导读:本文包含了抑制性削减杂交论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:胆碱,抑制,磷酸,细胞,基因芯片,神经,病毒。
抑制性削减杂交论文文献综述
朱明姬,姜日花,李增勋[1]（2006）在《抑制性削减杂交技术筛选神经鞘氨醇磷酸胆碱对人真皮成纤维细胞差异表达基因》一文中研究指出目的利用抑制性削减杂交(SSH)技术构建神经鞘氨醇磷酸胆碱(SPC)对人真皮成纤维细胞的差异表达 cDNA削减杂交文库,从中克隆出差异表达基因,在基因水平上研究SPC促进创伤愈合的机理提供线索。方法人皮肤成纤维细胞原代培养及总RNA提取,poly(A)+RNA的纯化,抑制性削减杂交,两轮的PCR,(本文来源于《中华医学会第十二次全国皮肤性病学术会议论文集》期刊2006-06-30）
李静[2]（2006）在《利用抑制性削减杂交技术研究抗CD3、CD28单抗共刺激人T淋巴细胞的基因差异表达》一文中研究指出通过TCR产生的第一信号和B7与CD28结合所介导的第二信号,导致人初始T细胞的活化、增殖与免疫反应。这些信号受一个复杂的网络调节,该网络是由许多基因组成和参与的。为了研究参与人T细胞信号转导的基因,本文以正常人初始T细胞作为对照组,以抗人CD3单抗联合抗人CD28单抗激发的人T细胞作为实验组,进行抑制性削减杂交。结果筛选到43个侯选克隆,对其单向测序后,经过与GenBank同源序列比较,证实了4个克隆所编码的基因参与了T细胞信号转导的下游通路,分别为CCND2、RHOF、RHOA和IRF4;新发现19个克隆所代表的基因(其中4个为重复克隆)可能与T细胞信号转导途径有关;另外20个克隆在GenBank中无法查到对应的同源基因,可能代表了新基因。对这些基因的进一步研究,有助于阐释T细胞的信号转导机制,为了解体内活化的T细胞参与的生理和病理过程,具有重要的指导意义。(本文来源于《苏州大学》期刊2006-05-01）
汤勃,王宇明,刘俊,王方,张瑞[3]（2004）在《抑制性削减杂交鉴别早期人胎肝细胞乙型肝炎病毒感染相关基因》一文中研究指出乙型肝炎的宫内感染涉及乙型肝炎病毒(HBV)受体问题,其机制尚不明确,一般认为胎肝细胞仍然是主要靶细胞。虽有多篇报道表明晚期(孕22～24周)胎肝细胞可在体外被HBV所感染,但目前鲜见涉及人类胎肝细胞HBV受体的研究报道。设想早期胎肝细胞由于分化程度较低,未能表达某些特定分子,因此缺乏对HBV的易感性;通过特定条件进行体外培养,在细胞分化过程中这些特定分子表达而获得易感性。鉴别出新表达的基因,从中可能发现HBV感染相关基因。此方法以HBV实(本文来源于《中华肝脏病杂志》期刊2004年07期）
朱明姬[4]（2004）在《利用基因芯片技术及抑制性削减杂交技术研究神经鞘氨醇磷酸胆碱对人真皮成纤维细胞基因表达的影响》一文中研究指出神经鞘氨醇磷酸胆碱（Sphingosylphosphorylcholine,SPC）是神经鞘磷脂的一种代谢产物。人们开始发现SPC是Niemann –Pick病（NPD）中沉积的鞘脂类，后来发现SPC有很强的促有丝分裂作用，明显促进3T3成纤维细胞DNA合成，且能增加细胞数。这种促有丝分裂作用明显强于表皮生长因子、胰岛素等，而且与它们有协同作用。在愈合能力差的糖尿病小鼠实验中证实，SPC具有促进多种细胞增殖、伤口愈合和减少瘢痕形成等作用，从此SPC受到很多学者的关注。最近发现SPC促进细胞的移动，诱导成纤维细胞表达与细胞移动有关的血纤维蛋白溶酶原激活剂。有实验证实SPC不仅在创伤愈合的组织形成期起作用，而且在组织再塑期同样起重要的作用。可见，SPC在创伤愈合的多个阶段均起重要的促进作用。创伤愈合是非常复杂的生物学过程。本研究利用基因芯片技术和SSH技术，重点研究了SPC刺激人皮肤成纤维细胞时基因表达谱的变化，在基因水平上研究SPC促进创伤愈合的机理，同时研究了SPC刺激人皮肤成纤维细胞诱导表达CTGF时部分信号传递途径。结果如下：1. SPC对原代培养的人皮肤成纤维细胞DNA合成影响（1）SPC对原代培养的成纤维细胞DNA合成的促进作用有浓度依赖性；<WP=101>低浓度时有促进作用即 2μM时就有促进作用，5 μM 时 达最高值，超过20 μM时则出现毒性作用，DNA合成不仅不增加反而出现细胞退化。（2）SPC以5 μM浓度处理24h、48h、72h后DNA合成速度明显较对照组高，这表明SPC处理长达72h 时，SPC仍有明显的促进DNA合成作用，这种持久性的作用有可能与它的长半衰期（半衰期18 h）有关。利用基因芯片技术研究SPC作用人皮肤成纤维细胞时基因表达谱的变化基因芯片的8096个基因中有意义的信号位点有194个，其中表达增加2倍以上的基因为52个、表达减少一半以下的基因为49个。根据基因功能初步将它分为11类: 第一类是与细胞增殖有关的基因，共3个；第二类是与细胞骨架、细胞移动、细胞外基质产生等有关的基因，共16个；第叁类是转录因子及转录因子激活剂，6个; 第四类为核糖体蛋白，1个；第五类为抑制肿瘤有关的基因，共3个；第六类是免疫、炎症和细胞因子有关的基因，共4个；第七类是代谢有关的基因，共7个；第八类是DNA、蛋白等结合有关的基因，共5个; 第九类是凋亡及应激蛋白有关的基因，共1个；第十类是离子通道有关的基因，共5个；第十一类是其他功能或不知功能的基因，共17个；11类基因中7类基因可能与创伤愈合有关，其中与创伤愈合密切关联的几个基因是CTGF、Cyr61、 PA、 PAI、 IL-6、 tubuline、 actin like- 7A、 transgelin、 TNF-α-induced protein 6 等。这些基因中CTGF表达水平最高，因此我们认为SPC 促进创伤愈合过程中CTGF是重要的下游因子。3. 利用SSH方法研究SPC作用人皮肤成纤维细胞时差异表达的基因<WP=102>采用SSH技术从 SPC处理组的264个白色菌落中查出28个差异表达克隆，从对照组的196个白色菌落中筛查出26个差异表达克隆。利用Northern 印迹，从 SPC处理组差异表达的28个克隆中确定了6个差异表达基因，对照组26个差异表达克隆中没有确定差异表达克隆。对6个差异表达克隆插入序列的分析表明, 克隆FBSPCT02G 的同源性基因是 Homo sapiens thrombospondin 1 -THBS1,克隆FBSPCT04A的同源性基因是Homo sapiens transferrin receptor -TFRC，克隆FBSPCT04H的同源性基因是 H.sapiens mRNA for oxytocin receptor，克隆FBSPCT07E的同源性基因是Homo sapiens zinc finger transcription factor-ZNF207 mRNA, 克隆FBSPCT06E的同源性基因是 Homo sapiens matrix metalloproteinase 2 -MMP2，克隆FBSPCT08F是新基因。4. 利用Northern 印迹技术分析SPC处理后人皮肤成纤维细胞CTGF mRNA的表达以不同浓度的SPC作用人皮肤成纤维细胞时，CTGFmRNA的表达随着SPC的浓度的增高而增高。SPC的浓度为1μM~5μM时，CTGFmRNA表达明显较0 μM时高，10μM时CTGFmRNA表达有下降趋势，但仍处于较高水平。当SPC浓度为5μM，观察不同作用时间对CTGFmRNA表达的影响，发现作用时间为3h时CTGFmRNA表达没有明显的变化，6h时CTGFmRNA表达明显的较0h 增高，12h时CTGFmRNA表达继续保持在较高水平，但24h时CTGFmRNA表达显着下降。<WP=103>5. 利用Western 印迹分析SPC处理后人皮肤成纤维细胞CTGF蛋白表达不同浓度的SPC 处理24h后观察CTGF蛋白表达。当SPC浓度为0.5 ??到???时，在38 kDa分子量位置上出现阳性条带，均较0??表达增高。利用Northern 印迹技术分析放线菌酮预处理后SPC 诱导CTGFmRNA表达的变化当单用SPC处理时CTGFmRNA表达较对照组显着增高。单用蛋白合成抑制剂放线菌酮（cycloheximide -CHX)以 10 ?g/ml CHX处理时，CTGFmRNA表达明显较单用SPC处理组增高。当SPC与CHX同时处理时，CTGFmRNA表达更加显着，较单用CHX处理组高。这结果提示SPC诱导CTGFmRNA表达是直接作用于CTGFmRNA转录，且 SPC诱导CTGFmRNA表达时受某些因子的抑制，当放线菌酮（CHX）抑制了这些因子时CTGFmRNA的表达增高。7. 利用 RT-PCR方法分析百日咳毒素预处理后SPC 诱导人皮肤成纤维细胞CTGFmRNA表达不同浓度(本文来源于《吉林大学》期刊2004-04-01）
抑制性削减杂交论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
通过TCR产生的第一信号和B7与CD28结合所介导的第二信号,导致人初始T细胞的活化、增殖与免疫反应。这些信号受一个复杂的网络调节,该网络是由许多基因组成和参与的。为了研究参与人T细胞信号转导的基因,本文以正常人初始T细胞作为对照组,以抗人CD3单抗联合抗人CD28单抗激发的人T细胞作为实验组,进行抑制性削减杂交。结果筛选到43个侯选克隆,对其单向测序后,经过与GenBank同源序列比较,证实了4个克隆所编码的基因参与了T细胞信号转导的下游通路,分别为CCND2、RHOF、RHOA和IRF4;新发现19个克隆所代表的基因(其中4个为重复克隆)可能与T细胞信号转导途径有关;另外20个克隆在GenBank中无法查到对应的同源基因,可能代表了新基因。对这些基因的进一步研究,有助于阐释T细胞的信号转导机制,为了解体内活化的T细胞参与的生理和病理过程,具有重要的指导意义。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
抑制性削减杂交论文参考文献
[1].朱明姬,姜日花,李增勋.抑制性削减杂交技术筛选神经鞘氨醇磷酸胆碱对人真皮成纤维细胞差异表达基因[C].中华医学会第十二次全国皮肤性病学术会议论文集.2006
[2].李静.利用抑制性削减杂交技术研究抗CD3、CD28单抗共刺激人T淋巴细胞的基因差异表达[D].苏州大学.2006
[3].汤勃,王宇明,刘俊,王方,张瑞.抑制性削减杂交鉴别早期人胎肝细胞乙型肝炎病毒感染相关基因[J].中华肝脏病杂志.2004
[4].朱明姬.利用基因芯片技术及抑制性削减杂交技术研究神经鞘氨醇磷酸胆碱对人真皮成纤维细胞基因表达的影响[D].吉林大学.2004
论文知识图
