导读:本文包含了定量测活论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:量测,限制性,核酸,蛋白,论文,内切,活黑度值。
定量测活论文文献综述
朱帮福[1]（2001）在《重组人骨形成蛋白成骨分化及其定量测活的研究》一文中研究指出骨形成蛋白（bone morphogenetic protein，BMP）的发现证实了骨形成的诱导学说，为难治性骨折和骨缺损的治疗提供新的希望。从1988年Wozney首次克隆人BMP cDNA基因，至今已发现近20种人BMP。BMP属于TGF-β超家族成员，不仅在骨骼的发育和再生修复中发挥关键作用，而且在中胚层的诱导和分化、造血组织的形成和发育、神经系统的发育和修复等方面都起着重要作用。因而对BMP的研究不仅有重要的理论意义，而且还具有广阔的临床应用前景。从骨组织提取BMP，方法烦琐、收获量少、纯度低、重复性差，因此，用基因工程制备BMP就成为将BMP推向应用的必然途径。国内外在COS、CHO、昆虫等真核细胞中已经表达得到不同种人BMP，但表达量低，成本昂贵；我研究组率先在大肠杆菌中高表达获得具诱骨活性的人BMP-2和-3羧基端肽，为BMP的研究和应用提供了新来源。 然而BMP的研究和应用遇到了一大难题——至今还没有理想的定量测定BMP生物学活性的方法，这大大限制了BMP临床应用的进度。目前国内外对BMP的测活，基本上还是沿用Urist最早采用的体内植入法，即将BMP 第 四 军 医 大 学 博 土 论 义 植入动物骨以外的组织（最常用是肌肉）中，植入后不同时间作组织学切片、 X－线照像等检查，以观察其有无诱导骨组织生成的活性。该方法能从整体观 察BMP的真实活性，但实验周期长（一般要2－3周）、只能定性而不能定量， 而且结果受动物品种、植入状况等因素影响，仅看BMP有无活性，难以比 较不同来源、不同批次等BMP的活性，这使BW的研究工作和生产应用缺 乏量的依据。为此国内外在BW定量测活研究上作过很多努力，包括在整 体植人法（常用植入肌肉中的方法称为肌袋实验）的基础上发展的方法。近 年来又发展了一些体外测活方法，如测定BMP刺激后培养细胞的ALP活性、 蛋白聚糖水平、钙盐沉积的量和速度等。但进展都不大，BMP的定量测活 仍未解决。 BMP定量测活困难的原因在于它是个分化因子。一般促进细胞生长繁 殖的生长因于可以用同位素前体参入DNA来观察促生长的效应，从而定义 其活性的单位。而BMP与这些细胞生长因子不同，它的活性表现在使细胞 分化上，促进细胞生长不是BMP活性的主要表现，有时反而抑制细胞繁殖； 故不能用DNA合成和细胞分裂繁殖的速度来衡量其活性。而且BMP促细胞 分化的表现又是多方面的，因此造成定量测活的困难。不过，因BMP最初 是作为诱骨分于被发现，所以其活性检测基本还是围绕BMP这一基本特性， 即促成骨分化来进行。 为此我们也从BMP分化功能的角度探讨了BMP的定量测活，包括测定 BMP刺激后ALP活性、合成蛋白量等的变化，除骨髓细胞外，其余细胞系 nP活性并无明显变化。另外我们还用放免法测定了BMP－2作用不同细胞 后骨钙素（OC）的含量变化，该指标虽然特异，但反应幅度不够大，最大 增加约1倍多，且该方法要用同位素，检测步骤烦琐。所以说BMP的研究， 特别是重组人BMP的研究和临床应用，迫切需要建立一种可快速定量的活 性测定方法。 近年克隆发现的Cbfal是成骨分化特异性转录因子，对成骨分化发挥极 其关键的转录激活作用，Cbfal的基因敲除或突变将导致全身骨骼发育障碍。 Cbfal 在非成骨细胞或成骨前体细胞均可上调成骨分化相关基因——一骨钙 一 第 四 军 医 大 学 博 士 论 文 素、碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase，ALPL骨桥素及 1型胶原基因的表达， 而且证实这些基因的启动子内均有与 Cbfa 结合的作用元件。研究发现， 某些正常情况下并无成骨细胞表型的细胞（如间充质细胞C3H10TI／2等）， 在BMP诱导其成骨分化过程中，首先出现Cbfal 的高表达，然后出现碱性 磷酸酶（ALP）、骨钙素（OC）、骨桥素的表达。这说明Cbfal是BMP作用 信号的下游靶分子，BMP诱导成骨分化是通过Cbfal的中介完成，即Cbfal 接到BMP刺激信号后，结合到成骨分化相关基因启动子内的Cbfal作用元 件，从而启动、激活这些基因的转录、表达。 这些研究结果使我们产生定量测定BMP活性的新思路。因骨钙素是成骨 分化特异性相关标志，所以我们选定骨钙素作为BMP诱骨分化的靶向指标。 而荧光素酶报告基因系统是近年发展起来、广泛应用的基因转录报告系统， 它是通过上游启动子启动Luciferase基因表达，然后检测荧光素酶分解底物产(本文来源于《第四军医大学》期刊2001-05-01）
董群,曹新文,邹国林,朱汝璠[2]（1987）在《一种简便实用的限制性核酸内切酶定量测活方法》一文中研究指出对限制性核酸内切酶进行酶学研究,无论在理论上或应用上都有着重要的意义。准确而简便的定量测活方法,是进行酶学研究的前提之一。目前这类酶的定量测活,多采用同位素标记法或微光密度扫描法,但前者受到标记底物来源、同位素半衰期和比强度的影响;后者需要昂贵的仪器,故它们的使用范围受到一定(本文来源于《遗传》期刊1987年04期）
邹国林,曹新文,史平,朱汝璠[3]（1986）在《一种灵敏实用的DNase Ⅰ定量测活方法》一文中研究指出DNase I的测活方法有紫外吸收法、同位素法和荧光法等.紫外吸收法简便,但灵敏度较低.同位素法灵敏度高,但实验条件要求高,且操作复杂.荧光法灵敏度较高,也简便,但影响因素较多.我们建立了一种以固定化DNA为底物的微量紫外吸收法,它较简便,灵敏度也较高.材料与方法材料:DNase I (Seravac Laboratories出(本文来源于《生物化学与生物物理进展》期刊1986年03期）
定量测活论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
对限制性核酸内切酶进行酶学研究,无论在理论上或应用上都有着重要的意义。准确而简便的定量测活方法,是进行酶学研究的前提之一。目前这类酶的定量测活,多采用同位素标记法或微光密度扫描法,但前者受到标记底物来源、同位素半衰期和比强度的影响;后者需要昂贵的仪器,故它们的使用范围受到一定
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
定量测活论文参考文献
[1].朱帮福.重组人骨形成蛋白成骨分化及其定量测活的研究[D].第四军医大学.2001
[2].董群,曹新文,邹国林,朱汝璠.一种简便实用的限制性核酸内切酶定量测活方法[J].遗传.1987
[3].邹国林,曹新文,史平,朱汝璠.一种灵敏实用的DNaseⅠ定量测活方法[J].生物化学与生物物理进展.1986
论文知识图
