王颖[1]2003年在《鸡OBR基因多态性与生长和体脂性状的相关研究》文中进行了进一步梳理家禽育种工作在过去的几十年中取得了令人瞩目的成就,然而,在生产性能大幅度提高以及生产持续快速发展的同时,肉鸡自身生理适应能力等方面也出现了一系列诸如体脂沉积过多等亟待解决的问题,选育低脂优质肉鸡品系是今后世界范围内肉鸡育种的奋斗目标之一。瘦蛋白受体(OBR)属于Ⅰ类细胞因子超家族受体,在瘦蛋白的信号转导中起着关键的作用,与脂肪沉积和体重有密切关系。本研究以OBR基因作为影响鸡生长和体脂性状的候选基因,以中国农大F_2资源家系和东北农大肉鸡高低脂双向选择品系作为实验材料,采用PCR-SSCP、直接测序和PCR-RFLP的方法进行OBR基因SNPs检测和个体基因型分析;针对两个群体的特点建立合适的统计分析模型,进行OBR基因SNPs与生长和体脂性状的相关分析。主要研究结果如下: (1)在鸡OBR基因不同区域共发现4个SNPs,分别是:内含子8区域的T500C和G659A(Accession No.AF222783);外显子20区域的A3291G(Accession No.AF169827);3’UTR区域的G3528A(Accession No.AF169827)。 (2)在F_2资源家系中发现鸡OBR基因内含子8的T500C和G659A突变对出生重有显着影响(P<0.05);在高、低脂系第五世代中发现该突变对肝重有一定影响(P<0.2),AA和AB基因型个体的肝重显着高于BB基因型个体(P<0.05);在高、低脂系第六世代种发现该突变对腹脂重的影响极显着(P<0.01),对肝重有显着影响(P<0.05),BB基因型个体的腹脂重显着高于AB型个体(P<0.05),极显着高于AA型个体(P<0.01),BB和AB基因型个体的肝重显着高于AA基因型个体(P<0.01)。 在F_2资源家系中发现鸡OBR基因外显子9的C1167A突变对2、7周龄体重有一定影响(P<0.2),对肝率有显着影响(P<0.05),对肝重/屠体重比的影响极显着(P<0.01),CD基因型个体的7周龄体重显着高于DD型个体(P<0.05),CC基因型个体的肝率显着低于DD基因型个体(P<0.05),极显着低于CD型个体(P<0.01),CD和DD型个体的肝重/屠体重比极显着高于CC型个体(P<0.01);在高、低脂系第六世代发现该突变对腹脂重、腹脂率有显着影响(P<0.05),CC基因型个体的腹脂重显着高于CD和DD型个体(P<0.05),CC基因型个体的腹脂率极显着高于CD型个体(P<0.01)。 在高、低脂系第五世代中发现鸡OBR基因外显子20的A3291G突变对肝脏重有显着影响(P<0.05),EE基因型个体的肝重显着高于FF型个体(P<0.05);在高、低脂系第六世代发现该突变对肝脏重有显着影响(P<0.05),对腹脂重的影响接近显着水平(P=0.0586)。EF个体的肝重显着高于EE基因型个体(P<0.05),FF型个体的腹脂重显着高于EE基因型个体(P<0.05)。 在F_2资源家系中发现鸡OBR基因3’UTR的G3528A突变对肝重/屠体重比有一定影响(P<0.2),GG基因型个体肝重/屠体重比显着高于GH和HH型个体(P<0.05)。
弓彦[2]2011年在《鹅FAS、OBR、THRSPa和Apo-AI基因多态性及FAS和Apo-B基因在填词鹅中表达模式的研究》文中研究说明FAS、OBR、THRSPa、Apo-AI和Apo-B基因已被证实是重要的脂类代谢候选基因,在脂肪合成代谢与贮存、脂肪沉积、胆固醇运输和调节机体能量平衡等过程中发挥重要作用。为了检测FAS、OBR、THRSPa和Apo-AI基因的突变位点,寻找可以用于鹅分子育种的潜在的分子遗传标记,本研究以朗德鹅、浙东白鹅、江山白鹅、永康灰鹅和莱茵鹅共132只个体为研究对象,通过直接电泳与测序相结合的方法检测这四个基因部分片段的多态性,对于存在多个突变位点的片段,用SAS软件构建单倍型,并与鹅的屠体性状、肌肉脂肪酸成分、粗脂肪含量和体尺性状进行关联分析。另一方面,为了明确强制填饲对FAS和Apo-B基因在朗德鹅各组织中表达的影响,探索基因表达与脂肪沉积的关系,以β-actin作为内参基因,用实时荧光定量PCR法检测对照鹅与填肥鹅13个组织中FAS和Apo-B基因mRNA表达水平,比较两组鹅各组织中基因表达的差异,并分析其与终点体重、腹脂重、腹脂率、肝重及肝脏指数间的相关关系。此外,为了明确上述五个鹅种的肉质特点,为其配套系选育和开发利用提供可靠依据,本试验比较了不同品种肌间脂肪及其17项脂肪酸组成和腹脂沉积情况的差异,并对17项脂肪酸组成指标进行主成分分析和系统聚类分析。主要研究结果如下:1.鹅FAS、OBR、THRSPa和Apo-AI基因多态性与屠体、脂肪酸相对含量、粗脂肪及体尺性状相关性研究本试验中,除了Apo-AI基因所扩增出的片段中没有发现SNPs,其它叁个基因中检测到的SNPs分别为:SNPs-FAS551(C/T)、SNPs-FAS681(C/T)、SNPs-OBR3460(C/T)、SNPs-OBR3575(A/G)和SNPs-THRSPa649(C/T).其中,OBR3575位点A/G突变为错义突变,导致异亮氨酸变为缬氨酸。除了SNPs-FAS681只产生cc和ct两种基因型,其它突变均产生叁种基因型,但是各个位点的基因型分布及频率在不同品种间均表现出各自的特点。在检测到有SNPs存在的群体中,除了SNPs-FAS681位点在ZD群体中的PIC小于0.25,为低度多态,其它位点在各个群体中均属于中度多态。而且,只有江山白鹅在SNP-OBR3460和SNP-OBR3575两个位点上极显着偏离了Hardy-Weinberg平衡,它在其它多态位点以及其它鹅群在各多态位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态。利用FAS中的2个SPNs构建出CC、CT、TC和TT四种单倍型,利用OBR的2个SNPs构建出CA、CG、TA和TG四种单倍型,且根据对连锁不平衡参数的估计,OBR的两个位点处于强连锁不平衡状态。关联分析结果表明:SNPs-FAS551位点的基因型效应对粗脂肪的影响极显着(P<0.01),对全净膛率影响显着(P<0.05),对腹脂率有一定影响(P<0.1);SNPs-681的不同基因型对腹脂率有极显着影响(P<0.01),对豆蔻酸有显着影响P<0.05);二者的单倍型效应对腹脂率有显着影响(P<0.05),对鹅肉的脂肪酸成分、粗脂肪含量及鹅的体尺性状无明显影响。对于OBR基因,SNPs-OBR3460位点的基因型效应对花生酸和二十碳烯酸的相对含量影响显着(P<0.05);SNP-OBR3575的基因型对十七碳烯酸和粗脂肪含量有显着影响(P<0.05);该基因两个突变位点的基因型效应及其单倍型效应对所有屠体性状和体尺性状均无显着影响。而在THRSPa基因,SNPs-THRSPα649的基因型效应对豆蔻酸相对含量影响极显着(P<0.01);对亚油酸、ω6:ω3值和龙骨长影响显着(P<0.05),并对半净膛率、饱和脂肪酸和芥酸的相对含量有一定影响(P<0.1)。2.荧光定量PCR法检测朗德鹅填饲前后FAS和Apo-B基因表达情况FAS与Apo-B基因在朗德鹅13个组织中均有不同程度的表达。经填肥处理,FAS基因在鹅肝脏和脾中的表达量显着增加(P<0.05),在肾脏中的表达水平显着降低(P<0.05),而Apo-B基因在脑和胸肌中的表达水平显着升高(P<0.05),在皮脂、小肠、脾和胰腺中的表达量显着降低(P<0.05)。FAS基因在朗德鹅心脏、肝脏、小肠、皮脂和脾中的相对表达量,以及Apo-B基因在小肠、肺和脾中的表达水平与朗德鹅部分生长参数显着或极显着相关。3.5个鹅种肌肉脂肪酸成分比较及主成分分析结果在五个鹅种中,江山白鹅的饱和脂肪酸相对含量(31.10%)、莱茵鹅的不饱和脂肪酸相对含量(69.46%)、浙东白鹅的必需脂肪酸相对含量(15.27%)最高,分别与其它鹅种间存在不同显着水平的差异;江山白鹅的ω3(3.16%)、浙东白鹅的ωω6(12.96%)和ω7(5.28%)、莱茵鹅的ω9(49.79%)相对含量最高,均极显着高于其它鹅种(P<0.01);浙东白鹅ωω6:ω3值(5.63)最高,江山白鹅的(3.78)最低,各鹅种间的差异极显着(P<0.01),浙东白鹅的粗脂肪含量(3.72%)最高,极显着高于江山白鹅和莱茵鹅(P<0.01),显着高于永康灰鹅(P<0.05);永康灰鹅的腹脂率(3.47%)最高,江山白鹅的最低(0.55%),二者与其它鹅种间均呈极显着差异(P<0.01);各族不饱和脂肪酸相对含量与粗脂肪、腹脂率之间呈不同程度的相关,17项脂肪酸组成指标间也存在不同程度的相关,其中以油酸与亚油酸的相关性最高;主成分分析获得的前3个主成分分别解释总变异的46.89%、30.01%和13.27%,累积贡献率达到90.17%;浙东白鹅的综合主成分值排名第一;聚类结果表明,5个鹅种聚为3类,浙东白鹅与莱茵鹅聚为一类,永康灰鹅与江山白鹅聚为一类,朗德鹅作为独立分支。
原昊[3]2010年在《鹅MC4R、LPL、ApoB和PPARγ基因多态性及MC4R基因在填饲鹅中表达模式的研究》文中研究说明本研究以朗德鹅、江山白鹅、浙东白鹅、永康灰鹅和莱茵鹅五个鹅种共132只个体为供试群体,针对MC4R、LPL、PPARy和ApoB基因在其他动物中已经发现的多态位点,设计引物,利用PCR-SSCP技术,在群体内研究了上述基因在各个体中的SNPs及其与肉质和屠体性状的关联性。研究结果对于阐明鹅肥肝形成机理、动物肥胖机理、鹅脂类代谢及育种改良等均具有重要意义。另外,还进行了朗德鹅填饲前后MC4R基因在各组织中表达模式的研究。应用强制填饲技术建立腹型肥胖朗德鹅模型,提取填饲后及正常朗德鹅新鲜腹脂、肝脏等13处组织的总RNA, SYBR Green I荧光定量PCR法检测各组织MC4R基因的表达,选择β-actin作为内参基因,使用半定量2-△△CT法分析结果。结果显示如下:1鹅MC4R、LPL、PPARy和ApoB基因多态性与屠体、肉质性状相关性研究PCR-SSCP结果表明,在本实验所有鹅个体中,除了PPARy基因所扩增出片段中没有发现SNPs外,其他基因均发现SNPs存在。它们分别是:SNPs-MC4R128(G→A)、 SNPs-LPLexton3-246(G→A)、SNPs-apoB4507(A→G)。其中,SNPs-MC4R128(G→A)检测到两种基因型AA型和BB型,SNPs-LPLexton3-246(G→A)检测到3中基因型HH型、Hh型及hh型,SNPs-apoB4507(A→G)中也检测到叁种基因型YY型、Yy型及yy型。最小二乘分析和显着性检验表明:在屠体性状方面,SNPs-MC4R128位点BB型的胸肌率和腿肌率均极显着高于AA型个体(P<0.01)。SNPs-LPL exton3-246位点hh型个体胸肌率、屠宰率和活重均极显着高于HH型个体(P<0.01);HH型个体腹脂率极显着低于hh型个体(P<0.01),Hh型腹脂率显着低于hh型(P<0.05);SNPs-apoB4507位点YY基因型胸肌率和腿肌率均显着低于Yy型(P<0.05),且极显着低于yy基因型个体(P<0.01);YY、Yy型个体活重和腹脂率均极显着低于yy型(P<0.01);YY型个体的屠宰率指标也同样极显着低于yy型(P<0.01)。在肉质性状方面,SNPs-MC4R128位点AA型个体十五碳烯酸、棕榈油酸、硬脂酸、油酸及二十碳烯酸含量极显着高于BB型个体(P<0.01),亚麻酸含量显着高于BB型个体(P<0.05),而AA型个体豆蔻酸、十五烷酸、棕榈酸、亚油酸、花生四烯酸、山嵛酸、芥酸含量极显着低于BB型个体的含量(P<0.01)。SNPs-LPL exton3-246多态位点对应的叁种基因型中,HH型和Hh型个体月桂酸含量极显着高于hh型个体(P<0.01);HH型个体豆蔻酸含量极显着高于hh型个体(P<0.01),而Hh型个体豆蔻酸含量显着高于hh型个体(P<0.05);HH型个体十五烷酸、十五碳烯酸含量均极显着低于hh型个体(P<0.01);HH型和Hh型个体棕榈酸含量显着高于hh型(P<0.05),而十七碳烯酸的结果恰好与棕榈酸相反;对于硬脂酸,Hh型个体含量显着低于hh型(P<0.05);对于油酸,HH型个体含量显着低于hh型个体(P<0.05);HH型个体亚麻酸含量极显着高于hh型(P<0.01),Hh型个体的含量显着高于hh型(P<0.05);对于花生酸,HH型个体含量极显着高于hh型个体含量(P<0.01);对于粗脂肪含量来说,HH型个体粗脂肪含量显着高于hh型个体(P<0.05)。SNPs-apoB4507多态位点叁种基因型中,YY型个体月桂酸和花生酸含量均极显着高于yy型个体(P<0.01);YY型个体豆蔻酸含量显着高于yy型个体(P<0.05);YY型个体十五烷酸显着低于yy型个体含量(P<0.05);对于十五碳烯酸,YY型个体显着高于Yy型(P<0.05),并且极显着高于yy型个体(P<0.01);对于棕榈酸,YY型个体显着低于yy型个体(P<0.05);YY型个体棕榈油酸含量显着低于Yy和yy型(P<0.05);对于硬脂酸,YY和Yy型个体含量均显着高于yy型个体(P<0.05);对于亚麻酸,YY型个体显着高于Yy型(P<0.05),且极显着高于yy型(P<0.01);对于二十碳烯酸和花生四烯酸,YY型个体含量显着低于Yy型(P<0.05),且极显着低于yy型个体(P<0.01);YY型山嵛酸含量显着低于yy型个体(P<0.05);而在芥酸含量方面,YY型和Yy型个体均极显着低于yy型个体(P<0.01)。综上所述,可考虑将MC4R、LPL及ApoB基因作为影响鹅肉质和屠体性状的候选基因。2SYBR Green I荧光定量PCR法检测朗德鹅填饲前后MC4R基因表达情况PCR结果显示,MC4R基因及β-actin在填饲前后朗德鹅心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏、肌胃、小肠、胰腺、脑、胸肌、腿肌、腹脂、皮下脂等13种组织中均存在不同程度表达。SYBR Green I荧光定量PCR结果表明:在肾、小肠、心这3个组织中,填饲后朗德鹅MC4R表达量均比对照组中朗德鹅该基因表达量低,填饲后分别为填饲前表达量的0.41±1.80、0.65±5.75及0.72±1.22倍。而在其他组织中,MC4R基因表达量均有不同程度的增加,填饲组/对照组相对表达量倍数由高到低顺序分别为:脑22.78±1.00倍,肝9.08±2.80倍,肺5.28±1.83倍,胰3.78±3.01倍,腿肌3.07±3.64倍,胃2.90±0.97倍,皮下脂肪2.34±1.66倍,腹脂2.18±3.01倍,胸肌2.07±0.37倍,脾2.01±1.75倍。
刘朝阳[4]2010年在《鹌鹑OBR基因多态性对饲料消化率及生长屠体性能影响的初步研究》文中提出鹌鹑作为一种重要的经济动物,具有很高的营养价值、药用价值和实验价值。本试验以沙维马特肉用鹌鹑为试验对象,进行单笼饲养,自由采食、饮水和24小时光照,饲养期内采取人工投料,舍内温度、湿度、光照依常规要求而定。饲养期间每周记录耗料量和体重,计算平均采食量、日增重和料重比。并在试验的26-28天收集粪便,测定育成期粗脂肪、粗蛋白的消化利用率。常规免疫程序和免疫监控,卫生学指标符合鹌鹑的卫生要求。试验期为5周,试验结束,测定其生产性能、屠宰性能等指标。本研究选择瘦素受体基因(OBR)作为候选基因,以沙维马特肉用鹌鹑为试验对象,采用克隆测序结合单链构象多态性(PCR-SSCP)、人工创造酶切位点(PCR-CRS)的方法,检测了该基因部分片段的SNPs,并分析了突变位点导致的多态性与饲料消化率、生长及体组成性状之间的相关性。主要研究结果如下:1.克隆了鹌鹑OBR基因第4外显子序列,片段大小为204bp,已发布到GenBank(Accession No:GQ867177),与鸟纲中鸡形目中的原鸡(Gallus gallus)的同源性为100%,与火鸡(Meleagris gallopavo)的同源性为91%;克隆OBR基因第16内含子部分序列,片段大小为172bp,与原鸡的同源性为100%,与火鸡的同源性为97%;克隆了OBR基因第20外显子部分序列,片段大小为690bp,与原鸡的OBR基因的同源性达到91%;与火鸡OBR基因同源性为91%。2.在鹌鹑OBR基因不同区域共发现3个SNPs,分别是:第4外显子区域的C98T;第16内含子区域的C1038T;第20外显子区域的A260G。3. OBR基因第4外显子OBR4引物所扩片段多态位点C98T的3种基因型对该鹌鹑群体屠体率、心脏重有显着影响(P<0.05),AA型个体心脏重显着高于AB型和BB型个体(P<0.05),AA型个体屠体率显着高于BB型,BB型显着高于AB型(P<0.05)。OBR基因第16内含子引物OBR17所扩片段多态位点C1038T的3种基因型对该鹌鹑群体粗脂肪消化率有显着影响(P<0.05),对粗蛋白消化率有极显着影响(P<0.01);对21日龄体重、屠体重、屠体率、半净膛重、全净膛重、全净膛率、胸肌重、胸肌率肝脏重有一定影响(P<0.2)。CC型、CD型个体的、粗脂肪消化率、粗蛋白消化率显着高于DD型个体(P<0.05)。OBR基因第20外显子引物CRS所扩片段多态位点A260G的3种基因型对该鹌鹑群体21日龄体重、半净膛率有显着影响(P<0.05);对初生重、腹脂重、腹脂率、肝脏重有一定影响(P<0.2)。EE型、EF型个体21日龄体重显着高于FF型个体(P<0.05),FF型个体半净膛率显着高于EE型个体,EE型个体显着高于EF性个体(P<0.05)。
陶勇[5]2008年在《MC4R、POU1F1基因多态性及其与京海黄鸡生长、屠宰性状关系的研究》文中研究指明促黑激素皮质受体4(Melanocortin-4 receptor,MC4R)是动物下丘脑腹内侧核分泌的一类肽类物质,参与抑制体重的增加。垂体特异性转录因子(pituitary specifictranscription factor 1,POU1F1)参与调节机体的细胞生长与发育,促使生长激素(GH)、催乳素(PRL)和促甲状腺释放激素Beta因子(TSH-β)等基因的表达。鉴于MC4R基因和POU1F1基因对动物生长发育过程中的重要作用,本研究以优质肉鸡品种京海黄鸡为试验材料,采用PCR-SSCP研究了MC4R和POU1F1基因的单核苷酸多态性,并与该品种的生长及屠宰性状进行联合分析,为京海黄鸡分子标记辅助选择提供有效的遗传标记。同时,采用半定量RT-PCR技术分析比较了MC4R和POU1F1及相关基因在京海黄鸡和尤溪麻鸡中表达水平及相关关系,并与屠宰性状进行了相关分析。研究结果如下:(1)MC4R基因引物P1在京海黄鸡中检测到AA、AB、BB叁种基因型,A、B等位基因频率分别为0.929和0.071;引物P2检测到CC、CD、DD叁种基因型,C、D等位基因频率分别为0.72和0.28。卡方检验表明在这两个基因位点上,基因频率和基因型频率都未达到Hardy-Weinberg平衡状态。测序结果表明,引物P1在第662bp处发生了G→C的突变,引物P2多态位点是由于DNA的733-734bp之间插入一个C碱基引起的。这两个多态位点均为在鸡MC4R基因研究中首次被检测到。(2)POU1F1基因引物P1在京海黄鸡中检测到AA、AB、BB叁种基因型,A、B等位基因频率分别为0.925和0.075;引物P6检测到AA、AB、BB叁种基因型,A、B等位基因频率分别为0.5和0.5;引物P11检测到AA、AB、BB叁种基因型,A、B等位基因频率分别为0.396和0.604。卡方检验表明,引物P1检测到的基因位点上,等位基因频率和基因型频率未达到Hardy-Weinberg平衡状态,而引物P6、P11的基因位点均达到Hardy-Weinberg平衡状态。测序结果发现,引物P1在第1876bp处发生了G→A突变,1882bp处发生C→T突变;引物P6在3684bp处发生了A→T的突变;引物P11在4573bp处发生了T→C的突变。(3)MC4R基因P1引物AB基因型个体、P2引物DD基因型个体的体重、体尺及屠宰性能均略高于其他基因型,组合基因型AA/DD的体重、体尺要好于其他组合。POU1F1基因P1引物AA基因型个体、P6引物AA型个体、P11引物AB型个体的的体重、体尺及屠宰性能均略高于其他基因型,P1、P6组合AA/AB,P1、P11组合AA/AB,P、P11组合AB/AB效应最佳。因此,MC4R及POU1F1基因的SNPs多态位点对京海黄鸡的生长及屠宰性状的影响均比较重要,可以尝试将其作为相关性状的分子标记用于鸡的分子标记辅助选择。(4)不同基因型内个体体尺性状、屠宰性能间相关关系分析表明,优势基因型个体的体斜长、胸骨长、胸宽、胫长、胴体重、半净膛重、全净膛重、胸肌重、腿肌重等指标间绝大部分存在着显着或极显着的相关关系,但与肌胃重之间一般没有显着的相关关系。(5)京海黄鸡POU1F1、GH、PRL基因的表达量显着地高于尤溪麻鸡,京海黄鸡公鸡MC4R基因的表达量显着高于尤溪麻鸡公鸡,母鸡及总体间差异不显着。京海黄鸡与尤溪麻鸡群体内,POU1F1与GH、PRL基因的表达水平间存在着极显着的正相关关系。(6)京海黄鸡群体内,MC4R基因表达量与肝重极显着相关;尤溪麻鸡群体内,MC4R基因表达量与肝重、心重极显着相关。
杨晓刚[6]2007年在《北京鸭部分生化指标、A-FABP基因多态性与胸肌肌内脂肪含量及屠体性能指标的关系研究》文中研究说明北京鸭是世界上优良的肉鸭品种之一。Z型北京鸭是经过多年选育形成的北京鸭新品系,其父系特点是生长快、饲料报酬高,母系以高繁殖力见长。随着人们物质生活的提高,需要更优质的禽类产品,因此也加快了北京鸭向瘦肉型的选育速度。然而在提高其胸肌重、腿肌产量、瘦肉率,降低腹脂、皮脂含量的同时,有关肌间脂肪含量变化的研究较少。本研究利用屠宰测定、生化指标测定和基因序列的SSCP分析技术,对北京鸭Z2、Z4品系及其杂交后代各100只鸭子的胸肌肌内脂肪含量与屠体性状的关系、不同日龄体重与胸肌肌内脂肪含量及屠体性状的关系进行了系统研究,并筛选了生化标记及分子标记,为优质瘦肉型北京鸭选育,提供理论和实践依据。研究结果如下:1、Z型北京鸭2个品系及其杂交后代的肌间脂肪含量与屠体性能的相关分析。通过对300只北京鸭的屠宰测定、胸肌肌内脂肪含量测定和相关分析,结果表明Z2系母鸭腿肌重、皮脂重与肌间脂肪含量的相关系数极显着分别为0.3738、0.4349(P<0.01),均为中强正相关,而皮脂率相关系数显着。Z4系公母鸭肌间脂肪含量与胸肌重(率)、腿肌重(率)、腹脂重(率)、皮脂重(率)之间均相关系数不显着。杂交系公鸭皮脂重与肌间脂肪含量相关系数显着0.3(P<0.05);母鸭胸肌重、腿肌重与肌间脂肪含量均表现为显着弱正相关。综合本实验可得出:由于各品系用途不同各品系间及品系内肌间脂肪含量与屠体各指标相关程度的不同,在瘦肉型北京鸭选育过程中,要针对不同品系公母单独制定育种目标,以加快北京鸭的选育速度。2、北京鸭不同日龄体重与胸肌肌内脂肪含量及屠体性能的研究。通过对300只北京鸭的屠宰测定、胸肌肌内脂肪含量测定及每周体重测定和相关分析结果表明,在瘦肉型小型化北京鸭选育过程中,降低体重的同时,Z2系公鸭、杂交系母鸭不会降低胸肌肌内脂肪含量,但会降低胸肌率、皮脂率、腹脂率。Z2系母鸭、Z4系公母鸭、杂交系公鸭,降低体重会同时降低胸肌肌内脂肪含量,也会降低胸肌率、皮脂率、腹脂率。所以,在制定育种计划时,要充分考虑到各品系的不同情况,制定不同的育种计划。3、北京鸭、樱桃谷肉鸭的四个生化指标比较分析。通过对400只鸭子的血浆四个生化指标的测定,结果表明甘油叁酯可以作为选育Z2系公鸭皮脂、腹脂性状、Z2系母鸭腿肌性状、Z4系母鸭皮脂性状的间接选育指标。总胆固醇可以作为Z2系母鸭胸肌肌内脂肪含量、杂交系公鸭皮脂性状、樱桃谷公鸭皮脂性状、樱桃谷肉鸭母鸭胸肌肌内脂肪含量及腿肌、腹脂性状的间接选育指标。碱性磷酸酶可以作为Z4系公母鸭皮脂性状、杂交系母鸭皮脂率的间接选育指标。极低密度脂蛋白可以做为Z2系母鸭选育胸肌、腿肌,降低腹脂的间接选育指标,还可以作为樱桃谷母鸭胸肌肌内脂肪含量的间接选育指标。4、北京鸭两个品系的A-FABP基因SSCP分析,通过12%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,发现内含子叁337bp片段存在多态性,定义为AA、BB、AB型,测序结果发现AA、BB型个体之间发生一个碱基C→T的突变。相关分析表明,Z4系、Z2系都是AA型个体的胸肌肌内脂肪含量为最大,并且差异显着,在对北京鸭胸肌肌内脂肪含量选育时,可以针对AA型进行选育。以防止在提高胸肌时,降低胸肌肌内脂肪含量。
洪坤月[7]2007年在《鸡PRL、PRLR、FSHβ和ESRα基因多态性及其与早期产蛋性能关系的研究》文中提出动物垂体前叶分泌的催乳素(prolactin,PRL)具有广泛的生物学效应。在家禽中PRL主要影响就巢性,进而影响到产蛋性能等繁殖性状。催乳素要行使功能,必须与它的受体(Prolactin Receptor,PRLR)相结合,通过受体作用于靶细胞,引起靶基因的表达,PRL基因和催乳素受体基因的突变或敲除都会引起动物的繁殖障碍;促卵泡激素(Follical Stimulate Hormone,FSH)是由垂体前叶分泌的糖蛋白类促性腺激素,是由a和β亚基所组成的。在同一物种中,其a亚基hCG、LH、TSH为共有,而β亚基是特异的,决定其生物学功能,二者结合时在下丘脑-垂体-性腺生殖轴中起到重要的作用;雌激素受体(estrogen receptor,ESR or ER)是一种与特异激素应答DNA元件相结合的激活转录因子,有ESRa、ESR13两种亚型,ESRa为维持正常繁殖所必需,而ESRβ为维持正常效率的排卵所必需,它们对雌性繁殖周期中卵泡的生长发育发挥作用。本研究就以鸡的繁殖相关基因(PRL、PRLR、FSHβ和ESRa)为候选基因,运用PCR-RFLP和PCR-SSCP法检测基因变异,并分析其变异与鸡早期产蛋性能的相关性。1 PRL及其受体基因多态性与产蛋性状关系经检测发现,PRL基因调控区-378~-355bp处(GenBank accession no.AB011438)的PRLpro位点存在24bp插入/缺失突变,即5’-GACAAGAAGAGACAAGACAAGGAA-3’,而且在太湖鸡中还发现了一个新的SNP位点(A-269G)。本研究的绿壳蛋鸡80%为缺失型(AA型),没有发现插入纯合子,太湖鸡只发现一个插入纯合子BB型。PRL基因内含子2区有两个HaeⅢ酶切位点(4198bp和4169bp),4198bp处可全部切开,4169bp处部分切开,共产生3种基因型,并且还发现部分个体有插入片段。与产蛋关系分析表明,绿壳蛋鸡PRL基因调控区的AA型和AB型开产日龄呈显着相关(P<0.05、),而且内含子2区36周产蛋量的AA型显着高于AB型(P<0.05),二者的开产日龄差异也达显着水平。而太湖鸡PRL基因两个位点的虽都没达到显着水平(P>0.05),但开产50%后20周产蛋量各基因型间差异都在5个蛋以上。可见催乳素在母鸡产蛋早期对产蛋性状有一定的影响,可以作为基因标记研究的重点对象,进行进一步研究。在PRLR基因的外显子3和6分别发现单核苷酸变异。PRLR3位点(外显子3)的A9026G(GenBank accession no.AY237377)突变发生在PRLR cDNA的5'-UTR区域,不改变PRLR蛋白氨基酸序列;在PRLR6位点(外显子6)的G14820A(GenBank accession no.AY237376)是一个同义突变。经研究发现PRLR基因对早期平均蛋重有一定的影响,而对其他产蛋性能(开产日龄、蛋型指数、早期产蛋量)影响均不显着(P>0.05)。2 FSHβ基因多态性与产蛋性状关系FSHβ基因5’调控区和外显子3经PCR-SSCP检测发现,两个鸡群在FSHβpro位点都有多态,太湖鸡发现6处碱基差异,分别是:G-494A,T-470A,A-464G,-450插入碱基A,A-405G,A-361G;而绿壳蛋鸡在该位点有3处突变,分别是A-464G,-450插入碱基A,A-405G,有3种基因型。在FSHβexon3位点,太湖鸡没有多态,绿壳蛋鸡有3种基因型,对其进行SNPs分析,测序发现一处碱基突变,即A2447G(GenBank accession no.AF467082),但这个突变发生在FSHβcDNA的3'非编码区,不参与FSHβ蛋白氨基酸编码。与产蛋性状关系分析发现,绿壳蛋鸡FSHβpro位点AA型和AB型36周平均产蛋量差异显着(P<0.05),外显子3的AA型和AB型开产日龄呈显着相关(P<0.05);太湖鸡在调控区的BB型开产50%后20周平均产蛋量比AA型和AB型高出6个蛋。FSHβ基因调控区可以作为分子标记辅助选择。3 ESRa基因多态性与产蛋性状关系ESRa基因5'侧翼调控区和内含子1区经PCR-SSCP检测,发现绿壳蛋鸡5例翼调控区有两种基因型,两等位基因C的频率为0.86,D的频率为0.14。测序发现CD型中存在4处碱基突变,分别是:A-34G,T-76C,T-79C,C-102T。这4处SNPs均发生在ESRa基因cDNA的5'侧翼非编码区,不参与氨基酸编码;而太湖鸡在该位点只有一种纯合基因型。另外,绿壳蛋鸡ESRa基因内含子1区发现3处SNPs,分别是:T122C,A155G,C169T。对于绿壳蛋鸡多态与产蛋性能关系分析表明,ESRa5'侧翼调控区基因的CC型和CD型36周平均产蛋量差异显着(P<0.05)。4基因间的交互作用分析基因间交互作用分析时发现,太湖鸡催乳素受体基因外显子3和外显子6有极显着的交互作用(p<0.01),产蛋量较高的合并基因型CCFF可以作为太湖鸡选育的参考;对于绿壳蛋鸡4个基因6个位点的交互作用分析表明,FSHβ的pro和exon3位点极显着相关(p<0.01),但二者对36周产蛋性能影响也不显着(p>0.05)。推测是因为有些突变会使产蛋性能下降,而有些又会促进产蛋性能的提高,所以必须利用各种分子生物学技术尽可能多的检测出影响鸡产蛋性能的基因位点和突变,为育种提供更为完整和准确的理论依据。
黄煌[8]2010年在《鸡脂联素基因多态性及其与经济性状的相关性研究》文中进行了进一步梳理脂联素是脂肪细胞特异性分泌的一种细胞因子,是至今发现的唯一与肥胖呈负相关的脂肪细胞特异性蛋白,是生物体能量平衡、葡萄糖和脂肪代谢以及摄食的重要调控因子。运用PCR扩增、DNA池测序、PCR-RFLP和CRS-PCR-RFLP技术检测了F2资源群体中脂联素(adiponectin)基因的遗传变异情况,并通过最小二乘分析评价了该基因变异位点与主要经济性状的关联性。主要结果如下:1、在F2资源群体中,由鸡脂联素基因检测到6个SNPs,其中位于外显子1上:c.A99G的同义突变,产生了AA、AB和BB叁种基因型;c.T126C的同义突变,产生了CC、CD和DD叁种基因型。位于外显子2上: c.C474T的同义突变,产生了EE、EF和FF叁种基因型;c.C565G的错义突变,导致谷氨酰胺(CAG)转变为谷氨酸(GAG),产生了GG、GH和HH叁种基因型;c.G354A的同义突变。位于内含子2上:g.C536T的突变。通过PCR-RFLP法,对c.A99G、c.T126C和c.C565G分别利用内切酶Hsp92II、MspI和MvaI在F2资源群体中进行酶切;采用CRS-PCR-RFLP法,对c.C474T成功创造了Taq I酶切位点。群体遗传学表明:c.A99G位点多态信息含量为高度多态(0.2479),c.T126C、c.C474T和c.C565G位点多肽信息含量都为中度多态(0.3070~0.3569)。经χ2适合性检验,该群体在脂联素基因c.A99G位点处于平衡状态,在c.T126C、c.C474T和c.C565G位点都处于极不平衡状态。2、对4个酶切位点多态性与固始鸡-安卡鸡资源群F2代群体主要经济性状关联分析表明,脂联素基因c.A99G位点突变与双翅重率(P<0.01)、4周龄胫长(P<0.05)和腿肌纤维饱满度率(P<0.05)等显着相关;c.T126C位点突变与腿肌重(P<0.05)、8周龄胸角(P<0.05)、腿肌纤维面积(P<0.05)和乳酸脱氢酶(P<0.05)等显着相关;c.C474T位点突变与屠宰率(P<0.01)、半净膛率(P<0.01)、腹脂重(P<0.05)和腹脂率(P<0.05)等显着相关;c.C565G位点突变与双翅重率(P<0.05)、腹脂重(P<0.01)和腹脂率(P<0.01)等显着相关。
参考文献:
[1]. 鸡OBR基因多态性与生长和体脂性状的相关研究[D]. 王颖. 东北农业大学. 2003
[2]. 鹅FAS、OBR、THRSPa和Apo-AI基因多态性及FAS和Apo-B基因在填词鹅中表达模式的研究[D]. 弓彦. 南京农业大学. 2011
[3]. 鹅MC4R、LPL、ApoB和PPARγ基因多态性及MC4R基因在填饲鹅中表达模式的研究[D]. 原昊. 南京农业大学. 2010
[4]. 鹌鹑OBR基因多态性对饲料消化率及生长屠体性能影响的初步研究[D]. 刘朝阳. 东北农业大学. 2010
[5]. MC4R、POU1F1基因多态性及其与京海黄鸡生长、屠宰性状关系的研究[D]. 陶勇. 扬州大学. 2008
[6]. 北京鸭部分生化指标、A-FABP基因多态性与胸肌肌内脂肪含量及屠体性能指标的关系研究[D]. 杨晓刚. 西北农林科技大学. 2007
[7]. 鸡PRL、PRLR、FSHβ和ESRα基因多态性及其与早期产蛋性能关系的研究[D]. 洪坤月. 南京农业大学. 2007
[8]. 鸡脂联素基因多态性及其与经济性状的相关性研究[D]. 黄煌. 河南农业大学. 2010
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