。但存在着口服药物胃肠道反应大,不宜长期应用,麻醉剂成瘾性和神经阻滞专业技术要求高,难以普遍推广应用等问题。如何快速、安全、稳定、有效、可控性镇痛,提高镇痛质量一直是医学界共同关注的重大课题之一。随着传统中药的研究与现代药理研究的不断深入,发现许多中草药具有明显的镇痛效果,对多种疼痛的镇痛疗效确切。而且没有明显的成瘾性、耐受性等毒副作用。是当今镇痛药研究的热点。尤其是近年来我国利用超微粉碎技术制备的比较成熟的微米中药镇痛剂,微米中药是指微米级(平均直径≤15μm)中药有效成分、有效部位、原药及其复方制剂。它是中药微米化后的产物,不是一种新的药种。既能有效保留中药得有效成分不被破坏,同时由于制得的颗粒比表面积增大,能有效增进药物有效成分的溶出,提高药物的生物利用度；其次它可以提高药物的靶向性,有助于控制药物在体内的分布等；其在体内的传输更方便,不仅可以缓释药物,延长药物的作用时间,并能达到靶向输送的目的,从而显着提高了中药的疗效,降低其毒副作用,提高药物稳定性,这与中药现代化的核心”安全、有效、可控、稳定”息息相关。经皮给药是目前国际医药界热门的研究领域,强力渗透(物理经皮定位透药)是发展最快的技术分支。特别是几种物理方法之间及物理方法及其它促渗方法之间作用的迭加与协同深受业内人士的关注。近来研究较多的方法有：激光微孔技术(laser microdissection LMD)、电致孔技术(electropration)、超声透皮技术(sonophoresis)和现代离子导入技术(iontophoresis)等。超声电导靶向给药治疗技术是近年来美国等西方国家兴起的新的药物治疗技术。它通过综合采用激光微孔、电致孔、超声空化和离子导入技术四种应用于现代生物工程的高技术手段,使药物透过皮肤进入体内病变组织和器官,直接发挥药物治疗作用。首先在一定范围和深度内使皮肤和组织对药物的通透性大大增加,形成药物进入靶器管的人工生物通道。然后在特定的动能驱动下,使药物粒子沿生物通道透过皮肤、组织和包膜,定向、定量、定速的进入病变组织和器官,最终在靶组织内形成药物高浓度浸润区,直接发挥药物治疗作用,达到靶向治疗的目的。被医学界称为第叁代给药方法。其作用优势：1、透药速度快,比自然渗透高上百倍；2、可实现定时、定量及定速给药,在病变局部形成药物高浓区,并可促进药物向细胞内的转运,增加药物的作用,从而提高疗效；3、大大提高药物的生物利用度,减少用药总量,避免毒副作用；4、药效稳定持久,比口服药长2—3倍；5、适应范围大,除化学药物外,还能透过大分子身生物制剂和中药胶体颗粒成份；6、无痛、无创、简捷、方便。目前美国等发达国家已成功地将这一方法用于抗生素、激素、抗癌药、镇痛药等九大类300余种药剂,特别是一些高活性、高毒性、高风险而又需要局部高高浓度的药物,用此方法发挥了独特的治疗效果。国内亦有应用该疗法治疗局灶性感染性疾病、前列腺疾病、骨关节疼痛等疾病的临床报道。近年来国内外研究较多的是局部镇痛药物(如麻醉、镇痛和非甾体类抗炎等药物)经皮透入治疗各种局灶性疼痛。大量的实验(包括离体实验、动物实验和人体实验)及临床应用取得了可喜的成果。但西药镇痛药的成瘾性、耐受性等毒副作用依然制约着临床的广泛应用。国内北京诺亚同舟医疗技术有限公司应用超声电导仪,参照美国产品技术改造而成既可适用于化学药物和生物药物、又适合中药制剂的耦合凝胶贴片,其产品已应用于临床。但其贴片需另外加入各种药物,每片加入药量仅0.5ml,人为影响因素大,存在药量和局部有效浓度不易控制,可能影响疗效,同时存在使用不方便等不足。本研究运用目前中药现代化最前沿的创新成果-微米中药技术,将经现代药理研究证实的中药镇痛药微米化后,研制出含有微米中药的凝胶药物贮库贴片,该凝胶贴片具备骨架型经皮给药系统的特点,贮库的微米中药在超声电导仪的作用下,直接释放药物到皮肤并扩散到病变组织,并保持稳态的血药浓度,从而达到快速镇痛的目的。国际医药界认定,这一方法将成为新世纪的主导药物治疗方法。活血镇痛散为我院中医科梁教授祖传用于治疗急性软组织损伤的外治经验方,由骨碎补、叁七、红花等多味中药组成,具有活血化瘀、消肿止痛、舒筋活络、疗伤接骨等作用,主要用于治疗扭挫伤痛、风湿痹痛、冻疮红肿、软组织损伤及骨折等。本研究产品——微米中药耦合凝胶贴片,先将中药验方”活血镇痛散”微米化,并经药理实验证实其疗效,然后参照美国相关技术研究制作出超声电导微米中药凝胶贴片,该贴片采用改良性纤维网织材料内充水化凝胶基质为微米中药贮库,既有很好的承载能力和控释能力,同时具有超声耦合和导电等作用,能满足超声电导透皮治疗的需要,同时便于给药剂量的标准化、规范化,以及制剂生产工艺、质量控制的标准化和规范化。本研究包括叁大项内容,分别为：正交设计进行活血镇痛散的醇提工艺研究、活血镇痛散的质量标准研究、超声电导经皮透入微米活血镇痛散的镇痛机理和应用基础研究。正交设计进行活血镇痛散的醇提工艺研究：采用传统水提法提取的活血镇痛散药效不明显,推测可能为有效成分提取不充分所致。方中君药骨碎补主要活性是以柚皮苷为代表的二氢类黄酮化合物,易溶于乙醇、丙酮等有机溶剂,臣药叁七主要有效成分是叁七皂苷和人参皂苷类(Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Re)等,易溶于甲醇、乙醇等有机溶剂。本实验以处方的醇浸膏得率和君药骨碎补有效成分柚皮苷含量为考察指标,采用L。(34)正交实验法对活血镇痛散醇提取工艺进行优化筛选。活血镇痛散的质量标准研究：为更好的控制药品的内在质量,确保临床用药的安全有效性,进行了活血镇痛散的质量标准研究。本实验采用薄层色谱法对活血镇痛散中的骨碎补、叁七、红花、土鳖虫、半枝莲、冰片进行定性鉴别研究,并对复方中重金属和砷盐的含量限度进行了实验考察,以供制定质量标准参考。超声电导经皮透入微米活血镇痛散的镇痛机理和应用基础研究：是超声电导经皮透药新技术和微米中药新剂型相结合的实验和应用基础研究,旨在观察超声电导经皮透入微米活血镇痛散、超声电导物理治疗及微米活血镇痛散外敷作用于兔软组织损伤模型,以叁七粉的微米程度,软组织挫伤处肿胀面积、外周血液白细胞数变化、光镜下组织学观察为考察指标。观察其治疗效果,同时考察超声电导透皮给药方法的作用条件和影响因素,探讨其作用机制并考察用药安全性。[目的]首先优化筛选出活血镇痛散的最佳醇提取工艺,观察醇提浓度、加醇量、提取时间时间、提取次数等因素对活血镇痛散醇提取工艺的影响,其次更好的建立活血镇痛散的质量控制标准,补充中药质量标准参考,最终观察超声电导经皮透入微米活血镇痛散对兔急性软组织损伤模型的影响,为其临床应用和成果转化提供依据,申请专利。[方法]正交设计进行活血镇痛散的醇提工艺1.实验考察因素及水平：对乙醇体积分数(A)、加醇量(B)、提取时间(C)3个因素进行考察。同时每个因素中选出常规的3个水平,即乙醇体积分数：85%、65%、50%；加相应体积分数乙醇量(倍)：7、6、6,6、5、5,5、4、4；提取时间(h)：2.5、2.0、2.0,2.0、1.5、1.5,1.5、1.0、1.0。2.处理方式：采用L9(34)正交实验法对活血镇痛散醇提取工艺进行优化筛选。3.观察指标：醇浸膏得率、吸醇率和HPLC法测定的柚皮苷含量活血镇痛散的质量标准控制研究1.定性鉴别方法：采用薄层色谱(TLC)法对活血镇痛散中骨碎补、叁七、红花、半枝莲、土鳖虫、冰片进行定性鉴别；2.重金属和砷盐考察方法：重金属采用纳氏比色法,砷盐采用古蔡氏法测定限量：3.观察指标：定性鉴别中,观察在供试品色谱中,在与对照药材及对照品色谱相应位置上是否显相同的斑点,阴性对照是否无干扰。重金属考察中,以样品纳氏比色管与标准铅纳氏比色管相比较所显颜色的深浅,判定样品中重金属的含量限度。砷盐考察中,将生成的样品砷斑与标准砷斑相比较,判定样品中砷盐的含量限度。超声电导经皮透入微米活血镇痛散的镇痛机理和应用基础研究1.急性软组织损伤模型的建立及实验分组：取新西兰大白兔,选择兔后肢大腿外侧,距窝4～7cm处,用自制打击棒自由落体击打兔大腿外侧部,并证实无骨折后表示模型建立成功。取造模成功兔24只,随机分4组,每组6只。即：模型对照(1组)、超声电导经皮透入空白凝胶贴片(2组)、超声电导经皮透入微米活血镇痛散(3组)及微米活血镇痛散外敷(4组)2.微米活血镇痛散凝胶贴片的制备过程为：①将活血镇痛散所用药物粉碎过筛。②醇提活血镇痛散药方中有效成分,并制得干膏粉。③采用惰性气氛保护的高能球磨装置系统制备微米叁七粉。④在干膏粉中加入冰片和微米叁七粉末,混合均匀,加入空白凝胶贴片中(内充水化凝胶基质、促渗剂、PVA等)制成复方中药凝胶贴片,使中药药膏成分均匀地混吸改良性纤维网织材料内充水化凝胶基质中,即为微米活血镇痛散的凝胶贴片。3.实验治疗方法：各组动物(除1组外)于造模后2h后开始用药治疗,具体如下：第2、3组将凝胶贴片贴与治疗头,将治疗头固定在损伤的软组织处。并用约束带固定治疗部位,治疗强度及参数选择：致孔2、超声2、中频1、时间15min,治疗结束后去除治疗头保留贴片2h,2次/日,连续4d。第4组按给药剂量外敷于患处2次/日,并固定保留药物2h,连续4d。4.皮肤用药急性毒性试验及皮肤刺激性试验方法：皮肤用药急性毒性试验：取兔15只随机分五组,即：一组对照组3只(涂生理盐水1mL),四组试验组12只(完整皮肤组及破损皮肤组,各2个剂量)。低剂量组以临床用制剂量,高剂量组为低剂量组2-3倍。分别将药物均匀地混吸于改良性纤维网织材料内充水化凝胶基质的空白凝胶贴片中。皮肤刺激性试验：取兔6只随机均分为完整皮肤组3只及破损皮肤组3只。分别在脱毛后第2天,把微米凝胶贴片贴于脱毛区一侧,并用无刺激性纱布加以固定。每只动物单笼饲养。涂药24h后,揭开纱布并用温水洗涤去除残留受试药物。5.指标检测方式：叁七粉微米化前后在扫描电镜下行粒径对比；测量并计算四组每日肿胀面积变化情况,连续测4d；抽血测量造模前,造模后第2、3、4日兔耳缘静脉白细胞数值变化；4d后取动物同一打击部位、大小相等的组织块石蜡包埋切片,HE染色,光镜下病理组织学观察并评分；观察去除受试物1,24,48,72h至第7d,每日观察并记录动物体重、皮肤毛发、眼和粘膜的变化、呼吸、中枢神经系统、四肢活动等其他中毒表现。肉眼观察记录去除受试物1,24,48,72h涂抹部位局部有无红斑和水肿等反应。并按皮肤皮肤刺激性反应评分标准评分,记录各时日的评分值。[统计学方法]实验数据计量资料均以均数±标准差(x±s)表示。采用SPSS13.0软件进行统计分析。两个独立样本的总体均数比较采用独立样本t检验,L9(34)正交实验设计采用正交设计资料的方差分析,多组间计量资料比较使用单因素方差分析(one-way ANOVA),不同时间点的软组织挫伤处肿胀面积变化及外周血液白细胞数比较采用重复测量的方差分析。检验标准α定为0.05。[结果]正交设计进行活血镇痛散的醇提工艺1.方法学考察结果标准曲线方程为：Y=72.008X+18.041,r=0.9994(n=6)。结果表明,柚皮苷在0.135-1.620 mg/L范围内具有良好的线性关系；精密度试验测得RSD值为0.86%；重现性试验测得RSD值为1.46%；稳定性试验测得RSD值为1.04%,表明供试品溶液在24h内基本稳定；加样回收率试验结果：回收率102.46%,RSD值为2.31。2.吸醇率考察结果：吸醇率平均值为265.67mL/g, RSD为1.48%表明提取时第1次醇提取时应加相应体积分数乙醇量3倍量以上。3.渗漉法与回流提取法比较结果：回流提取的柚皮苷提取量平均值为238.23±7.00mg/g,RSD为5.86%；渗漉的柚皮苷提取量平均值为238.18±5.86mg/g, RSD为7.00%。两组均数经两独立样本t检验差异具有统计学意义(t=-8.039,P=0.000),可认为渗漉法与回流提取法柚皮苷提取量差异具有显着性意义,参考两法均值,结果表明醇提以回流法为好。4.醇提次数的选择试验结果：第3次醇提的醇浸膏得率及柚皮苷提取量所占比率均大于10%,应进行3次醇提方可完全提取药物成分。5.正交设计实验结果：乙醇体积分数(因素A)各水平均值分别为A1=87.197,A2=91.789,A3=81.367；加醇量(因素B)各水平均值分别为B1=90.607,B2=91.828,B3=77.917；提取时间(因素C)各水平均值分别为C1=86.282,C2=87.241,C3=86.829。方差分析结果乙醇体积分数、加醇量两因素影响具有显着性意义(FA=19.738、PA=0.048,FB=19.738、PB=0.023),提取时间因素影响不具有显着意义(Fc=0.167、Pc=0.857)。结合各因素各水平均值认为A2B2C2为好；选择A2B2C2组合为优选工艺,即药材加乙醇回流提取3次,第1次加6倍量体积分数65%乙醇提取2h,第2次加5倍量体积分数65%醇提取1.5h,第3次加5倍量体积分数65%醇提取1.5h。活血镇痛散的质量标准控制研究1.采用薄层色谱(TLC)法对复方药材定性鉴别结果：①骨碎补：供试品色谱中,在与对照药材及对照品色谱相应位置上显相同的黄色荧光斑点,阴性对照无干扰；②叁七：供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,分别显相同颜色的荧光斑点。阴性对照无干扰；③红花：供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,日光下显相同颜色的浅红色斑点；④半枝莲：供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。阴性对照无干扰；⑤土鳖虫：供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的暗红斑点；⑥冰片：供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的红色斑点,阴性对照无干扰。2.重金属考察结果：供试样品纳氏比色管所显颜色较标准铅纳氏比色管颜色浅,判定样品中重金属的含量<10ppm。3.砷盐考察结果：生成的供试样品砷斑与标准砷斑颜色相比较,颜色明显较浅。判定样品中砷盐的含量限度<1ppm。超声电导经皮透入微米活血镇痛散的镇痛机理和应用基础研究1.微米叁七粉的电镜扫描结果：根据高能球磨制备微米叁七粉的方法,每半小时取粉观察颜色和气味,发现在球磨前粉体保持新鲜颜色,叁七粉气味浓厚。球磨8h后粉末逐渐变黑,气味变淡,可能是球磨时间过长,导致叁七粉碳化所致。故取8h为最佳球磨时间。球磨8h后叁七粉由大颗粒形貌转化成层片状,片层厚度不大于1.5μm,大颗粒粒径在13μm左右,达到微米要求。2.对兔急性软组织损伤肿胀的影响结果：造模后伤处软组织即出现肿胀、皮肤瘀斑及皮下出血,伤后24小时最明显,随后肿胀逐渐减轻,四组间肿胀面积变化值差异有统计学意义(F=48.250,P=0.000)。超声电导经皮透入微米活血镇痛散组、敷帖微米活血镇痛散组及超声电导物理治疗组于第2、3、4d肿胀面积减轻程度均优于急性软组织损伤组,差异均有统计学意义(P<0.01),且超声电导经皮透入微米活血镇痛散改善并减轻肿胀程度最明显。3.对兔急性软组织后外周血白细胞数变化的影响结果：中性粒细胞数量增加提示炎性反应存在,与造模前模型组比较,造模后四组外周血液白细胞数目均明显升高(F=505.605,P=0.000),表明急性软组织损伤造成炎性反应。四组间差异有统计学意义(F=172.452,P=0.000)。与急性软组织损伤组比较,超声电导经皮透入微米活血镇痛散、敷帖微米活血镇痛散均能明显减少损伤局部白细胞数(P<0.01),且超声电导经皮透入微米活血镇痛散改善最明显。4.兔组织病理评分及病理切片镜检结果：治疗4d后根据病理组织学观察评分,统计方差分析结果示：整体而言组间均数有显着差异(F=14.182,P=0.000),与急性软组织损伤组比较,超声电导经皮透入微米活血镇痛散、敷帖微米活血镇痛散均能明显减轻炎症反应(P<0.01),促进损伤局部胶原纤维合成,肌纤维组织修复。且超声电导经皮透入微米活血镇痛散改善最明显。第四日4组镜下组织学改变图示：①第1组：各兔打击肌肉处可见大量肌细胞断裂.广泛出血。局部可见大片炎性渗出及坏死,界限不清,外周见丰富的肉芽组织,主要由炎症细胞、纤维母细胞及毛细血管构成,断裂的肌细胞周围见增生的多核的肌母细胞,并伴有大量急、慢性炎细胞浸润。②第2组：炎性渗出及坏死已完全消失,肉芽组织也减少,代之以大片的胶原纤维,断裂处基本修复,修复处肌细胞排列稍紊乱。③第3组：见打击处肌肉已基本修复,肌细胞排列较整齐,局部见束状的胶原纤维,肌细胞间见少量炎细胞浸润。④第4组：未见渗出及坏死,肉芽组织面积较模型组明显减小,肌细胞增生。⑤第5组(正常兔肌肉组织)：各兔肌肉组织形态较一致,肌细胞呈束状平行紧密排列,细胞呈长梭形,胞浆丰富,核呈短棒状。5.微米中药凝胶贴片的皮肤急性毒性实验结果：：从去除受试物1h开始观察,直至第7d,实验动物活动自如,觅食正常,涂药处皮肤毛发光泽正常,眼与黏膜无变化,呼吸无异常,未见中枢神经系统异常表现,未见兔全身中毒反应,未发生动物死亡,表明微米活血镇痛散低、高剂量外用时未出现任何急性毒性反应。6.微米中药凝胶贴片的皮肤刺激性实验结果：活血镇痛散纳米凝胶贴一次给药,新西兰大白兔完整皮肤组及破损皮肤组均未见红斑、水肿,亦无其它异常情况,刺激指数均小于0.4。说明微米中药凝胶贴片一次给药对兔完整皮肤及破损皮肤均无明显刺激性。破损皮肤虽有小块血痂形成,4天内先后脱落,贴药区与对照区无明显差异,乃是划伤所致,并非药物引起。[结论]活血镇痛散的最佳提取工艺是：药材加乙醇回流提取3次,第1次加6倍量体积分数65%乙醇提取2h,第2次加5倍量体积分数65%醇提取1.5h,第3次加5倍量体积分数65%醇提取1.5h。TLC可检出骨碎补、叁七、红花、半枝莲、土鳖虫及冰片特征性的斑点。复方中药的砷盐含量限度≤1ppm、重金属含量限度≤10ppm,达到了重金属及砷盐限量标准。超声电导经皮透入微米活血镇痛散治疗兔急性软组织损伤具有较好的消肿抗炎,减轻炎症反应,促进炎性渗出物吸收及损伤处软组织修复作用。作用明显优于超声电导物理治疗及微米活血镇痛散外敷,且对皮肤安全无刺激,属安全新型中药凝胶贴片。(本文来源于《南方医科大学》期刊2011-05-01）
曾庆[3]（2010）在《微米中药功能衬材对家兔骨折愈合的影响》一文中研究指出[背景]骨折是临床上的常见病多发病,骨折愈合是一个极其复杂的骨组织再生修复过程,受到全身和局部许多因素的影响和调节。约5%～10%的骨折由于各种原因发生延迟愈合或不愈合,严重影响人们的生存质量。如何加速骨折愈合,提高愈合质量一直是医学界共同关注的重大课题之一中药外治法是指运用非口服药物刺激经络、穴位、皮肤、粘膜、肌肉、筋骨等以达到防病治病目的的一种传统医学疗法。中药外治法治疗骨折,历史悠久,疗效显着。目前已被研究证实的作用机制主要有如下几方面：改善血液循环；促进血肿的吸收和机化；增加胶原的合成；促进钙盐沉积；增加细胞数量、促进细胞活性；调节内分泌系统；促进骨痂生成,提高骨痂质量；干预骨形成调节因子的作用；提高微量元素的含量等。伴随着科技的发展,皮肤给药已成为第叁大给药途径,中医在这个领域可谓独具特色,中药外治的优势在于：药物的作用力直接、集中,能直达病所,使其病变局部内的药物浓度显着高于血药浓度,故发挥作用充分,奏效迅捷。且所用药量和副反应远小于内服药。将传统中医外治与现代透皮技术结合,形成中药透皮治疗系统必将是今后中药外治研究的发展趋势。目前中药外治骨折的剂型主要有中药加工制成的膏剂、酊剂和现代气压罐装的喷雾剂等,文献已有报道,但均各自有其不足和局限性。如何选用有效的方药和采用科学合理的剂型治疗骨折,是中医药现代化发展的趋势。本课题运用目前中药现代化最前沿的创新成果——微纳米中药技术,将中药验方微米化并与纺织工业重整技术结合,制作成一种新型医用材料——微米中药功能衬材。目的是把复位、固定和局部用药有机地结合起来,除了作为石膏绷带或小夹板固定时的内层衬垫使用外,还具有消炎镇痛,减轻创伤反应,加快组织的修复,加速骨折愈合及功能恢复的作用。微米中药是指采用现代高科技与传统炮制技术和制剂技术相结合而研制的能保持传统中药固有药效学物质基础的粒度为微米级(平均直径≤15μm)的新型中药。它是中药微米化后的产物,不是一种新的药种。微米中药可大幅度提高药物的活性和生物利用度,降低用药量,减少毒副作用,与中药现代化的核心“安全、有效、可控、稳定”息息相关。利用超微粉碎技术制备的中药微米颗粒,既能保持中药的有效成分不被破坏,同时由于制得的颗粒比表面积增大,能有效增进药物有效成分的溶出,提高药物的生物利用度；其次它可以提高药物的靶向性,有助于控制药物在体内的分布等；本研究产品——微米中药功能衬材,既便于给药剂量的标准化、规范化,同时又便于制剂生产工艺、质量控制的标准化、规范化。这种新型的医用功能复合材料可作为石膏绷带或小夹板固定时的内层衬材使用,使骨折在外固定的基础上,与局部用药有机结合,将有效地促进骨折愈合及功能的恢复。本实验将从血清生化指标、血液流变学指标、X线及组织形态学四个方面探讨微米中药功能衬材对家兔骨折愈合的影响。[目的]研究微米中药功能衬材对家兔骨折愈合的影响,为其临床应用和成果转化提供依据。[方法]1.实验分组和模型制作：24只普通级雄性新西兰兔随机分为4组：微米组、中药对照组、衬材对照组和模型对照组,每组6只。参照柴本甫造模方法,将全部家兔造成右侧桡骨中段骨缺损骨折模型。2.衬材制作：利用高能球磨法制备微米叁七粉,加入冰片等其它药物,结合纺织工业的重整技术制作出微米中药功能衬材。3.处理方式：所有家兔均造模成功,微米组给予外敷微米中药功能衬材后加石膏外固定,中药对照组给予外敷普通中药功能衬材后加石膏外固定,衬材对照组给予外敷普通衬材(无中药)后加石膏外固定,模型对照组不予任何治疗。每周换1次衬材,连续观察6周。4.指标检测方式：叁七粉微米化前后在扫描电镜下行粒径对比；于造模前和造模后第2,4,6周行血清碱性磷酸酶活性,血钙、血磷浓度及血液流变学指标(全血高切、中切、低切粘度及血浆粘度)的检测；造模后第2,4,6周各组X射线下观察骨折愈合情况,并行外骨痂和骨痂线模糊程度评分；造模后第6周末将所有家兔处死,以骨折断端为中心0.5cm为取样部位,行脱钙固定、脱水及石蜡包埋后,连续切片,行苏木精-伊红染色(HE染色),光学显微镜下观察骨折区修复情况。[统计学方法]实验数据计量资料以均数±标准差((?)±s)表示。采用SPSS13.0软件进行统计分析。多组间计量资料比较使用单因素方差分析(one-way ANOVA方法),组内不同时间点的血清碱性磷酸酶活性、血钙、血磷浓度、血液流变学指标(全血高切、中切、低切粘度及血浆粘度)及外骨痂和骨痂线模糊程度评分比较采用重复测量的方差分析。检验标准α定为0.05。[结果]1.血清生化指标检测：结果显示组间家兔的血清碱性磷酸酶活性、血钙含量、血磷含量在骨折愈合过程的不同时间点中均存在显着差异(F值分别为3.147,3.427和6.452,P值分别为0.048,0.037和0.003),造模后第2周微米组血清碱性磷酸酶活性值达到高峰,和模型对照组、中药对照组比较均存在显着差异(P值分别为0.001,0.000)；微米组血钙含量和模型对照组、中药对照组比较均存在显着差异(P值分别为0.001,0.002)；4组动物血磷值均有所降低,微米组血磷含量和模型对照组比较存在显着差异(P=0.042)。造模后第4周各组血钙含量开始下降,其中微米组下降较多,和模型对照组、中药对照组比较均存在显着差异(P值均为0.000)；血磷值开始升高,其中微米组尤为明显,微米组和模型对照组、中药对照组比较均存在显着差异(P值分别为0.002,0.048)。造模后第6周微米组血清碱性磷酸酶活性及血钙含量均降至正常值附近,微米组血清碱性磷酸酶活性及血钙含量和模型对照组、中药对照组比较均存在显着差异(P<0.05)；4组动物血磷均持续在较高水平,微米组和模型对照组、中药对照组比较存在显着差异(P值分别为0.000,0.014)。同一时间点衬材对照组所有血清生化指标和模型对照组比较均无显着差异(P>0.05)。2.血液流变学指标检测：微米组几乎所有指标均低于对照组,第2周时微米组全血低切粘度、全血高切粘度及血浆粘度和模型对照组相比存在显着差异(P值分别为0.000,0.017,0.000)；第4周时微米组四个指标和模型对照组相比存在显着差异(P=0.000),微米组全血低切粘度、血浆粘度与中药对照组比较存在显着差异(P值分别为0.000,0.001)；第6周时微米组四个指标和模型对照组相比存在显着差异(P=0.000),微米组全血低切粘度、血浆粘度与中药对照组比较存在显着差异(P值分别为0.001,0.036)。3.X射线检查及外骨痂和骨折线模糊程度评分：造模后第6周显示微米组外骨痂接近完全吸收,骨折处皮质骨密度接近正常皮质骨,骨髓腔完全再通；中药对照组骨折线消失,外骨痂开始吸收,骨髓腔仍未通；模型对照组中有出现断端硬化不愈合现象。外骨痂和骨折线模糊程度评分结果显示造模后第2周时衬材对照组和模型对照组比较无显着差异(P=0.819),微米组和模型对照组比较存在显着差异(P=0.001)；造模后第4周时衬材对照组和模型对照组比较无显着差异(P=0.778),微米组和模型对照组比较存在显着差异(P=0.000),微米组与中药对照组比较存在显着差异(P=0.010)；造模后第6周时衬材对照组和模型对照组比较无显着差异(P=0.293),微米组和模型对照组、中药对照组比较均存在显着差异(P值分别为0.000,0.027)。4.组织形态学：造模后第6周时,微米组骨折端小梁间血管扩张,数目较多,软骨内成骨完成,可见大量成骨细胞,编织骨开始塑形,骨髓腔再通；中药对照组可见编织骨、软骨细胞和软骨内成骨共存,断端内、外骨痂相连,骨髓腔未再通；而同期衬材对照组和模型对照组骨小梁较细,小梁间血管较少,断端内、外骨痂大多尚未相连,骨髓腔未再通。[结论]微米中药功能衬材能改善组织微循环,增加碱性磷酸酶的活性,降低血钙水平,升高血磷和钙磷乘积,加速成骨细胞增生,促进骨痂形成,具有促进骨折愈合的作用且强于普通中药功能衬材。(本文来源于《南方医科大学》期刊2010-04-21）
曾庆,黄国志,梁东辉,邓虹珠,易延逵[4]（2010）在《微米中药功能衬材对家兔骨折愈合的影响》一文中研究指出背景:传统中药治疗骨折的外用制剂多为普通硬膏、软膏、油膏等,缺少现代化的中药透皮给药系统,药物吸收较差,工艺简单,需多次重复使用,影响骨折的外固定,达不到理想的治疗效果。课题组运用先进的微纳米技术,结合传统的中药外治法,研制出一种新型医用复合功能性材料——微米中药功能衬材,将复位、固定和局部用药有机地结合,为临床治疗骨折提供更好的治疗手段。目的:探讨微米中药功能衬材对家兔骨折愈合的影响。方法:将新西兰兔造成右侧桡骨骨折模型后随机分为微米组、中药对照组、衬材对照组和模型对照组。微米组外敷微米中药功能衬材后加石膏外固定;中药对照组外敷普通中药功能衬材后加石膏外固定;衬材对照组外敷普通衬材后加石膏外固定;模型对照组不予任何治疗。于造模后第2,4,6周,行X射线检查;于造模前和造模后第2,4,6周行血清碱性磷酸酶活性,血钙、血磷浓度检测。结果与结论:①X射线检查:造模后第6周显示微米组外骨痂接近完全吸收,骨折处皮质骨密度接近正常皮质骨,骨髓腔完全再通;中药对照组骨折线消失,外骨痂开始吸收,骨髓腔仍未通;模型对照组中有出现断端硬化不愈合现象。②血清生化检查:微米组于造模后第2周出现碱性磷酸酶活性高峰,其高峰较中药对照组提前2周出现,且高峰值高于其他对照组;微米组于造模后第4周血钙值开始显着下降,血磷值开始显着升高,与其各组比较差异有显着性意义;至造模后第6周时,微米组血钙值已降至正常值,而其他各组均高于正常值,血磷值升高明显,与其余各组比较差异有显着性意义。结果说明微米中药功能衬材能促进骨痂形成,增加碱性磷酸酶的活性,降低血钙水平,升高血磷和钙磷乘积,具有促进骨折愈合的作用且强于普通中药功能衬材。(本文来源于《中国组织工程研究与临床康复》期刊2010年08期）
杨瑛,杨永华,蔡光先[5]（2008）在《微米中药粒度及其检测方法评述》一文中研究指出本文综述了近年来微米中药颗粒研究的粒度范围,测试的方法和技术,比较了这些方法的优缺点,并讨论了它们在测量时存在的问题和局限性。对于微米中药粒度的测试方法的建立提出了建议。(本文来源于《中华中医药学会中药分析分会第叁届学术交流会论文集》期刊2008-11-01）
张勤[6]（2007）在《传统中药饮片与微米中药的药效学比较》一文中研究指出传统中药饮片是指采用传统炮制工艺将药材制成一定规格的片、丝、块、段等直接供中医临床调配处方用的中药. 微米中药是指采用现代高科技与传统炮制技术和制剂技术相结合而研制的,能保持中药固有药效学物质基础的,粒度为微米级的新型中药。目前,常用于微米中药制备的方法是超微粉碎法。大多中药原药材为植物类药材,通过超微粉碎技术将原药材的中心粒径达到1～75μm,从而(本文来源于《浙江省中西医结合学会普通外科专业委员会第九次学术年会暨省级继续教育学习班资料汇编》期刊2007-09-01）
吕冬霞,赵冰海,张春斌,王秀岩,刘月霞[7]（2007）在《微米中药胰腺康诱导人胰腺癌SW1990细胞凋亡的研究》一文中研究指出目的:观察不同浓度的微米中药胰腺康对胰腺癌SW1990细胞作用的影响。方法:将微米中药胰腺康以不同浓度和时间作用于胰腺癌SW1990细胞,采用MTT比色法观察细胞毒性;应用HE染色法观察凋亡细胞的形态;采用免疫组化方法检测caspase-3蛋白的表达。结果:微米中药胰腺康以剂量依赖和时间依赖的方式抑制SW1990细胞的生长。HE染色观察到凋亡细胞的形态学改变。caspase-3蛋白高表达。结论:微米中药胰腺康与其提取液相比,能更有效地抑制SW1990细胞增殖,其抗瘤作用与诱导细胞凋亡有关。为临床治疗胰腺癌提供理论依据。(本文来源于《黑龙江医药科学》期刊2007年02期）
赵燕丽,鲁彦,吕冬霞,张金波,汤静晗[8]（2007）在《微米中药胰腺康合剂对H22荷瘤小鼠存活时间的影响》一文中研究指出目的探讨微米中药胰腺康合剂的抑瘤作用和可能机制。方法将H22肿瘤细胞接种到昆明种小鼠的腹腔,建立H22小鼠腹水瘤模型,并对小鼠H22腹水瘤模型进行微米中药及其提取液的处理。结果小鼠体内实验显示微米中药可明显减少腹水的产生,延长小鼠的存活时间。生命延长率为43.75%。结论微米中药胰腺康与其提取液相比,能更有效地抑制肿瘤细胞增殖,诱导肿瘤细胞凋亡,延长H22肿瘤小鼠的存活时间。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2007年07期）
吕冬霞,魏凤香,王培军,罗佳滨,张春斌[9]（2007）在《微米中药胰腺康对H_(22)肿瘤小鼠抑瘤作用的实验研究》一文中研究指出目的探讨微米中药胰腺康对H22小鼠的抑瘤作用及其对p53和caspase-3表达的影响。方法将H22肿瘤细胞接种到小鼠皮下,建立小鼠H22实体瘤模型,并对小鼠H22实体瘤模型进行微米中药及其提取液的处理,采用免疫组化方法检测实体瘤组织中p53和caspase-3蛋白的表达。结果小鼠体内实验显示微米中药可明显抑制肿瘤生长。p53蛋白表达率为31.73%,caspase-3蛋白表达率为41.16%,肿瘤抑制率为50.00%。结论胰腺康对H22肿瘤具有明显抑制作用,微米中药胰腺康与其提取液相比,能更有效地抑制肿瘤增殖,其抗瘤作用与诱导细胞凋亡有关。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2007年02期）
刘廷玉,蒋桂娥,张铁,王春光[10]（2006）在《微米中药的特点及其制备技术》一文中研究指出微米中药是采用现代高科技与传统炮制技术相结合而研制出的,能保持中药固有药效学物质基础的,粒度为微米级的新型中药。包括微米中药材、微米中药提取物和微米中药制剂,平均粒径一般小于10μm(传统中药打粉在100μm以上)。在此细度下,90%以上的植物细胞被打破(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2006年06期）
微米中药论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
[背景]疼痛的机理至今未能解释清楚,但疼痛却常常是病人到医院就诊的主要原因。疼痛通常可分为两类：一类是疾病的信号,即疼痛只是疾病的一种症状,如感冒发烧的头疼脑热等。只需把疾病治愈,作为疾病信号的疼痛就会消失。另一类疼痛本身就是疾病。如叁叉神经痛、带状疱疹后神经痛、癌症疼痛(癌症晚期已经治疗无效,但是还有半年到一年的生存期,但疼痛往往使病人可能只存活两叁个月)、患肢痛、顽固性腰腿痛等。总的说来,疼痛到难以控制,威胁到病人生命的时候,疼痛就从疾病的症状转变为疾病,需要针对疼痛进行镇痛治疗。疼痛医学在发达国家已受到极大的关注和重视,2000年,世界卫生组织给“疼痛”正式下了定义：慢性疼痛是一类疾病。并且,把疼痛列为继呼吸、脉搏、体温和血压之后的人类第5大生命指征。而我国目前慢性疼痛的治疗还处于起步阶段。存在治疗疼痛的手段单一,药物治疗为主导,包括各种麻醉、镇痛药物的口服和注射、麻醉药物神经阻滞(Nerven-blockade)疗法等。但存在着口服药物胃肠道反应大,不宜长期应用,麻醉剂成瘾性和神经阻滞专业技术要求高,难以普遍推广应用等问题。如何快速、安全、稳定、有效、可控性镇痛,提高镇痛质量一直是医学界共同关注的重大课题之一。随着传统中药的研究与现代药理研究的不断深入,发现许多中草药具有明显的镇痛效果,对多种疼痛的镇痛疗效确切。而且没有明显的成瘾性、耐受性等毒副作用。是当今镇痛药研究的热点。尤其是近年来我国利用超微粉碎技术制备的比较成熟的微米中药镇痛剂,微米中药是指微米级(平均直径≤15μm)中药有效成分、有效部位、原药及其复方制剂。它是中药微米化后的产物,不是一种新的药种。既能有效保留中药得有效成分不被破坏,同时由于制得的颗粒比表面积增大,能有效增进药物有效成分的溶出,提高药物的生物利用度；其次它可以提高药物的靶向性,有助于控制药物在体内的分布等；其在体内的传输更方便,不仅可以缓释药物,延长药物的作用时间,并能达到靶向输送的目的,从而显着提高了中药的疗效,降低其毒副作用,提高药物稳定性,这与中药现代化的核心”安全、有效、可控、稳定”息息相关。经皮给药是目前国际医药界热门的研究领域,强力渗透(物理经皮定位透药)是发展最快的技术分支。特别是几种物理方法之间及物理方法及其它促渗方法之间作用的迭加与协同深受业内人士的关注。近来研究较多的方法有：激光微孔技术(laser microdissection LMD)、电致孔技术(electropration)、超声透皮技术(sonophoresis)和现代离子导入技术(iontophoresis)等。超声电导靶向给药治疗技术是近年来美国等西方国家兴起的新的药物治疗技术。它通过综合采用激光微孔、电致孔、超声空化和离子导入技术四种应用于现代生物工程的高技术手段,使药物透过皮肤进入体内病变组织和器官,直接发挥药物治疗作用。首先在一定范围和深度内使皮肤和组织对药物的通透性大大增加,形成药物进入靶器管的人工生物通道。然后在特定的动能驱动下,使药物粒子沿生物通道透过皮肤、组织和包膜,定向、定量、定速的进入病变组织和器官,最终在靶组织内形成药物高浓度浸润区,直接发挥药物治疗作用,达到靶向治疗的目的。被医学界称为第叁代给药方法。其作用优势：1、透药速度快,比自然渗透高上百倍；2、可实现定时、定量及定速给药,在病变局部形成药物高浓区,并可促进药物向细胞内的转运,增加药物的作用,从而提高疗效；3、大大提高药物的生物利用度,减少用药总量,避免毒副作用；4、药效稳定持久,比口服药长2—3倍；5、适应范围大,除化学药物外,还能透过大分子身生物制剂和中药胶体颗粒成份；6、无痛、无创、简捷、方便。目前美国等发达国家已成功地将这一方法用于抗生素、激素、抗癌药、镇痛药等九大类300余种药剂,特别是一些高活性、高毒性、高风险而又需要局部高高浓度的药物,用此方法发挥了独特的治疗效果。国内亦有应用该疗法治疗局灶性感染性疾病、前列腺疾病、骨关节疼痛等疾病的临床报道。近年来国内外研究较多的是局部镇痛药物(如麻醉、镇痛和非甾体类抗炎等药物)经皮透入治疗各种局灶性疼痛。大量的实验(包括离体实验、动物实验和人体实验)及临床应用取得了可喜的成果。但西药镇痛药的成瘾性、耐受性等毒副作用依然制约着临床的广泛应用。国内北京诺亚同舟医疗技术有限公司应用超声电导仪,参照美国产品技术改造而成既可适用于化学药物和生物药物、又适合中药制剂的耦合凝胶贴片,其产品已应用于临床。但其贴片需另外加入各种药物,每片加入药量仅0.5ml,人为影响因素大,存在药量和局部有效浓度不易控制,可能影响疗效,同时存在使用不方便等不足。本研究运用目前中药现代化最前沿的创新成果-微米中药技术,将经现代药理研究证实的中药镇痛药微米化后,研制出含有微米中药的凝胶药物贮库贴片,该凝胶贴片具备骨架型经皮给药系统的特点,贮库的微米中药在超声电导仪的作用下,直接释放药物到皮肤并扩散到病变组织,并保持稳态的血药浓度,从而达到快速镇痛的目的。国际医药界认定,这一方法将成为新世纪的主导药物治疗方法。活血镇痛散为我院中医科梁教授祖传用于治疗急性软组织损伤的外治经验方,由骨碎补、叁七、红花等多味中药组成,具有活血化瘀、消肿止痛、舒筋活络、疗伤接骨等作用,主要用于治疗扭挫伤痛、风湿痹痛、冻疮红肿、软组织损伤及骨折等。本研究产品——微米中药耦合凝胶贴片,先将中药验方”活血镇痛散”微米化,并经药理实验证实其疗效,然后参照美国相关技术研究制作出超声电导微米中药凝胶贴片,该贴片采用改良性纤维网织材料内充水化凝胶基质为微米中药贮库,既有很好的承载能力和控释能力,同时具有超声耦合和导电等作用,能满足超声电导透皮治疗的需要,同时便于给药剂量的标准化、规范化,以及制剂生产工艺、质量控制的标准化和规范化。本研究包括叁大项内容,分别为：正交设计进行活血镇痛散的醇提工艺研究、活血镇痛散的质量标准研究、超声电导经皮透入微米活血镇痛散的镇痛机理和应用基础研究。正交设计进行活血镇痛散的醇提工艺研究：采用传统水提法提取的活血镇痛散药效不明显,推测可能为有效成分提取不充分所致。方中君药骨碎补主要活性是以柚皮苷为代表的二氢类黄酮化合物,易溶于乙醇、丙酮等有机溶剂,臣药叁七主要有效成分是叁七皂苷和人参皂苷类(Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Re)等,易溶于甲醇、乙醇等有机溶剂。本实验以处方的醇浸膏得率和君药骨碎补有效成分柚皮苷含量为考察指标,采用L。(34)正交实验法对活血镇痛散醇提取工艺进行优化筛选。活血镇痛散的质量标准研究：为更好的控制药品的内在质量,确保临床用药的安全有效性,进行了活血镇痛散的质量标准研究。本实验采用薄层色谱法对活血镇痛散中的骨碎补、叁七、红花、土鳖虫、半枝莲、冰片进行定性鉴别研究,并对复方中重金属和砷盐的含量限度进行了实验考察,以供制定质量标准参考。超声电导经皮透入微米活血镇痛散的镇痛机理和应用基础研究：是超声电导经皮透药新技术和微米中药新剂型相结合的实验和应用基础研究,旨在观察超声电导经皮透入微米活血镇痛散、超声电导物理治疗及微米活血镇痛散外敷作用于兔软组织损伤模型,以叁七粉的微米程度,软组织挫伤处肿胀面积、外周血液白细胞数变化、光镜下组织学观察为考察指标。观察其治疗效果,同时考察超声电导透皮给药方法的作用条件和影响因素,探讨其作用机制并考察用药安全性。[目的]首先优化筛选出活血镇痛散的最佳醇提取工艺,观察醇提浓度、加醇量、提取时间时间、提取次数等因素对活血镇痛散醇提取工艺的影响,其次更好的建立活血镇痛散的质量控制标准,补充中药质量标准参考,最终观察超声电导经皮透入微米活血镇痛散对兔急性软组织损伤模型的影响,为其临床应用和成果转化提供依据,申请专利。[方法]正交设计进行活血镇痛散的醇提工艺1.实验考察因素及水平：对乙醇体积分数(A)、加醇量(B)、提取时间(C)3个因素进行考察。同时每个因素中选出常规的3个水平,即乙醇体积分数：85%、65%、50%；加相应体积分数乙醇量(倍)：7、6、6,6、5、5,5、4、4；提取时间(h)：2.5、2.0、2.0,2.0、1.5、1.5,1.5、1.0、1.0。2.处理方式：采用L9(34)正交实验法对活血镇痛散醇提取工艺进行优化筛选。3.观察指标：醇浸膏得率、吸醇率和HPLC法测定的柚皮苷含量活血镇痛散的质量标准控制研究1.定性鉴别方法：采用薄层色谱(TLC)法对活血镇痛散中骨碎补、叁七、红花、半枝莲、土鳖虫、冰片进行定性鉴别；2.重金属和砷盐考察方法：重金属采用纳氏比色法,砷盐采用古蔡氏法测定限量：3.观察指标：定性鉴别中,观察在供试品色谱中,在与对照药材及对照品色谱相应位置上是否显相同的斑点,阴性对照是否无干扰。重金属考察中,以样品纳氏比色管与标准铅纳氏比色管相比较所显颜色的深浅,判定样品中重金属的含量限度。砷盐考察中,将生成的样品砷斑与标准砷斑相比较,判定样品中砷盐的含量限度。超声电导经皮透入微米活血镇痛散的镇痛机理和应用基础研究1.急性软组织损伤模型的建立及实验分组：取新西兰大白兔,选择兔后肢大腿外侧,距窝4～7cm处,用自制打击棒自由落体击打兔大腿外侧部,并证实无骨折后表示模型建立成功。取造模成功兔24只,随机分4组,每组6只。即：模型对照(1组)、超声电导经皮透入空白凝胶贴片(2组)、超声电导经皮透入微米活血镇痛散(3组)及微米活血镇痛散外敷(4组)2.微米活血镇痛散凝胶贴片的制备过程为：①将活血镇痛散所用药物粉碎过筛。②醇提活血镇痛散药方中有效成分,并制得干膏粉。③采用惰性气氛保护的高能球磨装置系统制备微米叁七粉。④在干膏粉中加入冰片和微米叁七粉末,混合均匀,加入空白凝胶贴片中(内充水化凝胶基质、促渗剂、PVA等)制成复方中药凝胶贴片,使中药药膏成分均匀地混吸改良性纤维网织材料内充水化凝胶基质中,即为微米活血镇痛散的凝胶贴片。3.实验治疗方法：各组动物(除1组外)于造模后2h后开始用药治疗,具体如下：第2、3组将凝胶贴片贴与治疗头,将治疗头固定在损伤的软组织处。并用约束带固定治疗部位,治疗强度及参数选择：致孔2、超声2、中频1、时间15min,治疗结束后去除治疗头保留贴片2h,2次/日,连续4d。第4组按给药剂量外敷于患处2次/日,并固定保留药物2h,连续4d。4.皮肤用药急性毒性试验及皮肤刺激性试验方法：皮肤用药急性毒性试验：取兔15只随机分五组,即：一组对照组3只(涂生理盐水1mL),四组试验组12只(完整皮肤组及破损皮肤组,各2个剂量)。低剂量组以临床用制剂量,高剂量组为低剂量组2-3倍。分别将药物均匀地混吸于改良性纤维网织材料内充水化凝胶基质的空白凝胶贴片中。皮肤刺激性试验：取兔6只随机均分为完整皮肤组3只及破损皮肤组3只。分别在脱毛后第2天,把微米凝胶贴片贴于脱毛区一侧,并用无刺激性纱布加以固定。每只动物单笼饲养。涂药24h后,揭开纱布并用温水洗涤去除残留受试药物。5.指标检测方式：叁七粉微米化前后在扫描电镜下行粒径对比；测量并计算四组每日肿胀面积变化情况,连续测4d；抽血测量造模前,造模后第2、3、4日兔耳缘静脉白细胞数值变化；4d后取动物同一打击部位、大小相等的组织块石蜡包埋切片,HE染色,光镜下病理组织学观察并评分；观察去除受试物1,24,48,72h至第7d,每日观察并记录动物体重、皮肤毛发、眼和粘膜的变化、呼吸、中枢神经系统、四肢活动等其他中毒表现。肉眼观察记录去除受试物1,24,48,72h涂抹部位局部有无红斑和水肿等反应。并按皮肤皮肤刺激性反应评分标准评分,记录各时日的评分值。[统计学方法]实验数据计量资料均以均数±标准差(x±s)表示。采用SPSS13.0软件进行统计分析。两个独立样本的总体均数比较采用独立样本t检验,L9(34)正交实验设计采用正交设计资料的方差分析,多组间计量资料比较使用单因素方差分析(one-way ANOVA),不同时间点的软组织挫伤处肿胀面积变化及外周血液白细胞数比较采用重复测量的方差分析。检验标准α定为0.05。[结果]正交设计进行活血镇痛散的醇提工艺1.方法学考察结果标准曲线方程为：Y=72.008X+18.041,r=0.9994(n=6)。结果表明,柚皮苷在0.135-1.620 mg/L范围内具有良好的线性关系；精密度试验测得RSD值为0.86%；重现性试验测得RSD值为1.46%；稳定性试验测得RSD值为1.04%,表明供试品溶液在24h内基本稳定；加样回收率试验结果：回收率102.46%,RSD值为2.31。2.吸醇率考察结果：吸醇率平均值为265.67mL/g, RSD为1.48%表明提取时第1次醇提取时应加相应体积分数乙醇量3倍量以上。3.渗漉法与回流提取法比较结果：回流提取的柚皮苷提取量平均值为238.23±7.00mg/g,RSD为5.86%；渗漉的柚皮苷提取量平均值为238.18±5.86mg/g, RSD为7.00%。两组均数经两独立样本t检验差异具有统计学意义(t=-8.039,P=0.000),可认为渗漉法与回流提取法柚皮苷提取量差异具有显着性意义,参考两法均值,结果表明醇提以回流法为好。4.醇提次数的选择试验结果：第3次醇提的醇浸膏得率及柚皮苷提取量所占比率均大于10%,应进行3次醇提方可完全提取药物成分。5.正交设计实验结果：乙醇体积分数(因素A)各水平均值分别为A1=87.197,A2=91.789,A3=81.367；加醇量(因素B)各水平均值分别为B1=90.607,B2=91.828,B3=77.917；提取时间(因素C)各水平均值分别为C1=86.282,C2=87.241,C3=86.829。方差分析结果乙醇体积分数、加醇量两因素影响具有显着性意义(FA=19.738、PA=0.048,FB=19.738、PB=0.023),提取时间因素影响不具有显着意义(Fc=0.167、Pc=0.857)。结合各因素各水平均值认为A2B2C2为好；选择A2B2C2组合为优选工艺,即药材加乙醇回流提取3次,第1次加6倍量体积分数65%乙醇提取2h,第2次加5倍量体积分数65%醇提取1.5h,第3次加5倍量体积分数65%醇提取1.5h。活血镇痛散的质量标准控制研究1.采用薄层色谱(TLC)法对复方药材定性鉴别结果：①骨碎补：供试品色谱中,在与对照药材及对照品色谱相应位置上显相同的黄色荧光斑点,阴性对照无干扰；②叁七：供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,分别显相同颜色的荧光斑点。阴性对照无干扰；③红花：供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,日光下显相同颜色的浅红色斑点；④半枝莲：供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。阴性对照无干扰；⑤土鳖虫：供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的暗红斑点；⑥冰片：供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的红色斑点,阴性对照无干扰。2.重金属考察结果：供试样品纳氏比色管所显颜色较标准铅纳氏比色管颜色浅,判定样品中重金属的含量<10ppm。3.砷盐考察结果：生成的供试样品砷斑与标准砷斑颜色相比较,颜色明显较浅。判定样品中砷盐的含量限度<1ppm。超声电导经皮透入微米活血镇痛散的镇痛机理和应用基础研究1.微米叁七粉的电镜扫描结果：根据高能球磨制备微米叁七粉的方法,每半小时取粉观察颜色和气味,发现在球磨前粉体保持新鲜颜色,叁七粉气味浓厚。球磨8h后粉末逐渐变黑,气味变淡,可能是球磨时间过长,导致叁七粉碳化所致。故取8h为最佳球磨时间。球磨8h后叁七粉由大颗粒形貌转化成层片状,片层厚度不大于1.5μm,大颗粒粒径在13μm左右,达到微米要求。2.对兔急性软组织损伤肿胀的影响结果：造模后伤处软组织即出现肿胀、皮肤瘀斑及皮下出血,伤后24小时最明显,随后肿胀逐渐减轻,四组间肿胀面积变化值差异有统计学意义(F=48.250,P=0.000)。超声电导经皮透入微米活血镇痛散组、敷帖微米活血镇痛散组及超声电导物理治疗组于第2、3、4d肿胀面积减轻程度均优于急性软组织损伤组,差异均有统计学意义(P<0.01),且超声电导经皮透入微米活血镇痛散改善并减轻肿胀程度最明显。3.对兔急性软组织后外周血白细胞数变化的影响结果：中性粒细胞数量增加提示炎性反应存在,与造模前模型组比较,造模后四组外周血液白细胞数目均明显升高(F=505.605,P=0.000),表明急性软组织损伤造成炎性反应。四组间差异有统计学意义(F=172.452,P=0.000)。与急性软组织损伤组比较,超声电导经皮透入微米活血镇痛散、敷帖微米活血镇痛散均能明显减少损伤局部白细胞数(P<0.01),且超声电导经皮透入微米活血镇痛散改善最明显。4.兔组织病理评分及病理切片镜检结果：治疗4d后根据病理组织学观察评分,统计方差分析结果示：整体而言组间均数有显着差异(F=14.182,P=0.000),与急性软组织损伤组比较,超声电导经皮透入微米活血镇痛散、敷帖微米活血镇痛散均能明显减轻炎症反应(P<0.01),促进损伤局部胶原纤维合成,肌纤维组织修复。且超声电导经皮透入微米活血镇痛散改善最明显。第四日4组镜下组织学改变图示：①第1组：各兔打击肌肉处可见大量肌细胞断裂.广泛出血。局部可见大片炎性渗出及坏死,界限不清,外周见丰富的肉芽组织,主要由炎症细胞、纤维母细胞及毛细血管构成,断裂的肌细胞周围见增生的多核的肌母细胞,并伴有大量急、慢性炎细胞浸润。②第2组：炎性渗出及坏死已完全消失,肉芽组织也减少,代之以大片的胶原纤维,断裂处基本修复,修复处肌细胞排列稍紊乱。③第3组：见打击处肌肉已基本修复,肌细胞排列较整齐,局部见束状的胶原纤维,肌细胞间见少量炎细胞浸润。④第4组：未见渗出及坏死,肉芽组织面积较模型组明显减小,肌细胞增生。⑤第5组(正常兔肌肉组织)：各兔肌肉组织形态较一致,肌细胞呈束状平行紧密排列,细胞呈长梭形,胞浆丰富,核呈短棒状。5.微米中药凝胶贴片的皮肤急性毒性实验结果：：从去除受试物1h开始观察,直至第7d,实验动物活动自如,觅食正常,涂药处皮肤毛发光泽正常,眼与黏膜无变化,呼吸无异常,未见中枢神经系统异常表现,未见兔全身中毒反应,未发生动物死亡,表明微米活血镇痛散低、高剂量外用时未出现任何急性毒性反应。6.微米中药凝胶贴片的皮肤刺激性实验结果：活血镇痛散纳米凝胶贴一次给药,新西兰大白兔完整皮肤组及破损皮肤组均未见红斑、水肿,亦无其它异常情况,刺激指数均小于0.4。说明微米中药凝胶贴片一次给药对兔完整皮肤及破损皮肤均无明显刺激性。破损皮肤虽有小块血痂形成,4天内先后脱落,贴药区与对照区无明显差异,乃是划伤所致,并非药物引起。[结论]活血镇痛散的最佳提取工艺是：药材加乙醇回流提取3次,第1次加6倍量体积分数65%乙醇提取2h,第2次加5倍量体积分数65%醇提取1.5h,第3次加5倍量体积分数65%醇提取1.5h。TLC可检出骨碎补、叁七、红花、半枝莲、土鳖虫及冰片特征性的斑点。复方中药的砷盐含量限度≤1ppm、重金属含量限度≤10ppm,达到了重金属及砷盐限量标准。超声电导经皮透入微米活血镇痛散治疗兔急性软组织损伤具有较好的消肿抗炎,减轻炎症反应,促进炎性渗出物吸收及损伤处软组织修复作用。作用明显优于超声电导物理治疗及微米活血镇痛散外敷,且对皮肤安全无刺激,属安全新型中药凝胶贴片。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
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