转化生长因子β1通过赖氨酰氧化酶调控低氧诱导的大鼠支气管上皮细胞间充质转化

转化生长因子β1通过赖氨酰氧化酶调控低氧诱导的大鼠支气管上皮细胞间充质转化

论文摘要

目的:探讨转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)是否通过赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)参与低氧诱导的大鼠支气管上皮细胞间充质转化。方法:24只SD大鼠随机均分为常氧组、低氧组以及低氧+β-氨基丙腈(β-aminopropionitrile,β-APN)组。体外培养大鼠支气管上皮细胞,分为常氧组、TGF-β1组、TGF-β1+SB431542(TGF-β1受体拮抗剂)组、低氧组、低氧+SB431542组以及低氧+β-APN组。比色法测定并计算胶原蛋白交联,免疫组织化学法和Western blot检测大鼠支气管上皮细胞TGF-β1、LOX、E-钙黏蛋白(E-cadherin)以及波形蛋白(vimentin)的蛋白表达。结果:在大鼠动物模型中,低氧组支气管上皮细胞TGF-β1、LOX、vimentin蛋白表达以及胶原交联均明显高于常氧组,但E-cadherin蛋白表达则明显弱于常氧组,低氧对vimentin、E-cadherin蛋白表达以及胶原交联的影响均能被β-APN所逆转。离体细胞实验显示,常氧组大鼠支气管上皮细胞为铺路石状形态,TGF-β1组和低氧组大鼠支气管上皮细胞形态逐渐向梭形上皮间充质细胞转化,而β-APN能逆转大鼠支气管上皮间充质细胞转化。TGF-β1能诱导大鼠支气管上皮细胞LOX蛋白表达,呈浓度依赖性,并被SB431542所阻断。与常氧组比较,低氧组离体培养的大鼠支气管上皮细胞TGF-β1、LOX和vimentin表达及胶原交联明显升高,SB431542能明显下调TGF-β1或低氧诱导的大鼠支气管上皮细胞LOX和vimentin的表达及胶原交联;TGF-β1组和低氧组离体培养的大鼠支气管上皮细胞E-cadherin表达减弱,SB431542能逆转TGF-β1或低氧培养的大鼠支气管上皮细胞E-cadherin的表达。结论:TGF-β1介导LOX表达,促进低氧诱导的大鼠支气管上皮细胞间充质转化。

论文目录

  • 材 料 和 方 法
  •   1 主要材料和试剂
  •   2 方法
  •     2.1 低氧大鼠动物模型的建立
  •     2.2 细胞培养
  •     2.3 胶原蛋白含量及交联的测定
  •     2.4 免疫组织化学检测支气管上皮细胞LOX及EMT标记物蛋白
  •     2.5 Western blot检测支气管上皮细胞LOX及EMT标记物蛋白
  •   3 统计学处理
  • 结 果
  •   1 低氧状态下大鼠支气管上皮细胞TGF-β1及LOX表达的变化
  •   2 低氧及β-APN对大鼠支气管上皮细胞EMT相关标志物E-cadherin和vimentin表达的影响
  •   3 低氧、TGF-β1及β-APN对离体培养大鼠支气管上皮细胞形态学的影响
  •   4 低氧、TGF-β1及β-APN对大鼠肺组织及离体培养支气管上皮细胞的胶原含量和胶原交联的影响
  •   5 TGF-β1对常氧离体培养大鼠支气管上皮细胞LOX表达的影响
  •   6 TGF-β1及TGF-β1抑制剂对低氧离体培养支气管上皮细胞LOX表达的影响
  •   7 TGF-β1及TGF-β1抑制剂对低氧离体培养支气管上皮细胞EMT相关标志物E-cadherin及vimentin表达的影响
  • 讨 论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 夏晓东,彭燕平,雷丹,陈伟谦

    关键词: 低氧,支气管上皮细胞,转化生长因子,赖氨酰氧化酶,上皮间充质转化

    来源: 中国病理生理杂志 2019年12期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 呼吸系统疾病

    单位: 温州医科大学附属第二医院&育英儿童医院呼吸内科

    基金: 浙江省自然科学基金资助项目(No.LY12H01002),温州市科技计划资助项目(No.2017Y0182)

    分类号: R56

    页码: 2247-2254

    总页数: 8

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