Pseudomonas protegens H78中Crc调控基因突变的转录组学分析

Pseudomonas protegens H78中Crc调控基因突变的转录组学分析

论文摘要

转录后调控子Crc蛋白(Catabolite repression control protein)在防御假单胞菌(Pseudomonas protegens)H78中发挥着重要的代谢调控作用。运用RNA-seq (RNA sequencing)技术,针对H78野生型和H78Δcrc突变株开展比较转录组学研究,利用COG (Clusters of orthologous groups of proteins)、KEGG (Kyoto encyclopedia of genes and genomes)数据库对受到Crc调控的基因进行功能分类。转录组结果显示:Crc突变导致218个基因的转录子水平发生两倍以上的显著变化,其中105个基因表达上调,113个基因表达下调。Crc蛋白对碳、能量、脂肪及氨基酸代谢、抗生素合成等次级代谢具有全局调控作用,比如,脂质转运和代谢的基因簇(H7800275~00283)表达显著下调约2.7~8.1倍,能量生产和转换的cyoA2B2C2D2E1基因簇(H7805248~05252)基因表达显著下调约3.4倍,调控氨基酸转运与代谢的H7804826astAA4DB基因簇(H7804822~04826)基因表达显著上调约4倍,抗真菌剂藤黄绿菌素(pyoluteorin, Plt)的合成基因簇(pltLABCDEFG)、转运基因簇(pltIJKNOP)表达下调平均约3倍,而调控基因簇(pltR, pltM, pltZ)的表达平均下调不足2倍,整体上Plt合成受到Crc的显著正调控。Crc转录组学结果为进一步开展Plt等抗生素合成的分子调控网络与代谢工程研究奠定基础。

论文目录

  • 1 结果与分析
  •   1.1 H78WT与H78Δcrc基因表达水平情况
  •   1.2 P.protegens H78Δcrc转录组功能注释分析
  •   1.3 P.protegens H78Δcrc突变株的产物功能与代谢通路分析
  •   1.4 P.protegens H78Δcrc突变株对次级代谢产物Plt合成及基因表达的影响
  •   1.5 P.protegens H78的脂质转运和代谢、能量生产和转换、氨基酸转运与代谢途径受Crc调控较为显著
  • 2 讨论
  • 3 材料与方法
  •   3.1 菌株、质粒、引物及培养条件
  •   3.2 主要试剂和仪器
  •   3.3 转录组实验样品培养及取样
  •   3.4 RNA提取及转录组分析流程
  • 作者贡献
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 张晴晴,王正,刘玉洁,张雪洪,黄显清

    关键词: 转录组,藤黄绿菌素

    来源: 基因组学与应用生物学 2019年10期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,医药卫生科技

    专业: 生物学

    单位: 上海交通大学生命科学技术学院微生物代谢国家重点实验室

    基金: 国家自然科学基金(No.31270083,31470196)资助

    分类号: Q78

    DOI: 10.13417/j.gab.038.004497

    页码: 4497-4503

    总页数: 7

    文件大小: 1581K

    下载量: 128

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