5种食源性致病菌PCR检测方法的建立

5种食源性致病菌PCR检测方法的建立

论文摘要

目的建立食品中的沙门氏菌、副溶血性弧菌、大肠埃希氏菌O157:H7、金黄色葡萄球菌和单核细胞增生李斯特氏菌的PCR快速检测方法。方法以缓冲蛋白胨水为增菌培养基,采用直接提取法提取DNA并测定其核酸浓度。对PCR的退火温度、模板浓度进行优化,把5种目标菌分为两组进行检测分析,并进行特异性和灵敏度实验。结果 5种目标菌培养后均表现出良好的生长趋势。PCR扩增最佳退火温度为59℃, 5种目标菌的引物特异性好,方法的检测灵敏度高。沙门氏菌、副溶血性弧菌、大肠埃希氏菌O157:H7、金黄色葡萄球菌和单核细胞增生李斯特氏菌最低检出核酸浓度分别为0.0202、0.158、0.187、2.30和1.05μg/mL。结论该方法简便、快速、灵敏度高,能满足食品安全检测要求。

论文目录

  • 1 引言
  • 2 材料与方法
  •   2.1 材料、仪器与试剂
  •     2.1.1 菌种及来源
  •     2.1.2 主要仪器
  •     2.1.3 培养基与试剂
  •     2.1.4 引物
  •   2.2 实验方法
  •     2.2.1 菌株的培养
  •     2.2.2 DNA提取
  •     2.2.3 DNA提取液核酸浓度测定
  •     2.2.4 PCR扩增条件
  •     2.2.5 电泳及凝胶成像
  • 3 结果与分析
  •   3.1 增菌培养结果
  •   3.2 DNA提取方法
  •   3.3 单重PCR扩增
  •   3.4 多重PCR实验
  •   3.5 特异性实验
  •   3.6 多重PCR模板浓度优化
  •   3.7 灵敏度实验
  • 4 结论与讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 刘骆强,姚艳玲,管佳丽,朱洪亮

    关键词: 沙门氏菌,副溶血性弧菌,大肠埃希氏菌,金黄色葡萄球菌,单核细胞增生李斯特氏菌,聚合酶链式反应

    来源: 食品安全质量检测学报 2019年05期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 轻工业手工业

    单位: 嘉兴市食品药品检验检测院

    基金: 嘉兴市科技计划项目(2017BY18070)~~

    分类号: TS207.4

    页码: 1330-1335

    总页数: 6

    文件大小: 744K

    下载量: 440

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